設(shè)計了一套能夠特異性標記“穆勒膠質(zhì)細胞”的系統(tǒng),再將能誘導神經(jīng)細胞形成的基因編輯系統(tǒng),包裝成“病毒”,注射到小鼠的視網(wǎng)膜。約1個月后,研究人員在小鼠的視網(wǎng)膜視神經(jīng)節(jié)細胞層,發(fā)現(xiàn)了由穆勒膠質(zhì)細胞轉(zhuǎn)分化而來的視神經(jīng)節(jié)細胞。這些誘導而來的視神經(jīng)節(jié)細胞,不僅可以對光刺激產(chǎn)生相應(yīng)的電信號,還可以和大腦中正確的腦區(qū)建立功能性聯(lián)系,將視覺信號傳輸?shù)酱竽X,成功恢復視覺功能。進一步的研究還表明,通過這一基因編輯技術(shù),還能將小鼠模型中特定區(qū)域的“星形膠質(zhì)細胞”非常高效地轉(zhuǎn)分化為多巴胺神經(jīng)元。轉(zhuǎn)分化而來的多巴胺神經(jīng)元,能將帕金森模型小鼠的運動障礙,逆轉(zhuǎn)到接近正常小鼠的水平。這項研究的負責人楊輝指出,盡管將膠質(zhì)細胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的基因編輯技術(shù)在實驗室里取得重要進展,但要將研究成果真正應(yīng)用于人類疾病的***,還有很多工作要做。人類的視神經(jīng)節(jié)細胞能否再生?帕金森患者是否能通過該方法被***?研究人員今后將從小鼠模型轉(zhuǎn)到靈長類模型,進一步深入研究。上海東寰疾病動物模型建模。提供疾病動物模型建模公司
配制成6mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實驗建立大鼠卵巢早衰模型1.實驗儀器及材料:如表1所示。表12.實驗方法:①動物信息:sd大鼠,雌性,6-8周,體重180-220g。普通環(huán)境飼養(yǎng),滅菌飼料飼養(yǎng),自由飲水。②分組及給藥劑量:如表2所示。表2③給藥途徑及頻率:腹腔注射;2mg、3mg組連續(xù)注射7天;4mg、6mg組***天、第八天注射;對照組連續(xù)7天注射生理鹽水。④病理檢測:末次注射后15天,動物麻醉,采集血液,分離血清,elisa法測定血清中e2、fsh、lh水平變化情況。解剖動物,取卵巢組織稱重,對大鼠的卵巢組織形態(tài)學進行觀察。注射期間每天稱重,給藥后每周稱重兩次,每天進行陰道涂片檢測動情周期。3.統(tǒng)計方法:采用graphpad進行統(tǒng)計分析。所有計量資料均采用均值±標準差表示采用單因素方差分析各組間均值的差異,p<。4.試驗結(jié)果:(3mg組注射完成后*存活一只,不進行統(tǒng)計)如表3、表4、圖1、圖2、圖3所示:①***水平:與空白組相比,2mg組、4mg組、6mg組e2水平均降低,但是只有2mg組有明顯降低(p<),如圖1所示;與空白組相比,2mg組、4mg組、6mg組fsh水平均上升,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖2所示;與空白組相比。徐州泌尿疾病動物模型建模早期階段科學假說與疾病潛在藥物治療效果評價始于小鼠疾病模型構(gòu)建及其實驗室研究。
本能發(fā)明的另一目的是公開了如上所述的方法制備的鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型的用途是將該模型用于腰椎間盤突出***方法研究和/或影像學檢測研究。進一步地,該模型用于與磁性相關(guān)的***和/或檢測方面的研究,比如經(jīng)顱磁刺激和核磁共振。本發(fā)明利用壓迫元件插入腰椎椎間孔,模擬腰椎間盤突出后突出物對神經(jīng)根的持續(xù)慢性的機械壓迫癥狀,有益效果有:1.應(yīng)用機械壓迫神經(jīng)根模擬腰椎間盤突出病理,癥狀的病因?qū)W與臨床情況接近;2.相關(guān)的疼痛行為類似于特定的慢性疼痛癥狀,且易于客觀測量;3.制備方法簡單,對動物損傷小,穩(wěn)定性好,成功率高;4.造模關(guān)鍵材料壓迫元件不受磁場干擾,無在磁場作用下移位風險,有利于后續(xù)對動物進行磁療,經(jīng)顱磁刺激等***及核磁共振等檢查;5.造模關(guān)鍵材料壓迫元件不影響磁場,不會對***儀器和核磁共振等儀器產(chǎn)生不良影響;6.此方法獲得的模型由于采用了h62黃銅或聚乳酸材料制備的壓迫元件,使得研究方法與檢測方法不受磁場作用限制,豐富了腰椎間盤突出臨床前研究的***方法及影像學檢測,為臨床研究提供理論依據(jù)。以下將結(jié)合附圖對本發(fā)明作進一步說明,以充分說明本發(fā)明的目的、技術(shù)特征和技術(shù)效果。附圖說明圖1是壓迫元件插入椎間孔的結(jié)構(gòu)示意圖
