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來源: 發(fā)布時間:2024-10-17

    促使植物材料快速生長、芽體健壯。本發(fā)明在一較佳示例中可以進一步配置為:在s4中,將s3中的無菌外植體接入增殖培養(yǎng)基中后的培養(yǎng)環(huán)境為在光照強度1500lux條件下,溫度25℃,光照時間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時間8h,培養(yǎng)8~12周。通過采用上述技術方案,在該培養(yǎng)條件下能夠有效避免增殖培養(yǎng)階段植物材料出現(xiàn)應激反應,植物材料能夠快速適應增殖培養(yǎng)基,促使植物材料快速生長、芽體健壯。本發(fā)明在一較佳示例中可以進一步配置為:在s4中,每隔8~12周轉接入新的增殖培養(yǎng)基。通過采用上述技術方案,經(jīng)過8~12周后,增殖培養(yǎng)基的效果將會減弱,植物材料也會污染增殖培養(yǎng)基,需要及時更換。本發(fā)明在一較佳示例中可以進一步配置為:在s5中,將s4中的繡球組培苗接入生根培養(yǎng)基中后的培養(yǎng)環(huán)境為在光照強度1500lux條件下,溫度25℃,光照時間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時間8h,培養(yǎng)8~12周。通過采用上述技術方案,在該培養(yǎng)條件下能夠有效避免生根培養(yǎng)階段植物材料出現(xiàn)應激反應,植物材料能夠快速適應生根培養(yǎng)基,促使植物材料快速生長、芽體健壯。本發(fā)明在一較佳示例中可以進一步配置為:在s2中,外植體消毒的具體步驟為將樹莓外植體葉片剪去,自來水沖洗干凈。減血清培養(yǎng)基減少了血清中的未知因素對細胞的影響。內(nèi)蒙古無血清培養(yǎng)基代理商

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    從而提高菌株增殖速率,但是濃度過大會導致抑菌現(xiàn)象,后期菌株增殖放緩,以產(chǎn)酸為主,2-羥基乙胺還能夠作為陽離子表面活性劑,使得細胞壁疏松,提高細胞通透性,促進谷氨酸釋放到發(fā)酵液,從而提高了谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉化率。三、通過上述實驗確定cecl3添加量為10mg/l、2-羥基乙胺的添加量40mg/l,在此基礎上,研究發(fā)酵培養(yǎng)基b對菌體濃度、谷氨酸含量以及糖酸轉化率的影響。對照組1采用發(fā)酵培養(yǎng)基a進行發(fā)酵,不采用發(fā)酵培養(yǎng)基b,100l發(fā)酵罐中含有70l發(fā)酵培養(yǎng)基a;發(fā)酵工藝參照實施例1。對照組2:發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加琥珀酸,其余同實施例1。對照組3:發(fā)酵培養(yǎng)基b中不添加殼聚糖,其余同實施例1。對照組4:發(fā)酵培養(yǎng)基a中添加5g/l的琥珀酸,其余同對照組1。實驗組為實施例1。具體結果見表1。表1組別菌濃度od600nm谷氨酸產(chǎn)量g/l糖酸轉化率%對照組:對照組1采用單一發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵,谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉化率明顯低于實驗組,各組別菌體濃度差異并不大;對照組4在對照組1的基礎上添加了琥珀酸,對菌體濃度并沒有影響,谷氨酸產(chǎn)量和糖酸轉化率也沒有明顯差異,可能原因是,發(fā)酵前期以菌體增殖為主,產(chǎn)酸較少,琥珀酸對菌體增殖并沒有明顯的刺激作用。湖南MEM a培養(yǎng)基價格F12培養(yǎng)基適用于復雜細胞培養(yǎng)實驗。

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    第三節(jié)培養(yǎng)基的高壓**及效果驗證消毒**在醫(yī)學實踐上有著重要意義。它可切斷傳播途徑、控制***擴散造成的危害;也可殺滅物品或器皿上的**,防止醫(yī)院***;在醫(yī)學微生物檢驗的領域中,消毒**是保正***的病原學檢驗不受外來微生物污染的前提。(一)術語消毒(disinfection)、火菌(sterilization)、抑菌(bacteriostasis)、防腐(antisepsis)和無菌(asepsis)是常用術語。下面就術語概念加以敘述。(1)**。是用適當?shù)奈锢砘蚧瘜W手段將物品中活的微生物殺滅或除去的方法。本法適用于制劑、原料、輔料及醫(yī)療器械等物品的**。(如外科器械、注射器、基礎培養(yǎng)基**等。)(2)消毒。是破壞物體上活的病原微生物的方法,但不包括**芽胞和非病原微生物。如用酒精溶液浸泡體溫計、新潔爾滅液擦拭檢查臺等。用于消毒的化學物品稱消毒劑(dis-infectant)。一般而言,消毒對象是指物體而不是機體。(3)防腐。直接使用防腐劑(antiseptics)破壞或**活的病原微牛物的方法。如外科手術前碘液擦洗皮膚、雙氧水清創(chuàng)傷口或**肥皂清冼雙手等。(4)無菌。防止***病原體進入****或物品的操作技術稱無菌操作。無菌即為不存在活的微生物。用于消毒**的物理方法有熱力、電離輻射、超聲波、過濾等。

