湖北超微量超微量分光光度計(jì)核酸檢測

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-06-10

分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時(shí),被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關(guān)系如下式:
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度;
I0為入射的單色光強(qiáng)度;
I 為透射的單色光強(qiáng)度;
T 為物質(zhì)的透射率;
k 為摩爾吸收系數(shù);
L 為被分析物質(zhì)的光程,即比色皿的邊長;
c 為物質(zhì)的濃度;
物質(zhì)對光的選擇性吸收波長,以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū),除某些物質(zhì)對光有吸收外,很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時(shí)影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時(shí)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r(shí)操作。
熒光分光光度計(jì)有兩個(gè)單色器,而一般紫外可見分光光度計(jì)只有一個(gè)單色器。湖北超微量超微量分光光度計(jì)核酸檢測

超微量分光光度計(jì)在核酸定量和分析中的應(yīng)用:
分光光度測定法是一項(xiàng)定量和分析生物成分的成熟技術(shù)。其中,核酸是生物實(shí)驗(yàn)室**常檢測的生物成分之一。確定這些樣品的濃度和純度對許多下游實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要。
核酸主要吸收260nm下的紫外光,其濃度可以應(yīng)用朗伯比爾定律通過它們的相關(guān)消光系數(shù)和樣品光程計(jì)算出來。
首先,260nm的紫外光直接照射樣品,并且穿過樣品,而另一邊的光電檢測器則測定有多少光被吸收。通過對照參比(一般是樣品稀釋液),可以定量樣品中的核酸濃度。
海南超微量超微量分光光度計(jì)菌液檢測Micro Drop可以檢測45-48mm的10mm光程的比色皿。

A260:是核酸比較高吸收峰的吸收波長,比較好測量值的范圍為0.1至1.0。如果不在此范圍,稀釋或濃縮樣品,使之在此范圍內(nèi);如果吸光度小于0.05,檢查是否存 在操作因素(如移液不準(zhǔn)確,樣品內(nèi)有懸浮物等)影響。DNA樣品的A260 吸光度值是否>0.1。(請注意,這個(gè)值跟儀器無關(guān),核酸的吸光度必需大于0.1,其值才有效和可靠,因?yàn)闃悠分械碾s質(zhì)和顆粒這些不純物的干擾通常 會(huì)對光有一定吸收,其值<0.1);
A280:是蛋白比較高吸收峰的吸收波長.
A230:是碳水化合物比較高吸收峰的吸收波長:
A260/A280:是核酸純度的指示值。純度好的DNA或RNA,在pH7-8.5 下A260 / A280的比值應(yīng)該在2.0 或2.5。 純凈的樣品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。
A260/A230:純DNA和 RNA的A260/A230比值為2.5。若比值小于2.0標(biāo)明樣品被碳水化合物(糖類)、鹽類或有機(jī)溶劑污染,需要純化樣品。

Micro Drop超微量分光光度計(jì)產(chǎn)品應(yīng)用:
1.紫外檢測:常規(guī)紫外光波長下檢測樣品吸光值;
2.核酸檢測:可檢測dsDNA、ssDNA、RNA等不同類型核酸的濃度及其在260nm、280nm處的吸光值;
3.探針檢測:檢測熒光標(biāo)記探針的吸光值,可用于去除未能標(biāo)記探針的樣品;
4.蛋白檢測:檢測普通純化后蛋白的濃度和280nm處的吸光值,BCA、 Bradford、Lowry、Pierce 660nm 蛋白定量分析;
5.菌液/懸浮細(xì)胞濃度檢測:可檢測菌液OD600值及監(jiān)測懸浮細(xì)胞生長情況;
6.動(dòng)力學(xué)檢測:用于酶活力和生長曲線等動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)的測定;
7.全波長掃描:185-910nm全波長掃描,顯示吸收曲線。
使用光譜進(jìn)行定性分析的儀器叫做光譜儀。

超微量分光光度計(jì)新晉小生——寶予德MicroDrop簡介:
一機(jī)多用:既可使用超微量基座,也可使用常規(guī)比色皿,想怎么測就怎么測!
開機(jī)即用:交貨后即可使用 – 安裝時(shí)不需要進(jìn)行任何調(diào)節(jié)。
上樣量少:上樣范圍0.5μl-2μl,節(jié)約珍貴的樣本。
無線連接:無需數(shù)據(jù)線連接電腦,從此告別雜亂的數(shù)據(jù)連接線,儀器可自發(fā)WiFi信號。
全光譜范圍:可檢測185-910nm波長下樣本的吸光值,檢測范圍廣,基座模式下因?yàn)榭s短了光程,檢測濃度范圍非常廣闊,dsDNA:2-15000ng/ul,無需稀釋樣品,簡化實(shí)驗(yàn)流程,減少實(shí)驗(yàn)誤差,能夠滿足極大部分用戶的需求。
檢測快速:全波長掃描時(shí)間只需5s,每個(gè)樣品所需要的時(shí)間不到5秒鐘,快速的檢測速度為大量的樣品檢測節(jié)省了寶貴時(shí)間。
美觀簡約:自重2.1kg,便于移動(dòng),占地面積小,節(jié)省實(shí)驗(yàn)臺面空間。
數(shù)據(jù)存儲:可自定義選擇數(shù)據(jù)存儲,不僅能夠自動(dòng)保存檢測原始數(shù)據(jù),也可導(dǎo)出Excel數(shù)據(jù)表,方便計(jì)算后續(xù)實(shí)驗(yàn)的加樣量。
Micro Drop在基座模式下可以較高檢測400mg/ml的BSA而不用稀釋。貴州高重復(fù)性超微量分光光度計(jì)菌液檢測

熒光分光光度計(jì)是以氙燈做為光源,而紫外可見分光光度計(jì)是以氘燈作為紫外區(qū)光源。湖北超微量超微量分光光度計(jì)核酸檢測

超微量分光光度計(jì)的應(yīng)用:
(一)核酸的定量:
核酸的定量是超微量分光光度計(jì)使用頻率比較高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈DNA、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的比較高吸收峰的吸收波長260nm。每種核酸的分子構(gòu)成不一,因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應(yīng)消光因子。如:1OD的吸光值分別相當(dāng)于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。測試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算,從而得出相應(yīng)的樣品濃度。除了核酸濃度,分光光度計(jì)顯示幾個(gè)非常重要的比值表示樣品的純度,如A260/A280的比值,用于評估樣品的純度,因?yàn)榈鞍椎奈辗迨?80nm。純凈的樣品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8或者2.0,表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。A230表示樣品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。
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