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因?yàn)榻鈨鰰r(shí)可能會(huì)有營(yíng)養(yǎng)成份析出,影響培養(yǎng)效果。正常情況下于2~8℃避光保存,使用前從冰箱取出,放入室溫進(jìn)行平衡。通常的液體培養(yǎng)基有效期是6個(gè)月到12個(gè)月。液體細(xì)胞培養(yǎng)基盡量避免長(zhǎng)期貯存,其中的谷氨酰胺會(huì)隨著儲(chǔ)存時(shí)間的延長(zhǎng)而慢慢分解,如果細(xì)胞生長(zhǎng)不良,可考慮檢測(cè)培養(yǎng)基中的谷氨酰胺含量確定是否再補(bǔ)加谷氨酰胺。市售商業(yè)化液體細(xì)胞培養(yǎng)基有具體的有效期,對(duì)于使用干粉細(xì)胞培養(yǎng)基自行配制成液體以后,也應(yīng)低溫(2~8℃)貯存。除培養(yǎng)基中如谷氨酰胺易降解之外,培養(yǎng)基中的其他成份隨著溫度的升高也可能會(huì)發(fā)生降解或是析出。5.細(xì)胞培養(yǎng)基使用過程中常見問題分析由于大多數(shù)細(xì)胞適宜的pH為,偏離此范圍可能對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)產(chǎn)生有害的影響。但各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不完全相同,原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受力差,無(wú)限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。因此,原代培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)液中的緩沖系統(tǒng)就顯得較為重要。一般的細(xì)胞培養(yǎng)基采用的都是平衡鹽系統(tǒng),但不同的培養(yǎng)基或是同一系列的培養(yǎng)基所用平衡鹽系統(tǒng)不同,如199系列、MEM系列均有Hanks’系統(tǒng)的培養(yǎng)基及Earle’s系統(tǒng)的培養(yǎng)基。有些培養(yǎng)基不是上述常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng),例如RPMI1640培養(yǎng)基、F12培養(yǎng)基。F12培養(yǎng)基在細(xì)胞生物學(xué)研究中廣泛應(yīng)用,適用于多種細(xì)胞系。河南無(wú)血清培養(yǎng)基產(chǎn)品介紹
培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基使用說明中有加熱溶解后高壓**,有的加熱沸騰后高壓**,見過一些實(shí)驗(yàn)室,不經(jīng)加熱直接高壓**,也有的實(shí)驗(yàn)室一律加熱沸騰后高壓**。大家是怎們制備的,不加熱或全部沸騰對(duì)檢測(cè)結(jié)果有沒有影響?品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬(wàn)-50萬(wàn)培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基制備后應(yīng)保持一定的透明度,下面制備操作影響比較大的是(??)。A、原料稱量混合溶解B、加熱煮沸,調(diào)PH值C、過濾、分裝容器D、消毒或**品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬(wàn)-50萬(wàn)【求助】培養(yǎng)基制備請(qǐng)問牛肉膏與牛肉膏粉的使用有何區(qū)別?可互相替代嗎?使用比例相同嗎?品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬(wàn)-50萬(wàn)培養(yǎng)基的制備方法培養(yǎng)基的制備方法以下為常規(guī)方法,如配方中有特殊規(guī)定或要求,以配方為***依據(jù)。1.根據(jù)配方,計(jì)算各種營(yíng)養(yǎng)成分用量。一般*品可用普通*物天平稱量,用量少的*品,可按比例配成高濃度溶液,再按所需量用移液管吸取。稱好的*品放入品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬(wàn)-50萬(wàn)【求助】培養(yǎng)基制備系統(tǒng)哪位大蝦有關(guān)于培養(yǎng)基制備系統(tǒng)相關(guān)的資料,原理、應(yīng)用、品牌、技術(shù)對(duì)比等越詳細(xì)越好。河南無(wú)血清培養(yǎng)基產(chǎn)品介紹無(wú)酚紅培養(yǎng)基減少了酚紅對(duì)細(xì)胞的影響。
