體外培養(yǎng)時,一定的濃度范圍條件下,葡萄糖主要經(jīng)糖酵解循環(huán)轉(zhuǎn)化成乳酸來為細胞提供能量。(氨基酸)氨基酸在細胞內(nèi)的重要生理作用主要體現(xiàn)在以下幾個方面:①是蛋白質(zhì)的基本組成單位,用于合成蛋白質(zhì)和多肽;②可用于合成某些具有重要生理作用的含氮化合物,如核酸、尼克酰胺等;③某些氨基酸還具有獨特的生理作用,如甘氨酸參與生物轉(zhuǎn)化作用,丙氨酸和谷氨酰胺參與細胞內(nèi)氨的運輸?shù)?;④可轉(zhuǎn)變成糖類和脂肪,參與氧化供能。細胞所能利用的氨基酸是L型同分異構(gòu)體,D型氨基酸不能被利用。不同的細胞對氨基酸的需求各異,但有些必需氨基酸是細胞不能自身合成的,必須依靠外源的細胞培養(yǎng)液提供。其余非必需氨基酸,細胞可以自己合成,或通過轉(zhuǎn)氨作用由其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來,但是在細胞培養(yǎng)基中添加適當(dāng)濃度的非必需氨基酸可以減輕細胞在合成方面的負擔(dān),提高谷氨酰胺及其它必需氨基酸的利用率。絕大部分細胞對谷氨酰胺有較高的要求,可能因其不僅是細胞的主要氮源,且可作為細胞生長的能源物質(zhì)和嘌呤、嘧啶核苷酸的前體,另外還可直接作為細胞增殖和產(chǎn)物合成中的蛋白質(zhì)和多肽的組成成分。在缺少谷氨酰胺時,細胞會生長不良,甚至死亡。由于谷氨酰胺具有多種生理作用。RPMI1640培養(yǎng)基在免疫細胞培養(yǎng)中表現(xiàn)出色。重慶培養(yǎng)基技術(shù)指導(dǎo)
按每個2品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【原創(chuàng)】實驗室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則我正在學(xué)習(xí)這個標(biāo)準(zhǔn),對實驗室認可很重要,有興趣的一起學(xué)習(xí),同時希望得到高人指點品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【分享】微生物常識---第二講培養(yǎng)基制備技術(shù)一、玻璃器皿的清洗在制備培養(yǎng)基的過程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養(yǎng)皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據(jù)不同的情況,經(jīng)過一定的處理,洗刷干凈。有的還要進行包裝,經(jīng)過**等準(zhǔn)備就緒后,才能使用。品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【資料】培養(yǎng)基制備、消毒與**檔.doc培養(yǎng)基制備、消毒與**檔.doc品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬【求購】找培養(yǎng)基制備指南的第二部分找培養(yǎng)基制備指南的第二部分好久了,都沒找到!有的能分享不?謝謝!品牌:安捷倫型號:1260Lnifntiy參考報價:20萬-50萬IBS培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng)儀器簡介:MEDIACLAVE是一臺專門用于培養(yǎng)基制備及**的設(shè)備,它快速**,功能齊全。配合MEDIAJET組成一個的培養(yǎng)基平皿分裝系統(tǒng)MEDIAJET是一臺設(shè)計緊湊、自動化程度很高的平皿分裝器。浙江培養(yǎng)基常見問題MEM培養(yǎng)基常用于多種哺乳動物細胞的體外培養(yǎng)。
由于培養(yǎng)基的間歇**不需要專門的**設(shè)備,投資少,對設(shè)備要求簡單,對蒸汽的要求也比較低,且**效果可靠,因此,間歇**是中小型生產(chǎn)工廠經(jīng)常采用的一種培養(yǎng)基**方法。(三)、培養(yǎng)基的連續(xù)**1、定義:連續(xù)**也叫連消,將配制好的并經(jīng)預(yù)熱(60~75℃)的培養(yǎng)基用泵連續(xù)輸入由直接蒸汽加熱的加熱塔,使在短時間內(nèi)達到**溫度(126~132℃)。然后進入維持罐(或維持管),使在**溫度下維持3~7分鐘后再進入冷卻管,使其冷卻至接種溫度并直接進入已事先**(空罐**)過的發(fā)酵罐內(nèi)。其溫度一般以126~132℃為宜,總蒸汽壓力要求達到~MPa以上。培養(yǎng)基采用連續(xù)**時,需在培養(yǎng)基進入發(fā)酵罐前,直接用蒸汽進行空罐**(空消),用無菌空氣保壓,待培養(yǎng)基流入罐后,開始冷卻。**時對培養(yǎng)基的加熱可采用各種加熱器。培養(yǎng)基的冷卻方式有噴淋冷卻式、真空冷卻式、薄板換熱器式幾種方式,其過程均包括加熱、維持和冷卻階段。2、連續(xù)**的流程:(1)由熱交換器組成的**系統(tǒng)流程中采用了薄板換熱器作為培養(yǎng)液的加熱和冷卻器,蒸汽在薄板換熱器的加熱段使培養(yǎng)液的溫度升高,經(jīng)維持段保溫一定時間后,培養(yǎng)基在薄板換熱器的冷卻段進行冷卻。
