BstDNA聚合酶在等溫?cái)U(kuò)增中的優(yōu)勢主要包括以下幾點(diǎn):1.**高靈敏度和擴(kuò)增效率**:BstDNA聚合酶具有鏈置換能力,能夠在恒溫條件下快速、高效、特異性地?cái)U(kuò)增模板。翌圣生物的BstPlusDNAPolymerase靈敏度超高,低至5copies目的基因可測,且始終能比競品更快達(dá)到閾值,擴(kuò)增速率更快。2.**高dUTP耐受性**:BstPlusDNAPolymerase具有較高的dUTP耐受性,在反應(yīng)體系中添加dUTP對BstPlusDNAPolymerase的靈敏度及擴(kuò)增效率無影響,這使得它在防污染系統(tǒng)中表現(xiàn)出色。3.**快速擴(kuò)增**:使用BstDNA聚合酶的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),如LAMP,可以在15-60分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn)109-1010倍的擴(kuò)增,顯示出快速的擴(kuò)增能力。4.**熱穩(wěn)定性**:BstDNA聚合酶具有較強(qiáng)的熱穩(wěn)定性,能在60-65℃的恒溫條件下保持活性,這使得它非常適合于不需要溫度循環(huán)的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)。5.**簡化的反應(yīng)設(shè)置**:Bst3.0DNAPolymerase優(yōu)化了Loop-MediatedIsothermalDNAAmplification(LAMP)反應(yīng),簡化了反應(yīng)設(shè)置,可以實(shí)現(xiàn)單酶RT-LAMP反應(yīng)。6.**抗抑制劑能力強(qiáng)**:Bst3.0DNAPolymerase即使在高濃度的擴(kuò)增抑制劑中,包括dUTP,也能展現(xiàn)出強(qiáng)大的性能。
磁珠法病毒RNA/DNA抽提試劑盒是一種高效、便捷的工具,適用于從各種生物樣本中提取病毒核酸。以下是一些相關(guān)產(chǎn)品的信息和特點(diǎn):1.**德諾優(yōu)品病毒DNA/RNA提取試劑盒**:-采用自主磁珠純化技術(shù),適合從血漿、血清等樣本中分離純化病毒的DNA或RNA。-操作簡單,整個(gè)過程可在12-25分鐘內(nèi)完成,提取的核酸可直接用于下游應(yīng)用,如PCR和NGS等。-提取的核酸純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,適合低拷貝數(shù)的病毒檢測。2.**MolPure®磁珠法病毒DNA/RNA提取試劑盒**:-適用于從全血、血清、腦脊液等樣本中提取病毒核酸。-無需使用有毒的酚氯仿,安全快捷,提取過程可在40分鐘內(nèi)完成。-提取的產(chǎn)物可直接用于PCR、qPCR等實(shí)驗(yàn)。3.**FineMag快速磁珠法病毒DNA/RNA提取試劑盒**:-適合從全血、唾液、拭子等樣本中純化高質(zhì)量病毒核酸,提取過程只需13分鐘。-無需使用有毒的化學(xué)試劑,操作安全便捷。4.**MagMAX病毒RNA/DNA提取試劑盒**:-適用于從全血、血清、口腔液等樣本中提取病毒核酸。-該試劑盒支持高通量提取,適合自動(dòng)化操作,提取效率高,適合直接用于PCR和RT-PCR。
Cre重組酶在基因編輯中的操作主要涉及以下幾個(gè)步驟:1.**識(shí)別與結(jié)合**:-Cre重組酶首先識(shí)別并分別結(jié)合兩個(gè)LoxP序列的兩個(gè)反向重復(fù)序列,形成一個(gè)二聚體。2.**四聚體形成**:-兩個(gè)二聚體互相靠近,形成由四個(gè)Cre分子與兩個(gè)LoxP位點(diǎn)結(jié)合形成的四聚體復(fù)合物。3.**DNA切割與交換**:-Cre重組酶在每個(gè)LoxP位點(diǎn)的間隔序列中引導(dǎo)單鏈切割,產(chǎn)生帶有3’端羥基的斷裂。每個(gè)LoxP位點(diǎn)的兩個(gè)單鏈分別被切割。切割產(chǎn)生的自由3’端與對側(cè)的3’端進(jìn)行交換和重連,形成Holliday交叉結(jié)構(gòu)。4.**分子重組與解旋**:-Holliday交叉結(jié)構(gòu)通過Cre酶的作用被解旋并重組,形成新的重組產(chǎn)物。這個(gè)過程導(dǎo)致兩個(gè)LoxP位點(diǎn)之間的DNA序列被刪除、反轉(zhuǎn)或易位,具體效果取決于LoxP序列的排列方式(方向和位置)。5.**條件性基因編輯**:-通過建立特異性Cre小鼠,該小鼠中的Cre重組酶由特定啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng),可在特定細(xì)胞或組織或全身表達(dá)Cre重組酶。與帶有Lox位點(diǎn)的Flox小鼠雜交,子代中可以獲得既帶有Cre又帶有Flox基因的小鼠,實(shí)現(xiàn)條件性基因打靶(表達(dá)或敲除靶基因)。