無(wú)芽孢:E=209—250*103J/mol。顯然,(5)式的比值〉1,說明提高溫度對(duì)于第二個(gè)平行反應(yīng),即菌體死亡的反應(yīng)是有利的。提高溫度,雖然兩個(gè)平行性反應(yīng)的反應(yīng)速度常數(shù)都提高了,但是,達(dá)到同樣的**效果,所需要的時(shí)間卻縮短了,由于***個(gè)反應(yīng)也就是營(yíng)養(yǎng)成分破壞的反應(yīng)速度常速增加的少,因此,有利于減少培養(yǎng)基在**過程中營(yíng)養(yǎng)成分的破壞。換言之,高溫短時(shí)**對(duì)于培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分是有利的。通常所說的高溫短時(shí)**可以提高生產(chǎn)效益,其理論根據(jù)就在于此。結(jié)論1:當(dāng)**溫度上升時(shí),微生物殺死速率的提高要超過培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加。要減少營(yíng)養(yǎng)成分的破壞,可升高溫度**。結(jié)論2:在**時(shí)選擇較高的溫度、較短的時(shí)間,這樣便既可達(dá)到需要的**程度,同時(shí)又可減少營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失。(二)、影響**效果的因素(1)微生物種類:不同的微生物k值不同。(2)初始菌量:在保持N值不變的前提下,t與初始菌量N0的對(duì)數(shù)成正比。(3)培養(yǎng)基成份:油脂、蛋白質(zhì)增加微生物的耐熱性。(4)傳熱與混合狀況:影響受熱均勻度。(5)培養(yǎng)基中固體顆粒的存在影響熱穿透。(6)蒸汽中空氣的存在降低蒸汽分壓和**溫度。(7)pH:酸性pH下可加快微生物熱死速率三、培養(yǎng)基的工業(yè)**。
維持15-20分鐘,可殺滅所有的繁殖體和芽胞。本法適用于耐高溫、耐濕物品的**,如普通培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等。(二)下向主要介紹高壓蒸氣**器**效果的驗(yàn)證方法高壓蒸氣**器使物品**后達(dá)到無(wú)菌要求,這是**實(shí)驗(yàn)中的基本保證。高壓**器**效果是否合格足實(shí)驗(yàn)成敗的**基礎(chǔ)**關(guān)鍵的首要步驟。除少數(shù)培養(yǎng)基只需加熱溶解,不需高壓**外,大部分培養(yǎng)基均需121℃高壓**15-30分鐘。尤其是對(duì)無(wú)菌試驗(yàn)培養(yǎng)基**不徹底,直接關(guān)系到對(duì)**的無(wú)菌試驗(yàn)結(jié)果。因此必須認(rèn)真對(duì)高壓**器進(jìn)行**效果的驗(yàn)證。為此我們提供了進(jìn)行**效果驗(yàn)證的一個(gè)簡(jiǎn)易可行的方法。1.試驗(yàn)材料(1)嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片。嗜熱脂肪芽胞桿菌(Bacillusstearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌,含芽胞量5-lO5CFU/片。(2)121℃壓力蒸氣**化學(xué)指示卡。(3)溴甲酚紫胨水培養(yǎng)基116℃高壓**20分鐘后備用。(4)O—150℃留點(diǎn)溫度計(jì)。2.方法與結(jié)果將嗜熱脂肪芽胞桿菌紙片(以下簡(jiǎn)稱菌片)用無(wú)菌鑷子放人密封試管中?;瘜W(xué)指示卡和留點(diǎn)溫度計(jì)放入敞口試管中。以上兩種試管各準(zhǔn)備5-10份。分別放置在高壓**器蒸氣口處、底部排氣口處及底部出水口處或上下左右中間5處。如**器為二層,則需放10處。無(wú)血清培養(yǎng)基適用于需要無(wú)血清環(huán)境的細(xì)胞。
