避免其對(duì)探測(cè)結(jié)果的影響。激光器前也放置一個(gè)小孔光闌以盡量縮小聚焦點(diǎn)處光斑半徑,使之能夠只照射在單個(gè)探針上。通過(guò)計(jì)算機(jī)控制激光束或樣品池的移動(dòng),便可實(shí)現(xiàn)對(duì)芯片的二維掃描,移動(dòng)步長(zhǎng)與芯片上寡核苷酸的間距匹配,在幾分鐘至幾十分鐘內(nèi)即可獲得熒光標(biāo)記雜交信號(hào)圖譜。其特點(diǎn)是靈敏度和分辨率較高,掃描時(shí)間長(zhǎng),比較適合研究用?,F(xiàn)在Affymetrix公司已推出商業(yè)化樣機(jī),整套系統(tǒng)約12萬(wàn)美元。基因芯片采用了CCD相機(jī)的熒光顯微鏡這種探測(cè)裝置與以上的掃描方法都是基于熒光顯微鏡,但是以CCD相機(jī)作為信號(hào)接收器而不是光電倍增管,因而無(wú)須掃描傳動(dòng)平臺(tái)。由于不是逐點(diǎn)激發(fā)探測(cè),因而激發(fā)光照射光場(chǎng)為整個(gè)芯片區(qū)域,由CCD相機(jī)獲得整個(gè)DNA芯片的雜交譜型。這種方法一般不采用激光器作為激發(fā)光源,由于激光束光強(qiáng)的高斯分布,會(huì)使得光場(chǎng)光強(qiáng)度分布不均,而熒光信號(hào)的強(qiáng)度與激發(fā)光的強(qiáng)度密切相關(guān),因而不利于信號(hào)采集的線性響應(yīng)。為保證激發(fā)光勻場(chǎng)照射,有的學(xué)者使用高壓汞燈經(jīng)濾波片濾波,通過(guò)傳統(tǒng)的光學(xué)物鏡將激發(fā)光投射到芯片上,照明面積可通過(guò)更換物鏡來(lái)調(diào)整;也有的研究者使用大功率弧形探照燈作為光源,使用光纖維束與透鏡結(jié)合傳輸激發(fā)光,并與芯片表面呈50o角入射。泰克光電的芯片測(cè)試儀,讓您的芯片生產(chǎn)更加智能、高效、 精確、可靠、安全、穩(wěn)定、便捷。武漢電性測(cè)試儀行價(jià)
如果用實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)可省去此步[9])這時(shí),用落射熒光顯微鏡或其它熒光顯微裝置對(duì)片基進(jìn)行掃描,采集每點(diǎn)熒光強(qiáng)度并對(duì)其進(jìn)行分析比較。前已述及,由于正常的Watson-Crick配對(duì)雙鏈要比具有錯(cuò)配堿基的雙鏈分子具有較高的熱力學(xué)穩(wěn)定性。所以,如果探針與樣品分子在不位點(diǎn)配對(duì)有差異則該位點(diǎn)熒光強(qiáng)度就會(huì)有所不同,而且熒光信號(hào)的強(qiáng)度還與樣品中靶分子的含量呈一定的線性關(guān)系。當(dāng)然,由于檢測(cè)原理及目的不同,樣品及數(shù)據(jù)的處理也自然有所不同,甚至由于每種方法的優(yōu)缺點(diǎn)各異以至于分析結(jié)果不盡一致?;蛐酒静襟E生物芯片是將生命科學(xué)研究中所涉及的不連續(xù)的分析過(guò)程(如樣品制備、化學(xué)反應(yīng)和分析檢測(cè)),利用微電子、微機(jī)械、化學(xué)、物理技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)在固體芯片表面構(gòu)建的微流體分析單元和系統(tǒng),使之連續(xù)化、集成化、微型化。生物芯片技術(shù)主要包括四個(gè)基本要點(diǎn):芯片方陣的構(gòu)建、樣品的制備、生物分子反應(yīng)和信號(hào)的檢測(cè)。1、芯片制備,先將玻璃片或硅片進(jìn)行表面處理,然后使DNA片段或蛋白質(zhì)分子按順序排列在芯片上。2、樣品制備,生物樣品往往是非常復(fù)雜的生物分子混合體,除少數(shù)特殊樣品外,一般不能直接與芯片反應(yīng)??蓪悠愤M(jìn)行生物處理,獲取其中的蛋白質(zhì)或DNA、RNA。廈門(mén)光電測(cè)試儀泰克光電的芯片測(cè)試儀,讓您的芯片生產(chǎn)更加智能、便捷、高效、穩(wěn)定、可靠、安全、成功。
