體液樣本收集外泌體,唾液需要注意的事項:
1)、包括采樣部位;到目前為止,大部分的唾液EVs分析,其樣本來自整個唾液,然而,不同腺體分泌的EVs量和成分肯定不一樣,所以需要對樣本采集標(biāo)準(zhǔn)化,根據(jù)不同的研究需要,選取不同的部位來收集唾液。
2)、采樣時間;眾所周知,唾液分泌有明顯的晝夜差異,同時,飲食、吸煙,運動等也很大影響唾液的成分。所以采集的時間也需要標(biāo)準(zhǔn)化。
3)、對受試者的了解;至少1小時內(nèi)沒有刷牙、近幾天沒有做過口腔護(hù)理。其他口腔疾病需要考慮。
4)、采集技術(shù):分為刺激(主動)取樣和無刺激(被動)取樣。 云生物的外泌體可做WB檢測。上海提取試劑盒外泌體報價
分離:超速離心法:超速離心法是外泌體分離**常見的技術(shù)之一。據(jù)不完全統(tǒng)計,約有1/2的研究者會選擇該種方式分離外泌體。該方法由幾個離心步驟組成,可分步去除細(xì)胞、細(xì)胞碎片和大囊泡,沉淀外泌體。但該種方法用于血漿和血清等粘性生物液體時效率較低,且重復(fù)離心操作有可能對外泌體造成損害,從而降低其質(zhì)量。如將超速離心配合蔗糖溶液進(jìn)行梯度密度離心可得到純度更高的外泌體,是公認(rèn)可以得到**高純度的分離方法。但此法對離心時間非常敏感,一般需要8-30h,產(chǎn)率較低,同樣不適用于血漿和血清等粘性生物液體中外泌體的分離,因此難以***普及。聚合物沉淀法:第二大主流的外泌體分離技術(shù)就是基于聚合物的沉淀法了,**常見的聚合物是聚乙二醇(PEG)。通常將含有聚合物的沉淀溶液與生物體液混合,4℃溫育,低速離心,沉淀外泌體。目前已有成熟的PEG-base商業(yè)試劑盒,比如圖中的ExoQuick?(SystemBiosciences)。這類試劑盒使用容易和快速,不需要額外的設(shè)備,且隨著產(chǎn)品不斷更新?lián)Q代,提取效率和純化效果逐漸提高,因而逐漸取代超速離心法并推廣開來。沉淀法的主要缺點是分離物中會有少量的聚合物存在。不過大家不用擔(dān)心,一般來說這些物質(zhì)不會干擾下游分析。上海提取試劑盒外泌體報價尿液的外泌體怎么制備?
Microenvironment-inducedPTENlossbyexosomalmicroRNAprimesbrainmetastasisoutgrowth。思路:1.作者是怎么發(fā)現(xiàn)腦轉(zhuǎn)移的**細(xì)胞存在PTEN缺失的呢?又是怎么驗證是依賴于腦的環(huán)境?其實這點大家都能想到要怎么做(嘿嘿只是沒有去做做看,去發(fā)現(xiàn)些什么),作者正是把不同來源的**不同轉(zhuǎn)移部位(腦,肺,骨)的基因表達(dá)做個熱圖,發(fā)現(xiàn)腦轉(zhuǎn)移的**細(xì)胞的共同特點----PTEN丟失,并將原發(fā)灶與腦轉(zhuǎn)移灶**細(xì)胞進(jìn)行免疫組化染色,發(fā)現(xiàn)PTEN表達(dá)正常的原發(fā)灶**細(xì)胞,轉(zhuǎn)移到腦后PTEN丟失。更有趣的是作者發(fā)現(xiàn),把腦轉(zhuǎn)移的**細(xì)胞分離出來培養(yǎng),PTEN表達(dá)回復(fù)了;緊接著,作者把這種分離出來的**細(xì)胞培養(yǎng)一代后,重新種植到小鼠的腦內(nèi)和皮下成瘤,發(fā)現(xiàn)腦內(nèi)的PTEN表達(dá)又丟失了。得出了***個結(jié)論:腦轉(zhuǎn)移灶的可回復(fù)性PTEN丟失依賴于腦微環(huán)境。
**外泌體作用機(jī)制研究進(jìn)展- **免疫中外泌體的多重角色
- 外泌體MiRNA依賴的**轉(zhuǎn)移級聯(lián)
- *細(xì)胞外泌體PD-L1干擾免疫
- 外泌體改造**微環(huán)境
- 外泌體調(diào)節(jié)**免疫信號軸
- **耐藥性的外泌體傳達(dá)外泌體分離提純與檢測技術(shù)進(jìn)展- 高精度外泌體分離控制
- 通用的外泌體提取方法
- 外泌體多維標(biāo)記追蹤
- 外泌體新型成像與檢測
- 基于微流控技術(shù)的外泌體分離分析
- 臨床級外泌體生產(chǎn)關(guān)鍵要素外泌體生物學(xué)事件研究進(jìn)展- 外泌體內(nèi)容物多樣性與整體效應(yīng)
- 外泌體MiRNA, LncRNA, mRNA, CircRNA作用
- 外泌體成分與親本細(xì)胞關(guān)系
- 外泌體MiRNA介導(dǎo)細(xì)胞間應(yīng)答
- 外泌體馴化免疫細(xì)胞
- 外泌體遠(yuǎn)程信號遞送方式外泌體的臨床開發(fā)應(yīng)用- **細(xì)胞外泌體PD-L1開發(fā)策略
- **免疫***的外泌體途徑
- 外泌體MiRNA的臨床診斷價值
- 外泌體的靶向修飾
- RNA藥物的外泌體載體改裝
- 外泌體標(biāo)志物多中心臨床試驗 外泌體全轉(zhuǎn)錄組測序的周期需要多久?
