從而使培養(yǎng)基的預(yù)熱、加熱**及冷卻過(guò)程可在同一設(shè)備內(nèi)完成。該流程的加熱和冷卻時(shí)間比噴射加熱連續(xù)**流程要長(zhǎng)些,但由于在培養(yǎng)基的預(yù)熱過(guò)程同時(shí)也起到了**后培養(yǎng)基的冷卻,因而節(jié)約了蒸汽和冷卻水的用量。(2)蒸汽直接噴射型的連續(xù)**系統(tǒng)流程中采用了蒸汽噴射器,它使培養(yǎng)液與高溫蒸汽直接接觸,從而在短時(shí)間內(nèi)可將培養(yǎng)液急速升溫至預(yù)定的**溫度然后在該溫度下維持一段時(shí)間**,**后的培養(yǎng)基通過(guò)一膨脹閥進(jìn)入真空冷卻器急速冷卻,從圖中可以看出,由于該流程中培養(yǎng)基受熱時(shí)間短,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失也就不很嚴(yán)重,同時(shí)該流程保證了培養(yǎng)基物料**先出,避免了過(guò)熱或**不徹底等現(xiàn)象。(3)由連消塔、維持罐和噴淋冷卻組成的**系統(tǒng)連續(xù)**的基本設(shè)備一般包括:①配料預(yù)熱罐,將配制好的料液預(yù)熱到60-70℃,以避免連續(xù)**時(shí)由于料液與蒸汽溫度過(guò)大而產(chǎn)生水汽撞擊聲;②連消塔,連消塔的作用主要是使高溫蒸汽與料液迅速接觸混和,并使料液的溫度很快升高到**溫度(126-132)℃;③維持罐,連消塔加熱的時(shí)間很短,光靠這段時(shí)間的**是不夠的,維持罐的作用是使料液在**溫度下保持5-7min,以達(dá)到**的目的;④冷卻管,從維持罐出來(lái)的料液要經(jīng)過(guò)冷卻排管進(jìn)行冷卻。MEM培養(yǎng)基在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出高效的穩(wěn)定性。F12培養(yǎng)基哪家便宜
MEM低血清培養(yǎng)基的平衡鹽系統(tǒng)也不是常規(guī)的平衡鹽系統(tǒng),該平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力強(qiáng)于常規(guī)平衡鹽系統(tǒng)的緩沖能力。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中pH值下降產(chǎn)生的原因有很多。在細(xì)胞生長(zhǎng)非??鞎r(shí),pH值通常下降得很快,此時(shí)可以通過(guò)及時(shí)傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進(jìn)行解決。此外,培養(yǎng)瓶蓋擰得過(guò)緊、NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、**、酵母或***污染等也能導(dǎo)致pH值通常下降得很快。這時(shí),可以通過(guò)以下幾種方法解決:1)增加培養(yǎng)液中NaHCO3濃度或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度。NaHCO3含量在;2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液;3)適當(dāng)松開(kāi)瓶蓋。在培養(yǎng)液中加HEPES緩沖液,使終濃度為10~25mM;4)在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle’s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks’鹽配制的培養(yǎng)液;5)如果是污染造成的則丟棄培養(yǎng)物或用*****。酚紅在細(xì)胞培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑。一般情況下,可以通過(guò)酚紅的指示作用判斷培養(yǎng)基的pH值,但低血清或是無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅含量不同,不能通過(guò)肉眼觀察或通過(guò)經(jīng)驗(yàn)來(lái)判定pH值,建議使用pH計(jì)進(jìn)行測(cè)定。酚紅通常對(duì)含血清的細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)的生物制品質(zhì)量并不會(huì)產(chǎn)生明顯影響,也可通過(guò)純化技術(shù)去除。河北基礎(chǔ)培養(yǎng)基有哪些無(wú)血清培養(yǎng)基確保了細(xì)胞的純凈生長(zhǎng)環(huán)境。