這些重組蛋白和動(dòng)物來源成分對(duì)生物制品的安全性有很大影響。成本低。主要用途應(yīng)用案例采用199(SLM)、MEM(SLM)和DMEM(SLM)低血清培養(yǎng)基分別培養(yǎng)Vero細(xì)胞、BHK21細(xì)胞和CHO細(xì)胞,新生牛血清用量可以從10%降至3%,減少新生牛血清使用批次和批間差的影響,減少生物制品純化損失,減少由于不確定蛋白或者其它血清組分帶來干擾和差異的風(fēng)險(xiǎn),提高制品安全性。低血清培養(yǎng)基可以在方瓶、3L轉(zhuǎn)瓶、15L轉(zhuǎn)瓶及生物反應(yīng)器中培養(yǎng)細(xì)胞,在*苗生產(chǎn)中可以達(dá)到低血清高密度的培養(yǎng)效果。低血清培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)于基礎(chǔ)培養(yǎng)基,易使細(xì)胞增殖迅速,代謝旺盛,代謝產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞有不良影響,易產(chǎn)生細(xì)胞老化脫落現(xiàn)象。因此需要適當(dāng)增加換液次數(shù),增加傳代頻率。獲取同樣的細(xì)胞量,用低血清培養(yǎng)基將比用傳統(tǒng)培養(yǎng)基縮短近1/3的時(shí)間,可提高生產(chǎn)效率。采用199(SLM)低血清培養(yǎng)基培養(yǎng)Vero細(xì)胞分泌狂犬*苗病毒,滴度明顯高于采用199培養(yǎng)基傳統(tǒng)培養(yǎng)獲得的滴度。采MEM(SLM)低血清培養(yǎng)基BHK21細(xì)胞,在本實(shí)驗(yàn)情況下12代內(nèi)細(xì)胞形態(tài)和致密度均優(yōu)于MEM培養(yǎng)基傳統(tǒng)培養(yǎng)情況,因而可以預(yù)期其產(chǎn)生的口蹄*、甲肝等*苗生產(chǎn)的病毒產(chǎn)量將提高。低血清培養(yǎng)基用于反應(yīng)器Vero細(xì)胞狂犬*苗的生產(chǎn),實(shí)踐證明效果良好。采DMEM。MEM培養(yǎng)基在藥物篩選中有重要作用。云南F12培養(yǎng)基哪家好
無(wú)血清培養(yǎng)基適用于敏感細(xì)胞系的培養(yǎng)和研究。河南無(wú)血清培養(yǎng)基產(chǎn)品介紹
體外培養(yǎng)時(shí),一定的濃度范圍條件下,葡萄糖主要經(jīng)糖酵解循環(huán)轉(zhuǎn)化成乳酸來為細(xì)胞提供能量。(氨基酸)氨基酸在細(xì)胞內(nèi)的重要生理作用主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:①是蛋白質(zhì)的基本組成單位,用于合成蛋白質(zhì)和多肽;②可用于合成某些具有重要生理作用的含氮化合物,如核酸、尼克酰胺等;③某些氨基酸還具有獨(dú)特的生理作用,如甘氨酸參與生物轉(zhuǎn)化作用,丙氨酸和谷氨酰胺參與細(xì)胞內(nèi)氨的運(yùn)輸?shù)?;④可轉(zhuǎn)變成糖類和脂肪,參與氧化供能。細(xì)胞所能利用的氨基酸是L型同分異構(gòu)體,D型氨基酸不能被利用。不同的細(xì)胞對(duì)氨基酸的需求各異,但有些必需氨基酸是細(xì)胞不能自身合成的,必須依靠外源的細(xì)胞培養(yǎng)液提供。其余非必需氨基酸,細(xì)胞可以自己合成,或通過轉(zhuǎn)氨作用由其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來,但是在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加適當(dāng)濃度的非必需氨基酸可以減輕細(xì)胞在合成方面的負(fù)擔(dān),提高谷氨酰胺及其它必需氨基酸的利用率。絕大部分細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求,可能因其不僅是細(xì)胞的主要氮源,且可作為細(xì)胞生長(zhǎng)的能源物質(zhì)和嘌呤、嘧啶核苷酸的前體,另外還可直接作為細(xì)胞增殖和產(chǎn)物合成中的蛋白質(zhì)和多肽的組成成分。在缺少谷氨酰胺時(shí),細(xì)胞會(huì)生長(zhǎng)不良,甚至死亡。由于谷氨酰胺具有多種生理作用。河南無(wú)血清培養(yǎng)基產(chǎn)品介紹