江蘇PCR擴(kuò)增

來源: 發(fā)布時間:2024-11-09

樣本處理、核酸提取、PCR擴(kuò)增和數(shù)據(jù)處理是PCR的四個步驟。其中核酸提取可以幫助研究人員準(zhǔn)確地快速地分離細(xì)胞或分子材料中的有效核酸,并獲得足夠的樣本為后續(xù)實驗提供依據(jù)。無論是病毒、細(xì)菌還是體細(xì)胞,遺傳物質(zhì)都不是裸露在細(xì)胞外,都是在細(xì)胞內(nèi)。需要有一個核酸提取試劑將遺傳物質(zhì)釋放到外界,保證PCR反應(yīng)效率。將核酸釋放出來后,提取與純化過程中同樣需要將樣本中的一些PCR抑制物去除掉,獲得純度比較高的核酸,比較大限度的保證PCR反應(yīng)中抑制物的濃度降低,提高核酸檢測的準(zhǔn)確性。因此核酸提取與純化這一步,也是保證PCR反應(yīng)結(jié)果的關(guān)鍵一步。巧亦捷核酸檢測一體機(jī)采用磁珠法提取,效率高且可確保結(jié)果更準(zhǔn)確。PCR技術(shù)又可以分為定量PCR和常規(guī)PCR,定量PCR分為實時熒光定量PCR(RT-PCR)和數(shù)字PCR。江蘇PCR擴(kuò)增

江蘇PCR擴(kuò)增,PCR

PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)的作用下,由一對特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應(yīng),三個不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴(kuò)增到多量的一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù)。在反應(yīng)體系內(nèi),以一對人工合成的寡核苷酸作為擴(kuò)增引物,第一步,模板DNA變性,以構(gòu)成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,目的基因作為模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過80-90℃高溫變性,使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步,模板DNA與引物退火(復(fù)性),模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,引物與模板DNA單鏈互補配對。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP為反應(yīng)原料半保留復(fù)制合成一條新的模板DNA鏈。這三個步驟為一個循環(huán),2-4分鐘即可完成一個循環(huán),2-3小時就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復(fù)制到幾百萬倍,從而實現(xiàn)對靶DNA的放大。由于擴(kuò)增堿基序列按照靶DNA復(fù)制,因此PCR反應(yīng)具有高度特異性。江蘇寵物用PCR儀器生產(chǎn)企業(yè)常用的qPCR方法有熒光染料法(SYBR Green I)和探針法(TaqMan)。

江蘇PCR擴(kuò)增,PCR

巧亦捷在今年上半年推出的全自動薄膜微流控快速核酸檢測一體機(jī)是收益診斷領(lǐng)域市面上為數(shù)不多的全自動核酸檢測儀器,它可以自動完成繁瑣的核酸提取和PCR擴(kuò)增部分。且檢測全程為全封閉,避免人為干擾,消除人和實驗室的污染,降低對實驗室環(huán)境的高要求。真正做到了“樣本經(jīng),結(jié)果出”,巧亦捷希望憑借薄膜微流控平臺,進(jìn)一步促進(jìn)動物檢測和診斷的水平,提升系統(tǒng)完善的寵物疾病檢測綜合解決方案,在推動全自動分子診斷平臺在寵物醫(yī)院應(yīng)用的同時,不斷研發(fā)更多更好的動物創(chuàng)新診斷技術(shù)和產(chǎn)品,為動物健康提供堅實保障。

