廣東RPMI1640培養(yǎng)基包括

    由于培養(yǎng)基的間歇**不需要專門的**設(shè)備，投資少，對(duì)設(shè)備要求簡(jiǎn)單，對(duì)蒸汽的要求也比較低，且**效果可靠，因此，間歇**是中小型生產(chǎn)工廠經(jīng)常采用的一種培養(yǎng)基**方法。（三）、培養(yǎng)基的連續(xù)**1、定義：連續(xù)**也叫連消，將配制好的并經(jīng)預(yù)熱（60～75℃）的培養(yǎng)基用泵連續(xù)輸入由直接蒸汽加熱的加熱塔，使在短時(shí)間內(nèi)達(dá)到**溫度（126～132℃）。然后進(jìn)入維持罐（或維持管），使在**溫度下維持3～7分鐘后再進(jìn)入冷卻管，使其冷卻至接種溫度并直接進(jìn)入已事先**（空罐**）過的發(fā)酵罐內(nèi)。其溫度一般以126～132℃為宜，總蒸汽壓力要求達(dá)到～MPa以上。培養(yǎng)基采用連續(xù)**時(shí)，需在培養(yǎng)基進(jìn)入發(fā)酵罐前，直接用蒸汽進(jìn)行空罐**（空消），用無菌空氣保壓，待培養(yǎng)基流入罐后，開始冷卻。**時(shí)對(duì)培養(yǎng)基的加熱可采用各種加熱器。培養(yǎng)基的冷卻方式有噴淋冷卻式、真空冷卻式、薄板換熱器式幾種方式，其過程均包括加熱、維持和冷卻階段。2、連續(xù)**的流程：（1）由熱交換器組成的**系統(tǒng)流程中采用了薄板換熱器作為培養(yǎng)液的加熱和冷卻器，蒸汽在薄板換熱器的加熱段使培養(yǎng)液的溫度升高，經(jīng)維持段保溫一定時(shí)間后，培養(yǎng)基在薄板換熱器的冷卻段進(jìn)行冷卻。無血清培養(yǎng)基為細(xì)胞培養(yǎng)提供了純凈的背景。廣東RPMI1640培養(yǎng)基包括

    無芽孢：E=209—250*103J/mol。顯然，（5）式的比值〉1，說明提高溫度對(duì)于第二個(gè)平行反應(yīng)，即菌體死亡的反應(yīng)是有利的。提高溫度，雖然兩個(gè)平行性反應(yīng)的反應(yīng)速度常數(shù)都提高了，但是，達(dá)到同樣的**效果，所需要的時(shí)間卻縮短了，由于***個(gè)反應(yīng)也就是營養(yǎng)成分破壞的反應(yīng)速度常速增加的少，因此，有利于減少培養(yǎng)基在**過程中營養(yǎng)成分的破壞。換言之，高溫短時(shí)**對(duì)于培養(yǎng)基營養(yǎng)成分是有利的。通常所說的高溫短時(shí)**可以提高生產(chǎn)效益，其理論根據(jù)就在于此。結(jié)論1：當(dāng)**溫度上升時(shí)，微生物殺死速率的提高要超過培養(yǎng)基成分的破壞速率的增加。要減少營養(yǎng)成分的破壞，可升高溫度**。結(jié)論2：在**時(shí)選擇較高的溫度、較短的時(shí)間，這樣便既可達(dá)到需要的**程度，同時(shí)又可減少營養(yǎng)物質(zhì)的損失。（二）、影響**效果的因素（1）微生物種類：不同的微生物k值不同。（2）初始菌量：在保持N值不變的前提下，t與初始菌量N0的對(duì)數(shù)成正比。（3）培養(yǎng)基成份：油脂、蛋白質(zhì)增加微生物的耐熱性。(4)傳熱與混合狀況：影響受熱均勻度。(5)培養(yǎng)基中固體顆粒的存在影響熱穿透。(6)蒸汽中空氣的存在降低蒸汽分壓和**溫度。(7)pH：酸性pH下可加快微生物熱死速率三、培養(yǎng)基的工業(yè)**。河南DMEM/F12培養(yǎng)基答疑解惑減血清培養(yǎng)基減少了血清對(duì)細(xì)胞的影響。

    所描述的實(shí)施例**是本申請(qǐng)一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒旧暾?qǐng)中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都應(yīng)當(dāng)屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實(shí)施例1一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基，其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b；所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加，然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖80g/l，酵母浸膏20g/l，k2hpo42g/l，mgso4·7h2o50mg/l，2-羥基乙胺40mg/l，cecl310mg/l，mnso4·h2o3mg/l，feso4·7h2o3mg/l，vb110mg/l，生物素7μg/l；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基a；所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為：取各原料：琥珀酸5g/l，尿素2g/l，殼聚糖80mg/l；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基b；采用常規(guī)發(fā)酵工藝：將黃色短桿菌gdk-9按8％接種量將種子液（od600nm為）接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)24h，然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b，繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h，收集發(fā)酵液；整個(gè)發(fā)酵培養(yǎng)過程中，控制發(fā)酵溫度35℃，通風(fēng)比1∶，攪拌轉(zhuǎn)速300r/min，溶氧維持在20％。

