山西DMEM/F12培養(yǎng)基一般多少錢

    本發(fā)明涉及植物**培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法。背景技術(shù)：繡球(hydrangeamacrophylla)為虎耳草科繡球?qū)俾淙~灌木,別名八仙花、**花、粉團(tuán)花、雪球花、草繡球等，是園林上應(yīng)用***的觀賞植物。原產(chǎn)于我國長江流域及以南，自然株高2m。葉對生，倒卵或橢圓形，邊緣有鋸齒，傘房花序頂生，直徑20cm，近球形?；ㄉ嘧?，青白色，漸轉(zhuǎn)粉紅色，再轉(zhuǎn)紫紅色，花色美艷。其花色又常隨土壤的酸堿度而改變,土壤ph值4～6時，花色多呈藍(lán)色；ph值，則呈紅色。繡球花葉片翠綠，花色鮮艷，盛開時花團(tuán)錦簇，美麗多姿，每簇花可開2個月之久，觀賞期長。由于繡球花的孕性花極為少數(shù)，所以不易結(jié)種，常用分株、壓條或扦插方法繁殖，但分株、壓條繁殖倍率低，速度慢，而扦插繁殖又會受到季節(jié)的限制，不能常年生產(chǎn)苗木，很難滿足市場的需求。技術(shù)實現(xiàn)要素：針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明的目的之一是提供一種繁殖周期短，效率高，成本低的繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法。本發(fā)明的上述發(fā)明目的是通過以下技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：一種繡球的液體培養(yǎng)基組培快繁方法，具體步驟如下：s1：外植體選擇；s2：外植體消毒；s3：誘導(dǎo)培養(yǎng)；s4：增殖培養(yǎng)；s5：生根培養(yǎng)，其中。MEM培養(yǎng)基常用于多種哺乳動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)。山西DMEM/F12培養(yǎng)基一般多少錢

    SLM）低血清培養(yǎng)基添加1％小牛血清在轉(zhuǎn)瓶中培養(yǎng)CHO細(xì)胞生產(chǎn)EOP，可提高收液次數(shù)，每次收液表達(dá)量明顯提高。概述無血清培養(yǎng)基是用來在無血清條件下生長特殊類型的細(xì)胞或進(jìn)行專門應(yīng)用的培養(yǎng)基。一般是由基礎(chǔ)培養(yǎng)基和替代血清的補充因子組成。無血清培養(yǎng)基中沒有添加血清，但含有個別蛋白或大量蛋白組分。無血清培養(yǎng)基與無蛋白培養(yǎng)基的區(qū)別在于培養(yǎng)基中沒有添加蛋白，但含有一些動物或植物來源成分，如低分子量肽的水解物。還有一種化學(xué)限定培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中不含有蛋白、水解產(chǎn)物或未知結(jié)構(gòu)的組分，所有成分均有已知的化學(xué)結(jié)構(gòu)。***：1）未知組分少；2）培養(yǎng)基中不存在血清中的抗體、補體等成分，對培養(yǎng)細(xì)胞影響小；3）雜蛋白含量少，生產(chǎn)的產(chǎn)品后期處理較容易，例如*苗生產(chǎn)由于人用*苗需要純化減少雜蛋白，純化過程中成本消耗很大，*苗的損失也很大；4）無血清培養(yǎng)既可以實現(xiàn)細(xì)胞的大規(guī)模懸浮培養(yǎng)，增加培養(yǎng)液的利用率，可以采用發(fā)酵罐培養(yǎng)減少了人力消耗。缺點：目前為止不是所有的細(xì)胞都能在無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)。無血清培養(yǎng)基的某些組分價格昂貴，導(dǎo)致無血清無法工業(yè)推廣的主要原因。新疆F12培養(yǎng)基哪家便宜MEM培養(yǎng)基在細(xì)胞培養(yǎng)中表現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性。

    本氏***葉片及根愈傷**誘導(dǎo)的對比效果圖，a：葉片愈傷**；b：葉片愈傷**誘導(dǎo)率；c：根愈傷**；d：根愈傷**誘導(dǎo)率；a和c中bar＝；圖7是cs和ms兩種培養(yǎng)基上，水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)的對比效果圖，a：水稻成熟胚愈傷**；b：水稻成熟胚愈傷**誘導(dǎo)率；a中bar＝；圖8是用不同ph的超純水(ph為)配制的cs、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基ph值穩(wěn)定性比較效果圖；圖9是在未調(diào)ph和將ph調(diào)至、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的生長狀況的比較效果圖，a：不同液體培養(yǎng)基培養(yǎng)前的無菌苗生長情況；b1、c1和d1：1/2ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b2、c2和d2：1/2cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b3、c3和d3：ms未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b4、c4和d4：cs未調(diào)ph液體培養(yǎng)基培養(yǎng)效果；b5、c5和d5：1/；b6、c6和d6：1/；b7、c7和d7：；b8、c8和d8：；a、b、c和d中bar＝；圖10是對在未調(diào)ph和將ph調(diào)至、ms、1/2cs和1/2ms液體培養(yǎng)基中馬鈴薯幼苗的莖高(a)、莖中粗(b)、根長(c)、鮮重(d)進(jìn)行統(tǒng)計的比較效果圖。具體實施方式下面結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述。實施例一，本實施例廣適性植物**培養(yǎng)基，其每1000ml培養(yǎng)基中含有：kno32662mg、。