在現(xiàn)代畜牧業(yè)和寵物醫(yī)療中,確保動物的健康已成為一項至關(guān)重要的任務(wù)。隨著動物養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大和寵物數(shù)量的增加,疾病預(yù)防和早期診斷顯得尤為重要。巧亦捷全自動核酸檢測系統(tǒng)的問世,為動物健康管理樹立了新的標(biāo)準(zhǔn),為獸醫(yī)和養(yǎng)殖戶提供了強有力的技術(shù)支持。巧亦捷全自動核酸檢測系統(tǒng)采用先進(jìn)的薄膜微流控技術(shù),通過集成化的微流控芯片,實現(xiàn)了樣本處理、核酸提取、PCR擴(kuò)增和檢測分析的全自動化。這一突破性的技術(shù)革新,不僅提高了檢測的精確性和靈敏度,還明顯縮短了檢測時間,使得快速診斷成為可能。在寵物醫(yī)療方面,巧亦捷核酸檢測系統(tǒng)可以快速、準(zhǔn)確地檢測寵物體內(nèi)的病原體核酸,幫助獸醫(yī)在早期階段識別疾病。這對于一些傳染性強、危害大的疾病尤為重要,如犬瘟熱病毒、貓免疫缺陷病毒等。早期發(fā)現(xiàn)意味著可以及時采取措施,防止疾病擴(kuò)散,減少寵物的痛苦和診療費用。對于畜牧養(yǎng)殖業(yè),巧亦捷系統(tǒng)同樣具有重大意義。畜禽養(yǎng)殖過程中,**的爆發(fā)往往會造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。巧亦捷核酸檢測系統(tǒng)能夠?qū)ΤR姷酿B(yǎng)殖動物病原體進(jìn)行高效篩查,如豬瘟、禽流感等。通過定期檢測,養(yǎng)殖戶可以及時發(fā)現(xiàn)潛在的健康威脅,采取相應(yīng)的防控措施,確保養(yǎng)殖場的健康和安全。PCR技術(shù)可以為動物健康和生命科學(xué)研究提供更加強大的工具和技術(shù)支持。

江蘇PCR擴(kuò)增,PCR

大多數(shù)寵物醫(yī)院運用的診斷方法為:PCR和試紙條。其區(qū)別是:試紙條原理是基于抗體抗原的免疫學(xué)方法,通過顏色或熒光標(biāo)記來判讀,和PCR檢測是基于不同方法學(xué)的檢測方式。PCR通過檢測樣本中有無病毒DNA(RNA)來確診,靈敏度高、特異性強、支持檢測項目多,是人醫(yī)醫(yī)學(xué)界公認(rèn)的診斷金標(biāo)準(zhǔn),兩者區(qū)別可以理解為滴血認(rèn)親(免疫學(xué)方法)與親子鑒定(分子診斷)的區(qū)別。目前專業(yè)的的寵物疾病機(jī)構(gòu)就是使用PCR檢測。巧亦捷核酸檢測一體機(jī)采用國際**的薄膜微流控技術(shù),實現(xiàn)了從核酸提取、PCR擴(kuò)增、熒光檢測全流程自動化芯片內(nèi)完成,可以實現(xiàn)專業(yè)實驗室級別的核酸檢測,且檢測時間短,全程無需專業(yè)技術(shù)人員參與,可實現(xiàn)基于病癥的多項目聯(lián)檢,更適合寵物醫(yī)院、獸醫(yī)站、養(yǎng)殖場等現(xiàn)場快檢應(yīng)用場景。國外已將PCR技術(shù)廣泛應(yīng)用于犬瘟、犬細(xì)小、弓形蟲等致病菌的檢測,從根本上突破了免疫學(xué)間接檢測的局限。江蘇薄膜微流控PCR動物檢疫

巧亦捷的品牌主張為:用心關(guān)愛每一個生命健康。江蘇PCR擴(kuò)增

巧亦捷核酸一體機(jī)采用的TaqMan探針法介紹:TaqMan探針法是具有高度特異性的定量PCR技術(shù)。它的工作原理是在PCR反應(yīng)體系中存在一對PCR引物和一條探針,探針的5′端標(biāo)記有報告基團(tuán),3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán),探針只與模板特異結(jié)合,其結(jié)合位點在兩條引物之間。當(dāng)探針完整的時候,報告基團(tuán)的熒光能量被淬滅基團(tuán)吸收,所以儀器搜集不到信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)展,Taq酶遇到探針,利用3′→5′外切核酸酶的活性把探針切斷,導(dǎo)致報告基團(tuán)的熒光能量不能被淬滅基團(tuán)吸收,產(chǎn)生了熒光信號,因此信號的強度就代、表了模板DNA的拷貝數(shù)。江蘇PCR擴(kuò)增