天津口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

來源: 發(fā)布時間:2023-09-06

EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內更容易擴散,不需要嚴格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強調:“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同,EdU反應能在幾分鐘內完成,且不需要進行嚴格的樣品變性處理,使得組織成像更簡單易行?!奔毎鲋硻z測方法基于EdU與Apollo?熒光染料的完美結合準確檢測新合成的DNA,簡單,快速,準確。這種檢測方法非??焖?,且只需簡單的幾個步驟,因此也適用于高通量篩選試驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細胞的活力。上海哪家EdU細胞增殖檢測試劑盒值得信賴?天津口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

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EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預熱,然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現用現配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留山東正規(guī)EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢EdU細胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展前景如何呢?

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BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測原理的比較。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗體,由于空間位阻,雙鏈DNA須變性后才能使BrdU抗體與BrdU結合。法使用小分子標記的疊氮化物(Azide),無需DNA變性,操作更便捷,兼容性好,檢測結果更加穩(wěn)定可靠。本試劑盒檢測快速。相對于BrdU法,本試劑盒采用BeyoClick?EdU法檢測新合成的DNA,所需時間縮短。經本試劑盒處理后,增殖的細胞呈棕色,可以用普通光學顯微鏡進行觀察。HeLa細胞用本試劑盒檢測細胞增殖的效果參見圖3。圖3.HeLa細胞用本試劑盒檢測細胞增殖的效果圖。無EdU組觀察不到棕色染色(左側一列);EdU(10μM)孵育2小時組有明顯的棕色染色(中間一列);而用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)提前預處理0.5小時后,棕色染色減弱,說明DNA合成被抑制后,EdU的摻入被抑制(右側一列)。

EdU細胞增殖檢測和BrdU細胞增殖檢測的對比。小分子化合物AndyFluor?azide與EdU之間的點擊化學(ClickChemistry)反應不需要DNA變性,就可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析,該反應不受雙鏈DNA中堿基對的影響,因此客戶了BrdU摻入法的弊端。圖2.使用EdU細胞增殖檢測試劑盒對細胞和組織的染色效果。使用10μMEdU處理A549細胞2小時,然后分別使用AndyFluor?488azide(綠色,上圖)、AndyFluor?594azide(紅色,中間圖)檢測細胞增殖活性,使用DAPI進行復染(藍色)。腹腔注射EdU到小鼠體內(每公斤小鼠注射5mgEdU),分別于0、12、24小時之后取小鼠腸組織,制成切片用AndyFluor?488azide(綠色,下圖)檢測細胞的增殖情況,使用DAPI進行復染(藍色)。EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家便宜?上海東寰告訴您。

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該方法無需DNA變性,無需抗原修復,無需抗原抗體反應,簡單、靈敏、快速、準確,適合各種細胞系的細胞增殖檢測,尤其適用于各種細胞系的高通量篩選實驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細胞增殖變化。EdU方法無需DNA變性,完全適用于各種顯微成像技術,在10X,20X,40X都能得到很好的成像效果。EdU細胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結構及細胞內抗原識別位點。EdU細胞增殖檢測試劑盒的價格。如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒

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現在有一種新的檢測方法能避免這種情況的發(fā)生——EdU檢測。EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷)也是一種胸腺嘧啶核苷類似物,但其連有的炔羥基團在天然化合物中很少見,在細胞增殖時能夠插入正在復制的DNA分子中,基于EdU與染料的共軛反應可以進行高效快速的細胞增殖檢測分析,可以有效地檢測處于S期的細胞百分數。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比,更簡單,更快速,更準確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內更容易擴散,不需要嚴格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度天津口碑好的EdU細胞增殖檢測試劑盒原理