無(wú)芽孢:E=209—250*103J/mol。顯然,(5)式的比值〉1,說(shuō)明提高溫度對(duì)于第二個(gè)平行反應(yīng),即菌體死亡的反應(yīng)是有利的。提高溫度,雖然兩個(gè)平行性反應(yīng)的反應(yīng)速度常數(shù)都提高了,但是,達(dá)到同樣的**效果,所需要的時(shí)間卻縮短了,由于***個(gè)反應(yīng)也就是營(yíng)養(yǎng)成分破壞的反應(yīng)速度常速增加的少,因此,有利于減少培養(yǎng)基在**過(guò)程中營(yíng)養(yǎng)成分的破壞。換言之,高溫短時(shí)**對(duì)于培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分是有利的。通常所說(shuō)的高溫短時(shí)**可以提高生產(chǎn)效益,其理論根據(jù)就在于此。結(jié)論1:當(dāng)**溫度上升時(shí),微生物殺死速率的提高要超過(guò)培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加。要減少營(yíng)養(yǎng)成分的破壞,可升高溫度**。結(jié)論2:在**時(shí)選擇較高的溫度、較短的時(shí)間,這樣便既可達(dá)到需要的**程度,同時(shí)又可減少營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失。(二)、影響**效果的因素(1)微生物種類:不同的微生物k值不同。(2)初始菌量:在保持N值不變的前提下,t與初始菌量N0的對(duì)數(shù)成正比。(3)培養(yǎng)基成份:油脂、蛋白質(zhì)增加微生物的耐熱性。(4)傳熱與混合狀況:影響受熱均勻度。(5)培養(yǎng)基中固體顆粒的存在影響熱穿透。(6)蒸汽中空氣的存在降低蒸汽分壓和**溫度。(7)pH:酸性pH下可加快微生物熱死速率三、培養(yǎng)基的工業(yè)**。無(wú)酚紅培養(yǎng)基減少了酚紅對(duì)細(xì)胞的影響。北京MEM a培養(yǎng)基供應(yīng)商
本氏***葉片及根愈傷**誘導(dǎo)的對(duì)比效果圖,a:葉片愈傷**;b:葉片愈傷**誘導(dǎo)率;c:根愈傷**;d:根愈傷**誘導(dǎo)率;a和c中bar=;圖7是cs和ms兩種培養(yǎng)基上,水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)的對(duì)比效果圖,a:水稻成熟胚愈傷**;b:水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)率;a中bar=;圖8是用不同ph的超純水(ph為)配制的cs、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基ph值穩(wěn)定性比較效果圖;圖9是在未調(diào)ph和將ph調(diào)至、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的生長(zhǎng)狀況的比較效果圖,a:不同液體培養(yǎng)基培養(yǎng)前的無(wú)菌苗生長(zhǎng)情況;b1、c1和d1:1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果;b2、c2和d2:1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果;b3、c3和d3:ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果;b4、c4和d4:cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果;b5、c5和d5:1/;b6、c6和d6:1/;b7、c7和d7:;b8、c8和d8:;a、b、c和d中bar=;圖10是對(duì)在未調(diào)ph和將ph調(diào)至、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的莖高(a)、莖中粗(b)、根長(zhǎng)(c)、鮮重(d)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)的比較效果圖。具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。實(shí)施例一,本實(shí)施例廣適性植物**培養(yǎng)基,其每1000ml培養(yǎng)基中含有:kno32662mg、。安徽F12培養(yǎng)基RPMI1640培養(yǎng)基含有多種關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)成分,支持細(xì)胞生長(zhǎng)。
mgso4·7h2o20-200mg/l,2-羥基乙胺10-50mg/l,cecl31-20mg/l,mnso4·h2o1-10mg/l,feso4·7h2o1-10mg/l,vb15-50mg/l,生物素1-10μg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為6-7,121℃**,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a。更推薦地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,2-羥基乙胺40mg/l,cecl310mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a。推薦地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸1-10g/l,尿素1-5g/l,殼聚糖20-100mg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph,**,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b;更推薦地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸5g/l,尿素2g/l,殼聚糖80mg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明取得的有益效果主要包括但是并不限于以下幾個(gè)方面:本發(fā)明發(fā)酵培養(yǎng)基采用兩部分組成,發(fā)酵培養(yǎng)基a側(cè)重于菌株增殖的提升,發(fā)酵培養(yǎng)基b側(cè)重于谷氨酸的合成和分泌;前期細(xì)胞增殖時(shí)。