    本發(fā)明涉及植物**培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法。背景技術(shù)：繡球(hydrangeamacrophylla)為虎耳草科繡球?qū)俾淙~灌木,別名八仙花、**花、粉團(tuán)花、雪球花、草繡球等，是園林上應(yīng)用***的觀賞植物。原產(chǎn)于我國長江流域及以南，自然株高2m。葉對(duì)生，倒卵或橢圓形，邊緣有鋸齒，傘房花序頂生，直徑20cm，近球形。花色多變，青白色，漸轉(zhuǎn)粉紅色，再轉(zhuǎn)紫紅色，花色美艷。其花色又常隨土壤的酸堿度而改變,土壤ph值4～6時(shí)，花色多呈藍(lán)色；ph值，則呈紅色。繡球花葉片翠綠，花色鮮艷，盛開時(shí)花團(tuán)錦簇，美麗多姿，每簇花可開2個(gè)月之久，觀賞期長。由于繡球花的孕性花極為少數(shù)，所以不易結(jié)種，常用分株、壓條或扦插方法繁殖，但分株、壓條繁殖倍率低，速度慢，而扦插繁殖又會(huì)受到季節(jié)的限制，不能常年生產(chǎn)苗木，很難滿足市場(chǎng)的需求。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明的目的之一是提供一種繁殖周期短，效率高，成本低的繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法。本發(fā)明的上述發(fā)明目的是通過以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：一種繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法，具體步驟如下：s1：外植體選擇；s2：外植體消毒；s3：誘導(dǎo)培養(yǎng)；s4：增殖培養(yǎng)；s5：生根培養(yǎng)，其中。減血清培養(yǎng)基減少了實(shí)驗(yàn)中的血清干擾。

    3)培養(yǎng)方法：將配制的1/2cs生長培養(yǎng)基分裝于長、寬、高9cm的耐高溫培養(yǎng)盒中，用移液槍吸取帶有無菌水的無菌種子，吹打在無菌濾紙上，用無菌尖頭鑷子將種子均勻點(diǎn)播在培養(yǎng)基上；于溫度22-24℃、濕度50-70％、光照強(qiáng)度1500-2000lux、光照和黑暗交替(光照時(shí)間16h、黑暗時(shí)間8h)條件下培養(yǎng)。(4)1/2cs生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：哥倫比亞型擬南芥種子在1/2cs生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％，培養(yǎng)16d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯，蓮座葉均已伸展，葉色濃綠，根系發(fā)達(dá)、平均主根長為。如圖1所示。對(duì)比培養(yǎng)例1：將1/2cs基本培養(yǎng)基替換為1/2ms基本培養(yǎng)基，其余完全同培養(yǎng)實(shí)例1，1/2ms基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：哥倫比亞型擬南芥種子在1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％，培養(yǎng)16d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯，蓮座葉部分伸展，葉色濃綠，根系發(fā)達(dá)、平均主根長為。如圖1所示。培養(yǎng)實(shí)例1和對(duì)比培養(yǎng)例1的培養(yǎng)結(jié)果比較：哥倫比亞型擬南芥在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100％；在相同條件下培養(yǎng)16d時(shí)，與1/2ms生長培養(yǎng)基相比，1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢(shì)更佳，主要表現(xiàn)為蓮座葉長勢(shì)更好、根系更為發(fā)達(dá)。如圖1所示。F12培養(yǎng)基提供了豐富的營養(yǎng)支持。河南DMEM/F12培養(yǎng)基答疑解惑

減血清培養(yǎng)基減少了實(shí)驗(yàn)中血清帶來的變異性。廣東RPMI1640培養(yǎng)基包括

    1/2ms生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)結(jié)果為：中雙11號(hào)油菜種子在1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率為100％，培養(yǎng)9d的幼苗，表現(xiàn)為植株健壯、平均株高為，葉色濃綠，莖稈粗壯、平均莖中粗為，根系發(fā)達(dá)、平均根數(shù)為(>)、平均主根長為。如圖3所示。培養(yǎng)實(shí)例3和對(duì)比培養(yǎng)例3的培養(yǎng)結(jié)果比較：中雙11號(hào)油菜種子在1/2cs生長培養(yǎng)基和1/2ms生長培養(yǎng)基上的萌發(fā)率均為100％；在相同條件下培養(yǎng)9d時(shí)，與1/2ms生長培養(yǎng)基相比，1/2cs生長培養(yǎng)基中的幼苗長勢(shì)更佳，其株高、根的數(shù)目?jī)?yōu)于1/2ms生長培養(yǎng)基，莖粗及平均主根長度與1/2ms生長培養(yǎng)基相近。如圖3所示。培養(yǎng)實(shí)例4：馬鈴薯無菌苗培養(yǎng)生長培養(yǎng)基配制：1/2cs基本培養(yǎng)基+蔗糖30g/l+植物凝膠8g/l，用超純水溶解，。1/2cs基本培養(yǎng)基的成分及用量如表1所示。培養(yǎng)方法：以克新18號(hào)馬鈴薯為例，將配制好的1/2cs生長培養(yǎng)基分裝于長、寬、高9cm的耐高溫培養(yǎng)盒中，選擇生長旺盛的馬鈴薯脫毒苗，于無菌環(huán)境下，根據(jù)實(shí)際需要，用手術(shù)剪刀剪取約1cm長的至少帶有1個(gè)葉芽的莖端或莖段，用彎頭鑷子將其1/3-1/2長度垂直插入培養(yǎng)基中；于溫度22-23℃、濕度50-70％、光照強(qiáng)度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照時(shí)間14h、黑暗時(shí)間10h)條件下培養(yǎng)。廣東RPMI1640培養(yǎng)基包括