第三節(jié)培養(yǎng)基的高壓**及效果驗(yàn)證消毒**在醫(yī)學(xué)實(shí)踐上有著重要意義。它可切斷傳播途徑、控制***擴(kuò)散造成的危害;也可殺滅物品或器皿上的**,防止醫(yī)院***;在醫(yī)學(xué)微生物檢驗(yàn)的領(lǐng)域中,消毒**是保正***的病原學(xué)檢驗(yàn)不受外來(lái)微生物污染的前提。(一)術(shù)語(yǔ)消毒(disinfection)、火菌(sterilization)、抑菌(bacteriostasis)、防腐(antisepsis)和無(wú)菌(asepsis)是常用術(shù)語(yǔ)。下面就術(shù)語(yǔ)概念加以敘述。(1)**。是用適當(dāng)?shù)奈锢砘蚧瘜W(xué)手段將物品中活的微生物殺滅或除去的方法。本法適用于制劑、原料、輔料及醫(yī)療器械等物品的**。(如外科器械、注射器、基礎(chǔ)培養(yǎng)基**等。)(2)消毒。是破壞物體上活的病原微生物的方法,但不包括**芽胞和非病原微生物。如用酒精溶液浸泡體溫計(jì)、新潔爾滅液擦拭檢查臺(tái)等。用于消毒的化學(xué)物品稱消毒劑(dis-infectant)。一般而言,消毒對(duì)象是指物體而不是機(jī)體。(3)防腐。直接使用防腐劑(antiseptics)破壞或**活的病原微牛物的方法。如外科手術(shù)前碘液擦洗皮膚、雙氧水清創(chuàng)傷口或**肥皂清冼雙手等。(4)無(wú)菌。防止***病原體進(jìn)入****或物品的操作技術(shù)稱無(wú)菌操作。無(wú)菌即為不存在活的微生物。用于消毒**的物理方法有熱力、電離輻射、超聲波、過(guò)濾等。
可通過(guò)在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加一些保護(hù)劑,降低細(xì)胞-氣體和細(xì)胞-液體的表面張力,減少氣泡的形成。4.細(xì)胞培養(yǎng)基的**及儲(chǔ)存**方式及注意事項(xiàng)細(xì)胞培養(yǎng)基**的方式分為高壓**和膜過(guò)濾**,不同的培養(yǎng)基由于其營(yíng)養(yǎng)成份不同,**方式也可能不同。①高壓**某些培養(yǎng)基(如MEM)可進(jìn)行高壓**,這類培養(yǎng)基一般不含有L-谷氨酰胺和碳酸氫鈉,一般是在培養(yǎng)基高壓**后才加入。另外可用耐高壓的谷氨酸鹽(如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)代替L-谷氨酰胺。可高壓**的培養(yǎng)基在121℃、15psi,15分鐘的條件下完全可達(dá)到**效果及營(yíng)養(yǎng)成分的**小損失,不需將**時(shí)間延長(zhǎng)。絕大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)基不適宜高壓**。因培養(yǎng)液中常含有維生素、蛋白質(zhì)、多肽、生長(zhǎng)因子等物質(zhì),這些物質(zhì)在高溫或射線照射下易發(fā)生變性或失去功能,因而上述液體多采用過(guò)濾消毒以除去**??晒┻^(guò)濾**使用的濾膜很多,其材料多為polyethersulphone(PES)、尼龍、多聚碳酸鹽、醋酸纖維素、硝酸纖維素、PTFE、陶瓷等。膜過(guò)濾**是當(dāng)前較為常用及便捷的一種方法,常采用μm孔徑的濾膜,部份采用μm孔徑。與高壓過(guò)濾方式相比,濾膜具有使用期限且價(jià)格較高,但對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成份破壞性較小。通常液體細(xì)胞培養(yǎng)基避免-20℃凍存。F12培養(yǎng)基適用于基因編輯和轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。