生產(chǎn)的成本越低,但對(duì)工藝就要求的越高。晶圓涂膜晶圓涂膜能抵抗氧化以及耐溫能力,其材料為光阻的一種。晶圓光刻顯影、蝕刻光刻工藝的基本流程如圖1[2]所示。首先是在晶圓(或襯底)表面涂上一層光刻膠并烘干。烘干后的晶圓被傳送到光刻機(jī)里面。光線透過(guò)一個(gè)掩模把掩模上的圖形投影在晶圓表面的光刻膠上,實(shí)現(xiàn)曝光,激發(fā)光化學(xué)反應(yīng)。對(duì)曝光后的晶圓進(jìn)行第二次烘烤,即所謂的曝光后烘烤,后烘烤是的光化學(xué)反應(yīng)更充分。后,把顯影液噴灑到晶圓表面的光刻膠上,對(duì)曝光圖形顯影。顯影后,掩模上的圖形就被存留在了光刻膠上。涂膠、烘烤和顯影都是在勻膠顯影機(jī)中完成的,曝光是在光刻機(jī)中完成的。勻膠顯影機(jī)和光刻機(jī)一般都是聯(lián)機(jī)作業(yè)的,晶圓通過(guò)機(jī)械手在各單元和機(jī)器之間傳送。整個(gè)曝光顯影系統(tǒng)是封閉的,晶圓不直接暴露在周?chē)h(huán)境中,以減少環(huán)境中有害成分對(duì)光刻膠和光化學(xué)反應(yīng)的影響[2]。圖1現(xiàn)代光刻工藝的基本流程和光刻后的檢測(cè)步驟該過(guò)程使用了對(duì)紫外光敏感的化學(xué)物質(zhì),即遇紫外光則變軟。通過(guò)控制遮光物的位置可以得到芯片的外形。在硅晶片涂上光致抗蝕劑,使得其遇紫外光就會(huì)溶解。這時(shí)可以用上份遮光物,使得紫外光直射的部分被溶解,這溶解部分接著可用溶劑將其沖走。
而Affymetrix公司則已成功地應(yīng)用了光導(dǎo)向平板印刷技術(shù)直接在硅片上合成寡核苷酸點(diǎn)陣的高密度芯片而于芯片分析領(lǐng)域。該公司與惠普公司合作開(kāi)發(fā)出的能掃描40萬(wàn)點(diǎn)點(diǎn)陣的基因芯片掃描儀,同時(shí)又開(kāi)發(fā)出同時(shí)可平行通過(guò)幾塊芯片的流路工作站和計(jì)算機(jī)軟件分析系統(tǒng)。深圳市泰克光電科技有限公司成立于2012年,專業(yè)從事半導(dǎo)體自動(dòng)化、半導(dǎo)體及LED檢測(cè)儀器、半導(dǎo)體芯片點(diǎn)測(cè)機(jī)、LED封測(cè)設(shè)備的研發(fā)與生產(chǎn)。經(jīng)過(guò)多年的發(fā)展,公司目前已經(jīng)是一家集設(shè)計(jì)、研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、服務(wù)為一體的。工廠座落在深圳市的創(chuàng)業(yè)之都寶安區(qū),面積超過(guò)2000多平方米。組合成一套較完整的芯片制造、雜交、檢測(cè)掃描和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。不久GenralScanningInc與制造點(diǎn)樣頭的Telechem公司和制造機(jī)械手的Cartesian公司研制的300型(兩激光)4000型和5000型(四激光)激光共聚掃描儀和相應(yīng)的分析軟件,構(gòu)成一套用戶可任意點(diǎn)樣制作芯片的工作系統(tǒng)。歐洲各公司也不甘落后,紛紛投入競(jìng)爭(zhēng),例如GeneticCo.UK研制出QBot點(diǎn)樣器,Q-Pix克隆挑揀儀及Q-Fill制芯片設(shè)備。Sequenom則推出250位點(diǎn)的Spectrochip并采用質(zhì)譜法測(cè)讀結(jié)果,而德國(guó)研究所則用就位合成的肽核酸低密度。泰克光電的芯片測(cè)試儀,為您的芯片生產(chǎn)提供 的測(cè)試保障和技術(shù)支持。