無動物組分無血清細胞培養(yǎng)基的應(yīng)用三、細胞培養(yǎng)基的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢測方法澄清度水是細胞培養(yǎng)基的溶劑。細胞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分只有完全溶解于水才能被細胞吸收攝取,細胞才能生長增殖,因此細胞培養(yǎng)基是否溶解以及培養(yǎng)液是否透明澄清直接影響培養(yǎng)基使用。該項目是通過對水溶解后的細胞培養(yǎng)基的澄清度檢查,判斷細胞培養(yǎng)基的澄清度。按中華******典2005年版二部附錄ⅨB進行。pH值哺乳類動物細胞生長需要合適的酸堿度,pH過高或者過低都會導(dǎo)致細胞死亡。pH值的測定也可以檢查細胞培養(yǎng)基的批間差。清大天一標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定取規(guī)定量供試品,用注射用水(水溫20℃-30℃)溶解至1L,加入規(guī)定量碳酸氫鈉到上述溶液中,用與細胞培養(yǎng)基溶液pH值相近的兩點標(biāo)準(zhǔn)緩沖液校準(zhǔn)后的酸度計進行測定。按中華******典2005年版二部附錄ⅥH進行;加入規(guī)定量的碳酸氫鈉(見表4-12)到上述溶液中,按中華******典2005年版二部附錄ⅥH進行。干燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)細胞培養(yǎng)基具有吸濕性,在空氣中放置水分會很快升**燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示產(chǎn)品中含濕量。細胞培養(yǎng)基是有菌制劑,其豐富的營養(yǎng)成分有利于微生物生長,控制細胞培養(yǎng)基中的水分可以防止微生物的繁殖,保持細胞培養(yǎng)基的養(yǎng)分。無酚紅培養(yǎng)基適用于對酚紅敏感的實驗。
MEM低血清培養(yǎng)基的平衡鹽系統(tǒng)也不是常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng),該平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力強于常規(guī)平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力。細胞培養(yǎng)過程中pH值下降產(chǎn)生的原因有很多。在細胞生長非??鞎r,pH值通常下降得很快,此時可以通過及時傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進行解決。此外,培養(yǎng)瓶蓋擰得過緊、NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、**、酵母或***污染等也能導(dǎo)致pH值通常下降得很快。這時,可以通過以下幾種方法解決:1)增加培養(yǎng)液中NaHCO3濃度或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度。NaHCO3含量在;2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液;3)適當(dāng)松開瓶蓋。在培養(yǎng)液中加HEPES緩沖液,使終濃度為10~25mM;4)在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks’鹽配制的培養(yǎng)液;5)如果是污染造成的則丟棄培養(yǎng)物或用*****。酚紅在細胞培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑。一般情況下,可以通過酚紅的指示作用判斷培養(yǎng)基的pH值,但低血清或是無血清細胞培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通細胞培養(yǎng)基中的酚紅含量不同,不能通過肉眼觀察或通過經(jīng)驗來判定pH值,建議使用pH計進行測定。酚紅通常對含血清的細胞培養(yǎng)基生產(chǎn)的生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生明顯影響,也可通過純化技術(shù)去除。無血清培養(yǎng)基為細胞提供了無血清的純凈環(huán)境。福建Ham's F12培養(yǎng)基供應(yīng)商
F12培養(yǎng)基適用于基因編輯和轉(zhuǎn)染實驗。重慶培養(yǎng)基技術(shù)指導(dǎo)
C)大腸埃希菌++--產(chǎn)氣腸桿菌--++志賀菌屬-+--沙門菌屬-+-+表硫化氫和尿素酶試驗對腸桿菌屬的鑒別試驗傷寒沙門菌甲型副傷寒沙門菌變形桿菌志賀菌屬大腸埃希菌克雷伯菌屬硫化氫試驗-/+++++++---尿素酶試驗--+--+乳糖發(fā)酵試驗----++在培養(yǎng)基中加入指示劑或某種化學(xué)物質(zhì)**不需要的**生長,利于需要的**分離,這種培養(yǎng)基稱為選擇性培養(yǎng)基。常用的抑菌劑有膽鹽、煌綠、玫瑰紅鈉、亞硒酸鈉等。常用的指示荊有溴甲酚紫、溴麝香草酚藍等。美藍是氧化還原指示劑。例如,在培養(yǎng)基內(nèi)加入青霉素可**革蘭陽性**,而利于革蘭陰性**的生長;如果加入鏈霉素,則可獲得與加青霉素相反的選擇效果;加入制霉素可*****,有利于**的分離。又如亞**鉍瓊脂,既能**革蘭陽性**生長,又能**許多革蘭陰性**生長,但傷寒沙門菌卻能在這個培養(yǎng)基上生長出具有棕色環(huán)的菌落。SS瓊脂是臨床**檢驗中一種常用的選擇性培養(yǎng)基。大腸埃希菌在SS培養(yǎng)基上,因發(fā)酵乳糖而產(chǎn)酸,使指示劑中性紅變深,并使膽鹽沉淀,所以菌落紅色而不透明。沙門菌分解含硫氨基酸而產(chǎn)生硫化氫,硫化氫與枸櫞酸鐵形成硫化鐵,所以菌落中心呈黑色。痢疾志賀菌,既不發(fā)酵乳糖也不產(chǎn)生硫化氧。重慶培養(yǎng)基技術(shù)指導(dǎo)