    體外動物細胞培養(yǎng)時需要大量谷氨酰胺,利用量常超過其他必須氨基酸利用量的總和。維生素是維持細胞生長的生物活性物質,在細胞代謝中起調(diào)節(jié)及控制作用。維生素可分為水溶性和脂溶性兩類,水溶性維生素主要包括泛酸、維生素B12、葉酸、煙酰胺、吡哆醛、硫胺素、核黃素、維生素C、膽堿、肌醇等;脂溶性維生素主要包括維生素A、D、E、K等;有的培養(yǎng)液中還直接采用ATP和輔酶A;大部分培養(yǎng)基中還有生物素。許多維生素參與構成各種酶的活性基團的成分,沒有它們,酶便沒有活性,代謝活動將無法進行。比如,泛酸可以在細胞內(nèi)轉變成?;d體蛋白和輔酶(如輔酶A),參與糖類、脂類和蛋白質代謝中的催化反應;維生素B12則在細胞內(nèi)參與葉酸的合成和脂肪酸的合成等。不同配方的細胞培養(yǎng)基中維生素的濃度有較大差異。例如,DMEM培養(yǎng)基中維生素的含量約為MEM培養(yǎng)基的兩倍,其原因是一方面不同種類維生素的作用不同,另一方面不同種類的細胞對維生素的需求也可能有較大差異,相應細胞培養(yǎng)基的配方中維生素的含量也可能不同。無機鹽是細胞維持生命活動所不可缺少的營養(yǎng)成分,主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cl-、PO43—、SO42—、HCO3-等,主要作用為維持細胞培養(yǎng)液滲透壓平衡。無酚紅培養(yǎng)基適用于對酚紅敏感的實驗。

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    對于大多數(shù)哺乳類動物細胞,滲透壓在260~320mOsm/kg的范圍內(nèi)都適宜。在生產(chǎn)、配制細胞培養(yǎng)基的過程中,滲透壓的測定較為重要,有助于防止在生產(chǎn)、配制過程中出現(xiàn)稱量等方面的錯誤。反應器高密度培養(yǎng)動物細胞過程,在添加碳酸氫鈉的過程中注意滲透壓的監(jiān)控,防止?jié)B透壓過高對細胞的損害。溫度溫度對細胞培養(yǎng)基有較大的影響,溫度過高可引起營養(yǎng)成份的降解或破壞,細胞培養(yǎng)基的pH、離子強度和電解常數(shù)pKa也可能受到影響。如細胞培養(yǎng)液中的谷氨酰胺,在高溫條件下降解的速度較快,如35℃貯存時,放置3天降解25%左右,在4℃貯存3周降解約20%。粘滯性及表面張力含血清細胞培養(yǎng)液的粘滯性主要是由血清引起的,在轉瓶培養(yǎng)貼壁細胞時,培養(yǎng)液的粘滯性對細胞生長沒有多大影響;但在生物反應器懸浮培養(yǎng)細胞時,細胞培養(yǎng)液的粘滯性則直接影響攪拌轉速控制及攪拌剪切力對細胞造成的損傷程度。表面張力對細胞培養(yǎng)有較大的作用,尤其在利用生物反應器進行懸浮培養(yǎng)時,攪拌和通氣都會引起泡沫的產(chǎn)生。對于含血清培養(yǎng)液,由于血清中多種蛋白的存在,攪拌時產(chǎn)生的氣泡較多,氣泡的上升運動對細胞的損傷程度還有爭議,但氣泡的破裂對細胞有明顯的損傷作用。為降低這種損傷。無血清培養(yǎng)基適合于無血清環(huán)境的細胞培養(yǎng)。河南RPMI1640培養(yǎng)基哪個好

DMEM培養(yǎng)基提供了細胞生長所需的基本營養(yǎng)成分。內(nèi)蒙古無血清培養(yǎng)基代理商

    1)、初代培養(yǎng):繡球外植體,將葉片剪去,自來水沖洗干凈。在超凈工作臺上把已經(jīng)沖洗干凈的外植體浸入75%酒精中消毒30s,用無菌水沖洗3~4次。使用白貓漂白水和無菌水按1:4的體積比配制消毒液,將外植體放入消毒液浸泡40min,其中白貓漂白水為上海白貓(集團)有限公司生產(chǎn)的“白貓”牌家用漂白水。消毒完成,將外植體接種到誘導培養(yǎng)基中培養(yǎng),建立無菌再生系統(tǒng),誘導培養(yǎng)環(huán)境為光照強度1500lx條件下,溫度25℃,光照時間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時間8h,培養(yǎng)6~8周。其中誘導培養(yǎng)基為ms+~~,誘導培養(yǎng)基的ph值為。(2)、繼代培養(yǎng):以建立的無菌再生系統(tǒng)為對象,將無菌外植體轉接到增殖培養(yǎng)基,其中增殖培養(yǎng)基為ms+~~,培養(yǎng)環(huán)境為光照強度1500lx條件下,溫度25℃,光照時間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時間8h,培養(yǎng)8~12周。每隔8~12周轉接入新的增殖培養(yǎng)基,增殖培養(yǎng)基的ph值為。(3)、生根培養(yǎng):經(jīng)過繼代培養(yǎng)的繡球組培苗,取2~3cm的頂芽,放入生根培養(yǎng)基,其中生根培養(yǎng)基為1/2ms+~~,生根培養(yǎng)基的ph值為。誘導培養(yǎng)環(huán)境為光照強度1500lx條件下,溫度25℃,光照時間16h;黑暗條件下,溫度23℃,光照時間8h,培養(yǎng)8~12周。。內(nèi)蒙古無血清培養(yǎng)基代理商