式中:N0—開(kāi)始**(t=0)時(shí)原有活菌數(shù);Nt----經(jīng)時(shí)間t后殘存活菌數(shù)。k:意義同上;t:表示理論**時(shí)間k=()logNt/N0;比死亡速率常數(shù)K,K值大,表明微生物容易死亡。理論**時(shí)間的計(jì)算需要注意以下幾個(gè)問(wèn)題:(1)K值因不同的微生物種類不同、不同的生理狀態(tài)、不同的外界環(huán)境,差別很大,實(shí)質(zhì)上,它是微生物熱阻的一種表示形式,微生物的熱阻越大,K值也越小。可以取耐熱性芽孢桿菌的K進(jìn)行計(jì)算。(2)在計(jì)算過(guò)程中,N0,Nt如何取值?N0為**開(kāi)始時(shí)培養(yǎng)基中活微生物數(shù),可以參考一般培養(yǎng)基中的活微生物數(shù)為(1-2)×107個(gè)/ml;Nt通常取,既**失敗的概率為千分之一。(3)上述**時(shí)間,通常稱之為理論**時(shí)間,只可以用于工程計(jì)算中,在實(shí)踐過(guò)程中,因蒸汽的壓力問(wèn)題(不穩(wěn)定)、蒸汽的流量問(wèn)題有很大差別,甚至培養(yǎng)基中的固體顆粒的大小、培養(yǎng)基的粘度等因素,都會(huì)影響**效果,實(shí)際的設(shè)計(jì)和操作計(jì)算時(shí)間可作適當(dāng)比例的延長(zhǎng)或縮短。在實(shí)際生產(chǎn)中,通常采用經(jīng)驗(yàn)數(shù)值:間歇**,121℃,20—30分鐘;連續(xù)**,137℃,15—30s,在維持罐中保溫8—20分鐘。4、**溫度的選擇在培養(yǎng)基**過(guò)程中,除了雜菌死亡,還伴隨著培養(yǎng)基成分的破壞。因此必須選擇既能達(dá)到**目的。無(wú)血清培養(yǎng)基確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的高度準(zhǔn)確性。浙江減血清培養(yǎng)基常見(jiàn)問(wèn)題
培養(yǎng)實(shí)例7和對(duì)比培養(yǎng)例7的誘導(dǎo)結(jié)果比較::用上述方法進(jìn)行水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)時(shí),cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)出的愈傷**形態(tài)大小均相近,出愈率均為100%。如圖7所示。培養(yǎng)實(shí)例8:液體培養(yǎng)基在植物水培中的應(yīng)用(1)用不同ph的超純水配制的液體培養(yǎng)基ph值穩(wěn)定性比較:a、用不同ph的超純水配制液體培養(yǎng)基:通常多種因素會(huì)導(dǎo)致相同超純水制水機(jī)產(chǎn)出的超純水ph變動(dòng)較大,ph通常為。分別選取ph為、、、、、,分別配制ms液體培養(yǎng)基、cs液體培養(yǎng)基、1/2ms液體培養(yǎng)基、1/2cs液體培養(yǎng)基,制作方法為:ms液體培養(yǎng)基為取ms基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l;cs液體培養(yǎng)基為取cs基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l;1/2ms液體培養(yǎng)基為取1/2ms基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l;1/2cs液體培養(yǎng)基為取1/2cs基本培養(yǎng)基置于不同ph的超純水中溶解并定容至1l。b、結(jié)果為:用ph為,ms液體培養(yǎng)基ph為,cs液體培養(yǎng)基ph為,1/2ms液體培養(yǎng)基ph為,1/2cs液體培養(yǎng)基ph為。植物**適宜生長(zhǎng)的ph一般為,觀察可知,ms液體培養(yǎng)基及1/2ms液體培養(yǎng)基的ph偏酸性且波動(dòng)較大,其應(yīng)用于液體培養(yǎng)基時(shí)通常需要調(diào)節(jié)ph,過(guò)程繁瑣,相比之下。河北培養(yǎng)基市場(chǎng)報(bào)價(jià)MEM培養(yǎng)基含有多種必需的營(yíng)養(yǎng)成分和礦物質(zhì)。
所描述的實(shí)施例**是本申請(qǐng)一部分實(shí)施例,而不是全部的實(shí)施例。基于本申請(qǐng)中的實(shí)施例,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例,都應(yīng)當(dāng)屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實(shí)施例1一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,2-羥基乙胺40mg/l,cecl310mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a;所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸5g/l,尿素2g/l,殼聚糖80mg/l;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph為,121℃**15min,自然冷卻,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b;采用常規(guī)發(fā)酵工藝:將黃色短桿菌gdk-9按8%接種量將種子液(od600nm為)接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),發(fā)酵培養(yǎng)24h,然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b,繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h,收集發(fā)酵液;整個(gè)發(fā)酵培養(yǎng)過(guò)程中,控制發(fā)酵溫度35℃,通風(fēng)比1∶,攪拌轉(zhuǎn)速300r/min,溶氧維持在20%。