通過pirb敲入動物模型與不同類型cre小鼠的雜交,可以用于研究ad不同***或不同細胞類型pirb的調(diào)節(jié)作用。附圖說明圖1為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位點的打靶質(zhì)粒載體的構(gòu)建圖;圖2為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠模型的構(gòu)建方法的流程圖;圖3為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr結(jié)果鑒定電泳圖;圖4為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠驗證pirb基因敲入效果的測序峰圖;圖5為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的方法示意圖;圖6為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的結(jié)果圖。動物疾病模型廣泛應(yīng)用于疾病機制研究。
新華社上海4月9日電(記者張建松)利用先進的基因編輯技術(shù),我國科學家在***神經(jīng)性疾病的基礎(chǔ)研究方面,取得重要進展。***在小鼠模型上,成功恢復長久性視力損傷小鼠的視力,同時還基本消除了帕金森模型小鼠的疾病癥狀。在科技部、國家自然科學基金委、中國科學院、上海市的相關(guān)項目資助下,由中國科學院腦科學與智能技術(shù)***創(chuàng)新中心(神經(jīng)科學研究所)、上海腦科學與類腦研究中心、神經(jīng)科學國家重點實驗室楊輝研究組完成的這項研究,通過基因編輯技術(shù),成功誘導膠質(zhì)細胞“變身”為神經(jīng)元。這為阿爾茲海默癥、帕金森癥、青光眼等眾多神經(jīng)退行性疾病的***,探索了一個新的途徑。國際**學術(shù)期刊《細胞》8日在線發(fā)表了相關(guān)研究論文。人類的神經(jīng)系統(tǒng)包含成百上千種不同類型的神經(jīng)元。在成熟的神經(jīng)系統(tǒng)中,神經(jīng)元一般不會再生,一旦死亡,就是長久性的。而神經(jīng)元的死亡,則會導致不同的神經(jīng)退行性疾病。在常見的神經(jīng)性疾病中,視神經(jīng)節(jié)細胞死亡導致的長久性失明和多巴胺神經(jīng)元死亡導致的帕金森癥尤為特殊,它們都是由于特殊類型的神經(jīng)元死亡所導致的。如何在成體中讓視神經(jīng)節(jié)細胞和多巴胺神經(jīng)元獲得再生?研究人員對小鼠模型的膠質(zhì)細胞進行了基因編輯。小鼠疾病模型有助于遺傳性疾病致病基因的發(fā)現(xiàn)與驗證。寶山區(qū)C57小鼠疾病動物模型建模
查閱已有的相關(guān)小鼠模型綜述文獻。提供疾病動物模型建模公司
在cns,pirb的功能和下游抑制性信號通路仍然未被闡明,因此迫切需要pirb的細胞和動物模型。目前對于pirb基因功能的研究,多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide,pep)和抑制劑,或者采用慢病毒轉(zhuǎn)染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響,后者慢病毒轉(zhuǎn)染在原代細胞和在體的轉(zhuǎn)染效率比較低,使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題,我們通過crispr/cas9技術(shù)建立了pirb基因敲入小鼠,將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點,為研究pirb在免疫系統(tǒng)或者神經(jīng)系統(tǒng)的作用和機制提供了很好的工具。技術(shù)實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動物模型。提供疾病動物模型建模公司