內(nèi)蒙古F12培養(yǎng)基包括

    本氏***葉片及根愈傷**誘導(dǎo)的對(duì)比效果圖，a：葉片愈傷**；b：葉片愈傷**誘導(dǎo)率；c：根愈傷**；d：根愈傷**誘導(dǎo)率；a和c中bar＝；圖7是cs和ms兩種培養(yǎng)基上，水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)的對(duì)比效果圖，a：水稻成熟胚愈傷**；b：水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)率；a中bar＝；圖8是用不同ph的超純水(ph為)配制的cs、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基ph值穩(wěn)定性比較效果圖；圖9是在未調(diào)ph和將ph調(diào)至、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的生長(zhǎng)狀況的比較效果圖，a：不同液體培養(yǎng)基培養(yǎng)前的無菌苗生長(zhǎng)情況；b1、c1和d1：1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b2、c2和d2：1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b3、c3和d3：ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b4、c4和d4：cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b5、c5和d5：1/；b6、c6和d6：1/；b7、c7和d7：；b8、c8和d8：；a、b、c和d中bar＝；圖10是對(duì)在未調(diào)ph和將ph調(diào)至、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的莖高(a)、莖中粗(b)、根長(zhǎng)(c)、鮮重(d)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)的比較效果圖。具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。實(shí)施例一，本實(shí)施例廣適性植物**培養(yǎng)基，其每1000ml培養(yǎng)基中含有：kno32662mg、。DMEM培養(yǎng)基適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)研究。內(nèi)蒙古F12培養(yǎng)基包括

    因?yàn)榻鈨鰰r(shí)可能會(huì)有營(yíng)養(yǎng)成份析出，影響培養(yǎng)效果。正常情況下于2~8℃避光保存，使用前從冰箱取出，放入室溫進(jìn)行平衡。通常的液體培養(yǎng)基有效期是6個(gè)月到12個(gè)月。液體細(xì)胞培養(yǎng)基盡量避免長(zhǎng)期貯存，其中的谷氨酰胺會(huì)隨著儲(chǔ)存時(shí)間的延長(zhǎng)而慢慢分解，如果細(xì)胞生長(zhǎng)不良，可考慮檢測(cè)培養(yǎng)基中的谷氨酰胺含量確定是否再補(bǔ)加谷氨酰胺。市售商業(yè)化液體細(xì)胞培養(yǎng)基有具體的有效期，對(duì)于使用干粉細(xì)胞培養(yǎng)基自行配制成液體以后，也應(yīng)低溫（2~8℃）貯存。除培養(yǎng)基中如谷氨酰胺易降解之外，培養(yǎng)基中的其他成份隨著溫度的升高也可能會(huì)發(fā)生降解或是析出。5.細(xì)胞培養(yǎng)基使用過程中常見問題分析由于大多數(shù)細(xì)胞適宜的pH為，偏離此范圍可能對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生有害的影響。但各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不完全相同，原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受力差，無限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。因此，原代培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中的緩沖系統(tǒng)就顯得較為重要。一般的細(xì)胞培養(yǎng)基采用的都是平衡鹽系統(tǒng)，但不同的培養(yǎng)基或是同一系列的培養(yǎng)基所用平衡鹽系統(tǒng)不同，如199系列、MEM系列均有Hanks’系統(tǒng)的培養(yǎng)基及Earle’s系統(tǒng)的培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基不是上述常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng)，例如RPMI1640培養(yǎng)基、F12培養(yǎng)基。江蘇培養(yǎng)基價(jià)目表無血清培養(yǎng)基確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的純凈性。

    發(fā)酵培養(yǎng)基為：葡萄糖80g/l，酵母浸膏20g/l，k2hpo42g/l，mgso4·7h2o50mg/l，cecl30-40mg/l，mnso4·h2o3mg/l，feso4·7h2o3mg/l，vb110mg/l，生物素7μg/l；發(fā)酵工藝同實(shí)施例1，100l發(fā)酵罐中含有70l發(fā)酵培養(yǎng)基。設(shè)置cecl3的添加濃度為0，，如圖1-2所示，隨著cecl3添加量的增加，菌體濃度和谷氨酸含量均有所提升，當(dāng)添加量為10mg/l時(shí)，菌體濃度和谷氨酸含量達(dá)到峰值，然后出現(xiàn)下降趨勢(shì)，但是整個(gè)過程中，糖酸轉(zhuǎn)化率沒有明顯改變（附圖未顯示）；說明cecl3稀土鹽能夠促進(jìn)菌株增殖，提高谷氨酸相關(guān)合成酶的活力，提高谷氨酸的產(chǎn)量，但是過高的濃度會(huì)造成菌株增殖放緩和死亡，谷氨酸產(chǎn)量相應(yīng)下降。二、通過上述實(shí)驗(yàn)確定cecl3添加量為10mg/l，在此基礎(chǔ)上，研究2-羥基乙胺對(duì)菌體濃度、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響。設(shè)置2-羥基乙胺的濃度為，5,10,20,40,80,160mg/l，如圖3-4所示，隨著2-羥基乙胺添加量的增加，菌體濃度隨之增加，相應(yīng)地，谷氨酸含量和糖酸轉(zhuǎn)化率也有所提升，當(dāng)添加量為40mg/l時(shí)，菌體濃度和谷氨酸含量達(dá)到峰值，繼續(xù)增加2-羥基乙胺的濃度，產(chǎn)生明顯的抑菌效果，菌株密度下降明顯；原因是，低濃度的2-羥基乙胺可能促進(jìn)磷脂酰乙醇胺細(xì)胞壁組分的合成。