確保Cre重組酶只作用于特定細(xì)胞,主要通過以下幾種方式實(shí)現(xiàn):1.**組織特異性啟動(dòng)子**:-利用組織特異性啟動(dòng)子控制Cre重組酶的表達(dá),可以確保Cre酶只在特定組織或細(xì)胞中表達(dá)。這種方法通過將Cre基因置于特定細(xì)胞類型特有的啟動(dòng)子控制之下,實(shí)現(xiàn)對Cre酶表達(dá)的精確控制。2.**誘導(dǎo)型Cre重組酶系統(tǒng)**:-通過使用Cre-ERT(雌素受體突變體與Cre重組酶的融合蛋白),可以實(shí)現(xiàn)對Cre活性的時(shí)間控制。在無他莫昔芬誘導(dǎo)時(shí),Cre-ERT與熱激蛋白Hsp90結(jié)合,定位于細(xì)胞質(zhì)中;當(dāng)他莫昔芬給藥誘導(dǎo)時(shí),Hsp90脫離Cre-ERT,使Cre-ERT進(jìn)入細(xì)胞核發(fā)揮基因重組的作用。這種系統(tǒng)相當(dāng)于為Cre-Lox系統(tǒng)加裝了一個(gè)由他莫昔芬控制的外源開關(guān),使得體內(nèi)基因編輯更具時(shí)空靈活性。3.**藥物誘導(dǎo)的Cre系統(tǒng)**:-例如Tet-on系統(tǒng),通過四環(huán)素或其衍生物多西環(huán)素的添加來激起基因表達(dá)。在三重轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中,rtTA在特定啟動(dòng)子的控制下表達(dá),多西環(huán)素與rtTA結(jié)合,Cre的表達(dá),導(dǎo)致固定的報(bào)告基因重組。4.**AAV遞送Cre**:-利用包含組織特異性啟動(dòng)子的腺相關(guān)病毒(AAV)載體可以選擇性地將Cre重組酶遞送至特定細(xì)胞。
Cas9 NLS可用于體外實(shí)驗(yàn)中篩選能夠高效引導(dǎo)Cas9蛋白進(jìn)行DNA剪切的gRNA序列 。
T5核酸外切酶在基因克隆中的優(yōu)勢主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:1.**高效性**:T5核酸外切酶依賴性組裝(TEDA)方法在常規(guī)克隆中的效率與使用專有DNA聚合酶的商業(yè)In-Fusion方法相似,但高于使用T5核酸外切酶、PhusionDNA聚合酶和DNA連接酶的Gibson方法。2.**低成本**:TEDA方法每個(gè)反應(yīng)使用0.04U的T5核酸外切酶,價(jià)格為0.25美分,具有很高的成本效益。3.**簡單性**:TEDA方法的反應(yīng)混合物非常簡單,易于操作,這使得它在預(yù)算有限的實(shí)驗(yàn)室中尤其有用。4.**靈活性**:TEDA方法能夠組裝多個(gè)DNA片段,并在多個(gè)位點(diǎn)同時(shí)進(jìn)行定點(diǎn)誘變,提供了一種靈活的克隆和突變方法。5.**陽性克隆率**:使用T5核酸外切酶的無縫克隆技術(shù)可以確保100%的陽性克隆率,這提高了實(shí)驗(yàn)的成功率。6.**協(xié)同作用**:在無縫克隆中,T5核酸外切酶與Phusion高保真DNA聚合酶和TaqDNA連接酶協(xié)同作用,通過切割、填補(bǔ)和連接三個(gè)步驟,高效地完成DNA片段的連接。7.**減少污染**:T5核酸外切酶可以降解堿裂解提取質(zhì)粒中的變性DNA,減少超螺旋DNA的污染,提高DNA克隆和轉(zhuǎn)染效率。這些優(yōu)勢使得T5核酸外切酶成為基因克隆中一個(gè)非常有價(jià)值的工具,尤其是在需要高效、低成本和操作簡便的實(shí)驗(yàn)環(huán)境中。FnCas12a不僅可用于體外dsDNA的特異剪切,也可用于靶標(biāo)核酸的快速檢測,如HOLMES核酸快檢技術(shù)。Recombinant Human ANGPTL4/Angiopoietin-like 4 (His Tag)
E1通常被認(rèn)為是泛素化過程中的限速步驟,因?yàn)樗婕暗椒核氐募て鸷虯TP的水解。Recombinant Mouse FSHB Protein,hFc Tag
蛋白A-微球菌核酸酶(pA-MNase)是一種特殊的融合蛋白,它結(jié)合了蛋白A和微球菌核酸酶(MNase,MicrococcalNuclease)的特性。以下是pA-MNase的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和應(yīng)用:1.**融合表達(dá)產(chǎn)物**:pA-MNase是蛋白A與微球菌核酸酶MNase的融合表達(dá)產(chǎn)物,因此它同時(shí)具有ProteinA的抗體結(jié)合活性和MNase的核酸內(nèi)切酶活性。2.**雙重功能**:由于其雙重功能,pA-MNase常用于蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究,特別是在ChIC(ChromatinImmunocleavage)和CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)技術(shù)中。3.**ProteinA的特性**:ProteinA是一種發(fā)現(xiàn)于金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)的細(xì)胞壁表面蛋白,分子量為42kDa,能特異性地與哺乳動(dòng)物免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)結(jié)合,通常結(jié)合部位為免疫球蛋白的Fc區(qū)。4.**微球菌核酸酶(MNase)的特性**:MNase是一種核酸內(nèi)切酶,能夠降解核酸,常用于降解蛋白質(zhì)制備中存在的核酸,減少細(xì)胞裂解液的粘度,以及用于染色質(zhì)結(jié)構(gòu)分析和快速RNA測序。5.**反應(yīng)條件**:MNase的反應(yīng)條件包括1XMicrococcalNucleaseReactionBuffer,需要補(bǔ)充100μg/ml重組白蛋白,分子生物學(xué)級(jí),并在37°C下孵化。Recombinant Mouse FSHB Protein,hFc Tag