我們云生物數(shù)據(jù)科學(xué)團(tuán)隊主要處理生物醫(yī)學(xué)科研領(lǐng)域的組學(xué)數(shù)據(jù)處理(包括基因組、蛋白組、代謝組各類)、數(shù)據(jù)庫建設(shè)、公共數(shù)據(jù)庫挖掘、診療軟件開發(fā)、算法還原與開發(fā)、臨床統(tǒng)計等數(shù)據(jù)科學(xué)工作,立足于上海,聯(lián)合長三角**學(xué)術(shù)、研發(fā)與企業(yè)資源,為有科研需求的醫(yī)院、學(xué)??蒲性核?、企業(yè)提供相關(guān)數(shù)據(jù)科研咨詢與服務(wù),并對接各類學(xué)術(shù)需求,包括各類組學(xué)(二代三代測序質(zhì)譜)實驗(在各大學(xué)、國家技術(shù)平臺和質(zhì)量第三方服務(wù)公司進(jìn)行)、生物/藥物信息學(xué)分析、文章成稿指導(dǎo)、成果發(fā)表指導(dǎo)及更深層次的**科研合作(對接前列大學(xué)科研實驗室,學(xué)術(shù)合作)等;目前,我們團(tuán)隊具備完整的數(shù)據(jù)分析、數(shù)據(jù)庫構(gòu)建、軟件開發(fā)團(tuán)隊,并自有服務(wù)器機(jī)房,可隨時調(diào)用各計算平臺算力,且團(tuán)隊成員有多年科研經(jīng)歷,承擔(dān)各類項目超過400余項;長期與交大、復(fù)旦、中科院、南大、藥科大等實驗室合作,目前能夠?qū)映^50家實驗室,且不斷拓展各類質(zhì)量大學(xué)、科研院所、醫(yī)院學(xué)術(shù)資源,互通有無,形成強大學(xué)術(shù)生態(tài)圈,解決各類科研難點與痛點;產(chǎn)品與技術(shù)服務(wù)供應(yīng)鏈方面,在分子生物、細(xì)胞生物、實驗動物、病理、臨床樣本方面已與長三角100余家企業(yè)形成良好合作關(guān)系。 一個好的外泌體需要具備哪些特點您知道嗎?江蘇測序外泌體售后分析
外泌體的優(yōu)缺點您知道嗎?上海提取試劑盒外泌體報價
外泌體的角色:⊙外泌體發(fā)揮功能并一定需要受體細(xì)胞攝入外泌體:外泌體的膜蛋白有可能與細(xì)胞膜蛋白作用,***細(xì)胞內(nèi)通路
⊙外泌體的角色之一:細(xì)胞-細(xì)胞通訊,比如抗原遞呈
⊙外泌體的角色之二:垃圾箱,外排多余或者無功能的細(xì)胞成分
為什么要研究外泌體?:
⊙揭示疾病發(fā)病機(jī)制:從微環(huán)境角度揭示細(xì)胞之間通訊促進(jìn)疾病發(fā)生的原因。
⊙尋找疾病診斷和預(yù)后的分子標(biāo)志物
⊙外泌體作為藥物載體,實現(xiàn)靶向給藥
外泌體的分離和鑒定方法:
⊙外泌體的分離:差速離心、密度梯度離心、體積排阻色譜法、過濾法、聚合物沉淀法、免疫分離、隔離篩選法
⊙外泌體分離后需要進(jìn)行粒徑分析:如NanoSight NS300
⊙外泌體檢測的marker:常用的有TSG101、CD9、CD63、CD81、ALIX、HSP70
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