文獻(xiàn)2“混合硝酸稀土對(duì)谷氨酸產(chǎn)生菌的影響,氨基酸雜志”發(fā)現(xiàn),在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的稀土元素,能夠提高谷氨酸的產(chǎn)量。申請(qǐng)人之前的**技術(shù)“一種谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基制備方法”,在常規(guī)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn),通過(guò)添加菌體蛋白浸膏來(lái)替代酵母膏氮源,不但節(jié)約了成本,還能提高氨基酸發(fā)酵產(chǎn)率,一舉兩得。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:在已有發(fā)酵培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,申請(qǐng)人針對(duì)微生物發(fā)酵的特點(diǎn),繼續(xù)進(jìn)行了改進(jìn),以提高發(fā)酵效率,據(jù)此,提出了一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基。本發(fā)明是通過(guò)如下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的:一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基,其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b;所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加,然后間隔12h以上添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。進(jìn)一步地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖,酵母浸膏,k2hpo4,mgso4·7h2o,2-羥基乙胺,cecl3,mnso4·h2o,feso4·7h2o,vb1,生物素;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph,**,制得發(fā)酵培養(yǎng)基a。進(jìn)一步地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為:取各原料:琥珀酸,尿素,殼聚糖;將各原料攪拌均勻后,調(diào)節(jié)ph,**,制得發(fā)酵培養(yǎng)基b。推薦地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為:取各原料:葡萄糖50-100g/l,酵母浸膏10-30g/l,k2hpo41-5g/l。F12培養(yǎng)基在生物醫(yī)學(xué)研究中表現(xiàn)出優(yōu)越的性能。
CD3-CD56+:50%-90%NK細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基制劑制備過(guò)程中,需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行3次清洗,在大量的實(shí)驗(yàn)中會(huì)發(fā)現(xiàn),在清洗細(xì)胞的過(guò)程中往往會(huì)損失大量細(xì)胞,少則30%多則50%。友康研**細(xì)胞回收液干細(xì)胞溫和消化酶專門用于干細(xì)胞的消化,包括臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,胚胎干細(xì)胞(ES)等。消化作用其溫和,對(duì)細(xì)胞的干細(xì)胞溫和消化酶(500mL/瓶)T細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基可用于Car-T細(xì)胞的培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)可不添加任何自體血漿。T細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基用于HEK293細(xì)胞的培養(yǎng)及重組蛋白的表達(dá),HEK293蛋白表達(dá)無(wú)血清培養(yǎng)基成分明確,比較大細(xì)胞密度可達(dá)7×10E6cells/mHEK293蛋白表達(dá)無(wú)血清培養(yǎng)基GMP級(jí)細(xì)胞凍存液不含蛋白、不含DMSO,化學(xué)成分明確。是可作為細(xì)胞*物*用輔料的凍存液。GMP級(jí)細(xì)胞凍存液友康生物免*細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基(CIK),用于單核細(xì)胞向CIK細(xì)胞的體外誘導(dǎo)及體外大規(guī)模擴(kuò)增培養(yǎng)。免*細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基用于懸浮HEK293細(xì)胞(如293T、293S、293F、293A等)的連續(xù)培養(yǎng)以及外源基因的瞬時(shí)表達(dá),尤其在包裝慢**過(guò)程中表HEK293全懸浮無(wú)血清培養(yǎng)基CHO無(wú)血清培養(yǎng)基,無(wú)血清,低蛋白;采用批次培養(yǎng),CHO比較大生長(zhǎng)密度可達(dá)9E6cells/mL。無(wú)酚紅培養(yǎng)基確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的高度準(zhǔn)確性。上海減血清培養(yǎng)基哪家便宜
RPMI1640培養(yǎng)基在抗體生產(chǎn)和免疫研究中有重要作用。浙江減血清培養(yǎng)基常見(jiàn)問(wèn)題
附圖說(shuō)明圖1是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,哥倫比亞型擬南芥無(wú)菌苗培養(yǎng)的對(duì)比效果圖,a:無(wú)菌苗在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)情況;b:無(wú)菌苗蓮座葉及根系發(fā)育;c:萌發(fā)率;d主根長(zhǎng)度;a和b中bar=;圖2是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,蘭茲貝格型擬南芥無(wú)菌植株培養(yǎng)的對(duì)比效果圖,a:無(wú)菌植株在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)情況;b:無(wú)菌植株地上部分及根系發(fā)育;c:無(wú)菌植株花***發(fā)育(左)和花粉的亞歷山大染色(右);d:主根長(zhǎng)度;e:株高;f:蓮座葉長(zhǎng)度;g:成熟花粉活力;a中bar=、b中bar=、c中花***bar=、c中花粉bar=15um;圖3是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,油菜無(wú)菌苗培養(yǎng)的對(duì)比效果圖,a:無(wú)菌植株在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)情況;b:無(wú)菌苗地上部分及根系發(fā)育;c:莖高;d:莖中粗;e:主根長(zhǎng);f:大于;a中bar=、b中bar=;圖4是1/2cs和1/2ms兩種培養(yǎng)基上,馬鈴薯無(wú)菌苗培養(yǎng)的對(duì)比效果圖,a:無(wú)菌植株在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)情況;b:無(wú)菌苗地上部分及根系發(fā)育;c:莖高;d:莖中粗;e:根數(shù);a和b中bar=;圖5是cs和ms兩種培養(yǎng)基上,哥倫比亞型擬南芥葉片及根愈傷**誘導(dǎo)的對(duì)比效果圖,a:葉片愈傷**;b:葉片愈傷**誘導(dǎo)率;c:根愈傷**;d:根愈傷**誘導(dǎo)率;a和c中bar=;圖6是cs和ms兩種培養(yǎng)基上。浙江減血清培養(yǎng)基常見(jiàn)問(wèn)題