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來源: 發(fā)布時間:2023-02-19

通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒運(yùn)用再哪些領(lǐng)域?河北品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家

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EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強(qiáng)調(diào):“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同,EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成,且不需要進(jìn)行嚴(yán)格的樣品變性處理,使得組織成像更簡單易行?!奔?xì)胞增殖檢測方法基于EdU與Apollo?熒光染料的完美結(jié)合準(zhǔn)確檢測新合成的DNA,簡單,快速,準(zhǔn)確。這種檢測方法非??焖?,且只需簡單的幾個步驟,因此也適用于高通量篩選試驗(yàn),如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞的活力湖南EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒公司EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家。

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EdU細(xì)胞增殖方法簡單,方便,無需DNA變性,能夠與各種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記,以檢測細(xì)胞其他性狀特征。為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地擴(kuò)展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測儀器要求,完全解決您的實(shí)驗(yàn)難題。EdU細(xì)胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn),更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記(如P65抗體)等進(jìn)行多重標(biāo)記,從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息,更適合深入開展細(xì)胞功能方面的研究。

EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒更準(zhǔn)確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡單--無需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法,簡單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無需抗體,檢測染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測;更快速--無需過夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個檢測周期單需2.5小時;更兼容--對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記,能夠同時檢測細(xì)胞其他性狀特征EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的功能具體介紹。

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CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細(xì)胞,但由于每增殖一次熒光減弱一半,在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞,檢測靈敏度不是很高,通常單適用于流式細(xì)胞儀檢測。在進(jìn)行科學(xué)研究時,上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的重要性。福建哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買

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EdU與T非常相似,而EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。河北品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家

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