1.細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無(wú)機(jī)鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個(gè)主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因?yàn)镃a2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份,參與細(xì)胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養(yǎng);后者緩沖能力較強(qiáng),適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。表1-1幾種常用的BSS配方(g/L)天然培養(yǎng)基指來(lái)自動(dòng)物體液或利用**分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿、血清、***、雞胚浸出液等。其***是營(yíng)養(yǎng)成分豐富,培養(yǎng)效果良好,但缺點(diǎn)是成分復(fù)雜,來(lái)源受限且制作過(guò)程復(fù)雜、批間差異大。目前***使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種**提取液、促進(jìn)細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。減血清培養(yǎng)基減少了血清對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的干擾。
另外,酚紅作為pH值的指示劑被加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中。酚紅在產(chǎn)物純化過(guò)程中會(huì)造成干擾,并且具有一定的固醇類***樣作用,如雌***樣作用。當(dāng)用于哺乳類動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),可能會(huì)發(fā)生一些固醇類反應(yīng)。現(xiàn)在商業(yè)化細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅含量可根據(jù)需求調(diào)整。因生物反應(yīng)器具有pH在線檢測(cè)技術(shù),生物反應(yīng)器培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí),酚紅可完全去除。細(xì)胞保護(hù)劑是保護(hù)細(xì)胞免受滲透壓變化、剪切力、氧化及氣泡作用等引起的損傷的物質(zhì)。在使用生物反應(yīng)器培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí),細(xì)胞易被機(jī)械攪拌和通氣鼓泡產(chǎn)生的流體剪切力和氣泡作用所傷害甚至破損死亡。為降低這種損傷,除優(yōu)化生物反應(yīng)器結(jié)構(gòu)和生產(chǎn)工藝外,可在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一些保護(hù)劑。其主要是通過(guò)改變細(xì)胞培養(yǎng)基物性或是對(duì)細(xì)胞具有保護(hù)作用的物質(zhì),常用的種類有血清、白蛋白、聚已二醇(PEG)、非離子性表面活性劑PluronicF68或是其他一些高分子聚合物等。3.細(xì)胞培養(yǎng)基的理化性質(zhì)動(dòng)物細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)基中不僅能存活,還要分裂增殖,合適的滲透壓、pH值等理化性質(zhì)是細(xì)胞培養(yǎng)基必須具備的前提條件。動(dòng)物細(xì)胞大多數(shù)需要輕微的堿性條件,適宜pH在~。細(xì)胞培養(yǎng)基的pH值通常需經(jīng)校正的pH計(jì)來(lái)測(cè)定。在細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中,隨細(xì)胞數(shù)量的增多和代謝活動(dòng)的加強(qiáng)。MEM培養(yǎng)基提供了豐富的營(yíng)養(yǎng)成分,支持細(xì)胞的快速增殖。云南DMEM/F12培養(yǎng)基包括
MEM培養(yǎng)基在細(xì)胞培養(yǎng)中表現(xiàn)出高效的穩(wěn)定性。北京MEM a培養(yǎng)基供應(yīng)商
培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基使用說(shuō)明中有加熱溶解后高壓**,有的加熱沸騰后高壓**,見(jiàn)過(guò)一些實(shí)驗(yàn)室,不經(jīng)加熱直接高壓**,也有的實(shí)驗(yàn)室一律加熱沸騰后高壓**。大家是怎們制備的,不加熱或全部沸騰對(duì)檢測(cè)結(jié)果有沒(méi)有影響?品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬(wàn)-50萬(wàn)培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基制備后應(yīng)保持一定的透明度,下面制備操作影響比較大的是(??)。A、原料稱量混合溶解B、加熱煮沸,調(diào)PH值C、過(guò)濾、分裝容器D、消毒或**品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬(wàn)-50萬(wàn)【求助】培養(yǎng)基制備請(qǐng)問(wèn)牛肉膏與牛肉膏粉的使用有何區(qū)別?可互相替代嗎?使用比例相同嗎?品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬(wàn)-50萬(wàn)培養(yǎng)基的制備方法培養(yǎng)基的制備方法以下為常規(guī)方法,如配方中有特殊規(guī)定或要求,以配方為***依據(jù)。1.根據(jù)配方,計(jì)算各種營(yíng)養(yǎng)成分用量。一般*品可用普通*物天平稱量,用量少的*品,可按比例配成高濃度溶液,再按所需量用移液管吸取。稱好的*品放入品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬(wàn)-50萬(wàn)【求助】培養(yǎng)基制備系統(tǒng)哪位大蝦有關(guān)于培養(yǎng)基制備系統(tǒng)相關(guān)的資料,原理、應(yīng)用、品牌、技術(shù)對(duì)比等越詳細(xì)越好。北京MEM a培養(yǎng)基供應(yīng)商