    平衡鹽溶液（balancedsaltsolution，BSS）簡(jiǎn)稱鹽溶液，集緩沖液的緩沖能力、生理鹽水的等滲性以及培養(yǎng)液的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)特點(diǎn)于一體，兼具維持滲透壓、緩沖和調(diào)節(jié)溶液的酸堿度、同時(shí)供給細(xì)胞生存所必需的能量和無機(jī)離子成分的作用。各種BSS的緩沖系統(tǒng)有所不同，其中以Hank’s液和Earle’s液為例，它們主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Earle’s(g/L)中比在Hank’s(g/L)中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡，以維持溶液的pH值。Eagles液在空氣水平的CO2中，溶液會(huì)變堿，Hank’s液在CO2培養(yǎng)箱中會(huì)變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存**，需要用Earle’s液，。如果**是清洗將要在細(xì)胞培養(yǎng)基中儲(chǔ)存的**，用Hank’s液就可以了。表3-1幾種常用的平衡鹽溶液配方（g/L）一些BSS含有的Ca2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成分，同時(shí)參與許多重要的細(xì)胞功能活動(dòng)。但它們有使細(xì)胞凝集的作用，在配制分散細(xì)胞的消化液和特殊用途的細(xì)胞洗滌時(shí)，宜采用Ca2+、Mg2+含量較低的Dulbecco液或無Ca2+、Mg2+的D-Hanks液，或者PBS液。概述基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機(jī)鹽和其它一些輔助物質(zhì)。MEM培養(yǎng)基含有多種必需的營(yíng)養(yǎng)成分和礦物質(zhì)。

    從而提高菌株增殖速率，但是濃度過大會(huì)導(dǎo)致抑菌現(xiàn)象，后期菌株增殖放緩，以產(chǎn)酸為主，2-羥基乙胺還能夠作為陽離子表面活性劑，使得細(xì)胞壁疏松，提高細(xì)胞通透性，促進(jìn)谷氨酸釋放到發(fā)酵液，從而提高了谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率。三、通過上述實(shí)驗(yàn)確定cecl3添加量為10mg/l、2-羥基乙胺的添加量40mg/l，在此基礎(chǔ)上，研究發(fā)酵培養(yǎng)基b對(duì)菌體濃度、谷氨酸含量以及糖酸轉(zhuǎn)化率的影響。對(duì)照組1采用發(fā)酵培養(yǎng)基a進(jìn)行發(fā)酵，不采用發(fā)酵培養(yǎng)基b，100l發(fā)酵罐中含有70l發(fā)酵培養(yǎng)基a；發(fā)酵工藝參照實(shí)施例1。對(duì)照組2：發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加琥珀酸，其余同實(shí)施例1。對(duì)照組3：發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加殼聚糖，其余同實(shí)施例1。對(duì)照組4：發(fā)酵培養(yǎng)基a中添加5g/l的琥珀酸，其余同對(duì)照組1。實(shí)驗(yàn)組為實(shí)施例1。具體結(jié)果見表1。表1組別菌濃度od600nm谷氨酸產(chǎn)量g/l糖酸轉(zhuǎn)化率％對(duì)照組：對(duì)照組1采用單一發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵，谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率明顯低于實(shí)驗(yàn)組，各組別菌體濃度差異并不大；對(duì)照組4在對(duì)照組1的基礎(chǔ)上添加了琥珀酸，對(duì)菌體濃度并沒有影響，谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉(zhuǎn)化率也沒有明顯差異，可能原因是，發(fā)酵前期以菌體增殖為主，產(chǎn)酸較少，琥珀酸對(duì)菌體增殖并沒有明顯的刺激作用。MEM培養(yǎng)基是細(xì)胞生物學(xué)研究中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基之一。江西MEM a培養(yǎng)基包括什么

減血清培養(yǎng)基提高了實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性。內(nèi)蒙古F12培養(yǎng)基包括

    培養(yǎng)實(shí)例2：蘭茲貝格型擬南芥無菌植株培養(yǎng)培養(yǎng)實(shí)例2與培養(yǎng)實(shí)例1不同的地方在于：步驟(1)所用種子為蘭茲貝格(ler,landsbergerecta)型擬南芥種子，蘭茲貝格擬南芥較哥倫比亞擬南芥具有更早的花期，在適宜條件下培養(yǎng)，可以獲得處于各發(fā)育時(shí)期的擬南芥無菌***，包括根、胚軸、葉柄、子葉、蓮座葉、莖、花、角果等，其余完全同培養(yǎng)實(shí)例1。1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2cs生長(zhǎng)培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％，培養(yǎng)28d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯、平均株高為，蓮座葉發(fā)達(dá)、平均**大蓮座葉長(zhǎng)為，葉色濃綠，根系粗壯、平均主根長(zhǎng)為，花序含有較多花朵，花粉形態(tài)和活力均正常、平均有活力的花粉為％。如圖2所示。對(duì)比培養(yǎng)例2：將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基，其余完全同培養(yǎng)實(shí)例2，1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：蘭茲貝格型擬南芥種子在1/2ms生長(zhǎng)培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％，培養(yǎng)28d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯、平均株高為，蓮座葉發(fā)達(dá)、平均**大蓮座葉長(zhǎng)為，葉色濃綠，根系粗壯、平均主根長(zhǎng)為，花序發(fā)育良好，花粉形態(tài)和活力均正常、平均有活力的花粉為％。如圖2所示。內(nèi)蒙古F12培養(yǎng)基包括