但目前尚未取得實(shí)際應(yīng)用。探針的合成與固定比較復(fù)雜,特別是對(duì)于制作高密度的探針陣列。使用光導(dǎo)聚合技術(shù)每步產(chǎn)率不高(95%),難于保證好的聚合效果。應(yīng)運(yùn)而生的其它很多方法,如壓電打壓、微量噴涂等多項(xiàng)技術(shù),雖然技術(shù)難度較低方法也比較靈活,但存在的問(wèn)題是難以形成高密度的探針陣列,所以只能在較小規(guī)模上使用。近我國(guó)學(xué)者已成功地將分子印章技術(shù)應(yīng)用于探針的原位合成而且取得了比較滿意的結(jié)果(個(gè)人通訊)。目標(biāo)分子的標(biāo)記也是一個(gè)重要的限速步驟,如何簡(jiǎn)化或繞過(guò)這一步現(xiàn)在仍然是個(gè)問(wèn)題。目標(biāo)分子與探針的雜交會(huì)出現(xiàn)一些問(wèn)題:首先,由于雜交位于固相表面,所以有一定程度的空間阻礙作用,有必要設(shè)法減小這種不利因素的影響。Southern曾通過(guò)向探針中引入間隔分子而使雜交效率提高于了150倍。其次。深圳市泰克光電科技有限公司成立于2012年,專業(yè)從事半導(dǎo)體自動(dòng)化、半導(dǎo)體及LED檢測(cè)儀器、半導(dǎo)體芯片點(diǎn)測(cè)機(jī)、LED封測(cè)設(shè)備的研發(fā)與生產(chǎn)。經(jīng)過(guò)多年的發(fā)展,公司目前已經(jīng)是一家集設(shè)計(jì)、研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、服務(wù)為一體的。工廠座落在深圳市的創(chuàng)業(yè)之都寶安區(qū),面積超過(guò)2000多平方米。探針?lè)肿拥腉C含量、長(zhǎng)度以及濃度等都會(huì)對(duì)雜交產(chǎn)生一定的影響,因此需要分別進(jìn)行分析和研究。選擇泰克光電的芯片測(cè)試儀,讓您的芯片生產(chǎn)更加安全、穩(wěn)定、可靠、高效、 精確。成都高壓測(cè)試儀參考價(jià)
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基因芯片激光掃描共焦顯微鏡激光掃描共焦顯微鏡與激光掃描熒光顯微鏡結(jié)構(gòu)非常相似,但是由于采用了共焦技術(shù)因而更具優(yōu)越性。這種方法可以在熒光標(biāo)記分子與DNA芯片雜交的同時(shí)進(jìn)行雜交信號(hào)的探測(cè),而無(wú)須清洗掉未雜交分子,從而簡(jiǎn)化了操作步驟提高了工作效率。Affymetrix公司的S.P.A.Forder等人設(shè)計(jì)的DNA芯片即利用此方法。其方法是將靶DNA分子溶液放在樣品地中,芯片上合成寡核苷酸陣列的一面向下,與樣品池溶液直接接觸,并與DNA樣品雜交。當(dāng)用激發(fā)光照射使熒光標(biāo)記物產(chǎn)生熒光時(shí),既有芯片上雜交的DNA樣品所發(fā)出的熒光,也有樣品地中DNA所發(fā)出的熒光,如何將兩者分離開(kāi)來(lái)是一個(gè)非常重要的問(wèn)題。而共焦顯微鏡具有非常好的縱向分辨率,可以在接受芯片表面熒光信號(hào)的同時(shí),避開(kāi)樣品池中熒光信號(hào)的影響。一般采用氬離子激光器(488nm)作為激發(fā)光源,經(jīng)物鏡聚焦,從芯片背面入射,聚集于芯片與靶分子溶液接觸面。雜交分子所發(fā)的熒光再經(jīng)同一物鏡收集,并經(jīng)濾波片濾波,被冷卻的光電倍增管在光子計(jì)數(shù)的模式下接收。經(jīng)模數(shù)轉(zhuǎn)換反轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號(hào)送微機(jī)處理,成像分析。在光電信增管前放置一共焦小孔,用于阻擋大部分激發(fā)光焦平面以外的來(lái)自樣品池的未雜交分子熒光信號(hào)。武漢電性測(cè)試儀行價(jià)