    一）、實驗室種子培養(yǎng)基**方法1、高壓蒸汽**鍋、手提式**鍋。容量小。2、立式或臥式**鍋。容量較大，一般能裝幾十瓶或幾百瓶。3、**柜。要和蒸汽鍋爐配套，用于大量種瓶培養(yǎng)基的**，一次能裝幾百至幾千瓶(袋)。（二）、培養(yǎng)基的分批**1、定義：將配制好的培養(yǎng)基輸入發(fā)酵罐中，用蒸汽加熱，使培養(yǎng)基和設(shè)備同時**的一種**方式，又稱實罐**。2、**過程過程包括升溫、保溫和冷卻等三個階段，各階段對**的貢獻(xiàn)：20%、75%、5%。培養(yǎng)基的升溫可由兩種方式實現(xiàn)：間接加熱，在夾套或蛇管中通入蒸汽加熱；直接加熱，在培養(yǎng)基中直接通入熱蒸汽加熱。**過程中加熱和保溫階段的**作用是主要的，而冷卻階段的**作用是次要的，一般很小，可以忽略不計。此外，還應(yīng)指出的是，應(yīng)當(dāng)避免長時間的加熱階段，因為加熱時間過長，不僅破壞營養(yǎng)物質(zhì)，而且也有可能引起培養(yǎng)液中某些有害物質(zhì)的生成，從而影響培養(yǎng)過程的順利進(jìn)行。在實際生產(chǎn)中，也可能遇到所供蒸汽不足、溫度不夠高的情況，這時可以適當(dāng)延長**時間。生產(chǎn)上甚至有用100℃蒸煮而達(dá)到徹底**的實例。如要做固體曲而沒有高溫蒸汽時，可將原料用100蒸汽蒸30min，殺死其中的營養(yǎng)細(xì)胞，但孢子與**的芽孢沒有被殺死。無血清培養(yǎng)基為細(xì)胞培養(yǎng)提供了純凈的背景。

    所描述的實施例**是本申請一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本申請中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都應(yīng)當(dāng)屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實施例1一種優(yōu)化的谷氨酸發(fā)酵培養(yǎng)基，其包括發(fā)酵培養(yǎng)基a和發(fā)酵培養(yǎng)基b；所述發(fā)酵培養(yǎng)基a首先添加，然后間隔24h添加發(fā)酵培養(yǎng)基b。所述發(fā)酵培養(yǎng)基a的制備方法為：取各原料：葡萄糖80g/l，酵母浸膏20g/l，k2hpo42g/l，mgso4·7h2o50mg/l，2-羥基乙胺40mg/l，cecl310mg/l，mnso4·h2o3mg/l，feso4·7h2o3mg/l，vb110mg/l，生物素7μg/l；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基a；所述發(fā)酵培養(yǎng)基b的制備方法為：取各原料：琥珀酸5g/l，尿素2g/l，殼聚糖80mg/l；將各原料攪拌均勻后，調(diào)節(jié)ph為，121℃**15min，自然冷卻，制得發(fā)酵培養(yǎng)基b；采用常規(guī)發(fā)酵工藝：將黃色短桿菌gdk-9按8％接種量將種子液（od600nm為）接入裝有60l發(fā)酵培養(yǎng)基a的100l發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)24h，然后添加10l發(fā)酵培養(yǎng)基b，繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h，收集發(fā)酵液；整個發(fā)酵培養(yǎng)過程中，控制發(fā)酵溫度35℃，通風(fēng)比1∶，攪拌轉(zhuǎn)速300r/min，溶氧維持在**MEM高糖培養(yǎng)基能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的快速增殖。遼寧MEM培養(yǎng)基

F12培養(yǎng)基提供了豐富的營養(yǎng)成分，支持細(xì)胞的快速增殖。山西DMEM/F12培養(yǎng)基一般多少錢

    擬南芥根愈傷**誘導(dǎo)時，培養(yǎng)6-9d在切口處開始出現(xiàn)少量顆粒狀愈傷**，培養(yǎng)20-22d獲得淡黃色松脆型愈傷**，在愈傷**周圍觀察到大量致密分布的白毛，顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100％。如圖5所示。培養(yǎng)實例5和對比培養(yǎng)例5的誘導(dǎo)結(jié)果比較：用上述方法進(jìn)行哥倫比亞擬南芥葉片和根愈傷**誘導(dǎo)時，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基的顆粒狀愈傷**誘導(dǎo)率及愈傷**總誘導(dǎo)率均為100％，但cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基的愈傷**出愈時間比ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基提前至少1d；在相同培養(yǎng)條件下，與ms誘導(dǎo)培養(yǎng)基相比，經(jīng)cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)的葉片團(tuán)塊狀愈傷**更大、誘導(dǎo)的根愈傷**更多。如圖5所示。培養(yǎng)實例6：本氏***葉片及根愈傷**誘導(dǎo)培養(yǎng)實例6與培養(yǎng)實例5不同的地方在于，步驟(1)將；步驟(2)將2,；步驟(3)所取葉片為本氏***無菌苗葉片，用手術(shù)剪刀將無菌葉片剪成，用鑷子將其平鋪于誘導(dǎo)培養(yǎng)基；步驟(4)所取根為本氏***無菌苗的根，cs誘導(dǎo)培養(yǎng)基的誘導(dǎo)結(jié)果為：本氏***葉片愈傷**誘導(dǎo)時，培養(yǎng)15-18d的葉片明顯增大增厚，葉片四周產(chǎn)生大量的淡綠色致密的愈傷**，愈傷**誘導(dǎo)率為100％，且在愈傷**團(tuán)塊上已開始產(chǎn)生多個嫩綠色的不定芽；本氏***根愈傷**誘導(dǎo)時，培養(yǎng)9-11d在切口處產(chǎn)生大量淡黃色致密的愈傷**。山西DMEM/F12培養(yǎng)基一般多少錢