培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基使用說(shuō)明中有加熱溶解后高壓**,有的加熱沸騰后高壓**,見(jiàn)過(guò)一些實(shí)驗(yàn)室,不經(jīng)加熱直接高壓**,也有的實(shí)驗(yàn)室一律加熱沸騰后高壓**。大家是怎們制備的,不加熱或全部沸騰對(duì)檢測(cè)結(jié)果有沒(méi)有影響?品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬(wàn)-50萬(wàn)培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基制備后應(yīng)保持一定的透明度,下面制備操作影響比較大的是(??)。A、原料稱量混合溶解B、加熱煮沸,調(diào)PH值C、過(guò)濾、分裝容器D、消毒或**品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬(wàn)-50萬(wàn)【求助】培養(yǎng)基制備請(qǐng)問(wèn)牛肉膏與牛肉膏粉的使用有何區(qū)別?可互相替代嗎?使用比例相同嗎?品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬(wàn)-50萬(wàn)培養(yǎng)基的制備方法培養(yǎng)基的制備方法以下為常規(guī)方法,如配方中有特殊規(guī)定或要求,以配方為***依據(jù)。1.根據(jù)配方,計(jì)算各種營(yíng)養(yǎng)成分用量。一般*品可用普通*物天平稱量,用量少的*品,可按比例配成高濃度溶液,再按所需量用移液管吸取。稱好的*品放入品牌:安捷倫型號(hào):1260Lnifntiy參考報(bào)價(jià):20萬(wàn)-50萬(wàn)【求助】培養(yǎng)基制備系統(tǒng)哪位大蝦有關(guān)于培養(yǎng)基制備系統(tǒng)相關(guān)的資料,原理、應(yīng)用、品牌、技術(shù)對(duì)比等越詳細(xì)越好。使用減血清培養(yǎng)基能減少實(shí)驗(yàn)中的血清干擾。吉林培養(yǎng)基進(jìn)口
DMEM培養(yǎng)基適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)研究。F12培養(yǎng)基哪家便宜
K+主要分布在細(xì)胞內(nèi)液,細(xì)胞內(nèi)K+對(duì)于***某些酶是必需的,并在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+在細(xì)胞外液中的作用是將**內(nèi)部細(xì)胞之間相互粘著,在細(xì)胞內(nèi)參與許多重要的細(xì)胞生理活動(dòng),如傳導(dǎo)、參與肌肉細(xì)胞收縮等。在懸浮培養(yǎng)時(shí),為了減少細(xì)胞的聚集和附著,要減少Ca2+的濃度。Mg2+是構(gòu)成細(xì)胞間質(zhì)的重要成分,對(duì)于細(xì)胞間相互穩(wěn)定結(jié)合有很重要的意義。磷的化合物對(duì)細(xì)胞物質(zhì)代謝和生理功能調(diào)控有重要作用。其他成分:肽、核苷、嘌呤等??蓭椭?xì)胞的克隆化培養(yǎng)及維持某些特殊細(xì)胞系的生長(zhǎng)。分類低血清細(xì)胞培養(yǎng)基概述營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基是維持細(xì)胞活性及高密度生長(zhǎng)的基礎(chǔ),營(yíng)養(yǎng)缺乏容易引起細(xì)胞凋亡,新生牛血清中所含大部分營(yíng)養(yǎng)成分可以通過(guò)化學(xué)成分明確的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如氨基酸維生素等成分組合取代。低血清培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分大優(yōu)于基礎(chǔ)培養(yǎng)基,*需添加1%~5%新生牛血清,而對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、形態(tài)、活性和功能沒(méi)有影響甚至有所改善。在國(guó)外低血清培養(yǎng)基早已有之,如Gibco等。但是他們的低血清培養(yǎng)基是在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中選擇性的加入重組胰島素(recombinantinsulin)、人源轉(zhuǎn)鐵蛋白(human(holo)tran-sferrin)以及牛血清白蛋白等,有些還包含一些生長(zhǎng)因子。F12培養(yǎng)基哪家便宜