酵母雜交試驗(yàn):隨著分子生物學(xué)研究進(jìn)入以蛋白質(zhì)組學(xué)為標(biāo)志的后基因組時(shí)代，蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用、蛋白質(zhì)-DNA相互作用已成為互作組學(xué)研究的熱門主題。人類基因粗略約編碼2萬種蛋白，只算一對一的相互作用種類也有12萬到100萬種。而加上動(dòng)態(tài)變化，每個(gè)物種、個(gè)體、細(xì)胞中都存在著一張張不同的互作網(wǎng)絡(luò)圖，這一張張圖譜中，蘊(yùn)藏著各種生命的奧秘。有兩種通用的相互作用組圖譜繪制方式：第一種酵母雜交試驗(yàn)，通過偶聯(lián)基因表達(dá)體現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)發(fā)生直接相互作用的蛋白對。第二種是通過抗體/標(biāo)簽分離純化復(fù)合體，然后用質(zhì)譜鑒定復(fù)合體內(nèi)部組分，識別直接相互作用或間接相互作用的蛋白質(zhì)。兩種高通量方法彼此互補(bǔ)，相互驗(yàn)證。酵母文庫文庫構(gòu)建篩選歐易生物。云南篩庫酵母文庫做什么
酵母雙雜交、pulldown和BiFC實(shí)驗(yàn)均顯示，MdTRB1可以通過其C末端與JAZ1蛋白互作。在蘋果葉片和愈傷組織中過表達(dá)MdJAZ1，花青素和原花青素的累積受到明顯抑制。在蘋果葉片和愈傷組織***表達(dá)MdJAZ1/MdJAZ1，結(jié)果顯示過表達(dá)MdJAZ1抑制了MdTRB1對花青素和原花青素累積的促進(jìn)作用。Pull down 實(shí)驗(yàn)和熒光素酶互補(bǔ)成像實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在 MdJAZ1 存在下，MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合減弱（圖 a-c）；外源施加 JA 可以部分恢復(fù) MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合。對于 MdTRB1 在 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素積累中的作用機(jī)制，本研究建立了一個(gè)新的模型：MdTRB1 通過與 MdMYB9 互作，增強(qiáng)了 MdMYB9 對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性，進(jìn)而正向調(diào)節(jié)了 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素累積。在 JA 缺乏的條件下，MdJAZ1 與 MdTRB1 互作，干擾了 MdTRB1 與 MdMYB9 之間的結(jié)合；在 JA 存在的條件下，MdJAZ1 被降解，MdTRB1 被釋放出來以參與后續(xù)過程。貴州實(shí)力酵母文庫酵母三雜交酵母文庫數(shù)據(jù)庫。
進(jìn)行了酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示 MdMPK3 可以與 MdWRKY17 相互作用（圖 C），并且通過 BiFC、Co-IP 得以證實(shí)（圖 D-E）。MdMPK3 的激酶活性水平在炭疽菌***后也***上升（圖 B）。進(jìn)一步的 BiFC 和 Co-IP 表明，MdMEK4 可以與 MdMPK3 相互作用（圖 F-G）。體外激酶試驗(yàn)表明，MdWRKY17 能夠被MdMEK4- MdMPK3 級聯(lián)磷酸化（圖 H）。綜上，MdMEK4-MdMPK3 級聯(lián)磷酸化 MdWRKY17。與對照相比，MdWRKY17過表達(dá)植株中水楊酸含量降低，而RNAiMdWRKY17植株中水楊酸含量升高（圖A）。
酵母單雜交篩選技術(shù):關(guān)于HIV想必大家都不陌生，***HIV病毒后潛伏周期長，且目前沒有完全的***方法。為了徹底***HIV，不讓其發(fā)病就要從2方面入手：要么消除潛伏***的細(xì)胞，要么防止?jié)摲《镜募?xì)胞被***。也就是需要抑制HIV病毒的轉(zhuǎn)錄。但是關(guān)于HIV在人細(xì)胞中的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和潛伏期調(diào)控的分子網(wǎng)絡(luò)仍不完全確定，所以目前HIV仍不能被**。為了幫助解決這個(gè)問題，波士頓大學(xué)的研究者，使用酵母單雜交篩選技術(shù)，以HIV-1,HIV-2的LTR（啟動(dòng)子和增強(qiáng)子）為誘餌，篩選了人的轉(zhuǎn)錄因子文庫（包含1086個(gè)人的轉(zhuǎn)錄因子），**終繪制了調(diào)節(jié)HIV-1和HIV-2的轉(zhuǎn)錄網(wǎng)絡(luò)圖譜，結(jié)果發(fā)表在2021年的PNAS雜志上。專業(yè)化的篩庫流程，多重質(zhì)檢保證質(zhì)量。初篩+復(fù)篩提高目標(biāo)陽性克隆質(zhì)粒精確度。
酵母雙雜交文庫：本研究通過7個(gè)樹齡的油松樣品轉(zhuǎn)錄組測序，鑒定到一個(gè)與年齡信號***相關(guān)的基因模塊，該模塊包含33個(gè)轉(zhuǎn)錄因子，包括SOC1-like、DAL1等。油松和晚坐果白皮松突變體中的基因表達(dá)模式分析顯示，PtMADS11與生殖能力之間存在緊密相關(guān)性。酵母雙雜交顯示，MADS11和DAL1直接相關(guān)作用以參與對年齡信號的調(diào)控。過表達(dá)PtMADS11、PDAL1可以部分挽救擬南芥中miR156過表達(dá)或spl突變導(dǎo)致的開花延遲缺陷。只有PtMADS11可以挽救ft突變體中的開花缺陷，表明它與PtDAL1在擬南芥開花調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮了不同的作用。2酵母展示質(zhì)量技術(shù)酵母展示技術(shù),共收錄30多個(gè)行業(yè),涵蓋多行業(yè)資料一鍵下載。貴州篩庫酵母文庫做什么
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酵母文庫實(shí)驗(yàn):MAPK級聯(lián)***是植物防御病原體入侵信號傳導(dǎo)過程中的關(guān)鍵事件，MAPKs靶向并磷酸化調(diào)節(jié)下游基因轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子，**終響應(yīng)病原菌的侵入。WRKYs轉(zhuǎn)錄因子是MAPK級聯(lián)的重要目標(biāo)，在植物對各種病原體的抗性中起著關(guān)鍵作用。蘋果如何響應(yīng)炭疽菌入侵，將信號傳導(dǎo)到細(xì)胞內(nèi)，以及哪個(gè)轉(zhuǎn)錄因子負(fù)責(zé)協(xié)調(diào)促進(jìn)GLS耐受均尚不清楚。本研究在蘋果炭疽葉枯病易感品種“嘎拉”中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)由蘋果炭疽菌******誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子MdWRKY17。在6個(gè)易感蘋果種質(zhì)中，MdWRKY17表達(dá)水平***高于6個(gè)耐受蘋果種質(zhì)，同時(shí)對應(yīng)的水楊酸含量降低，證實(shí)了MdWRKY17介導(dǎo)的水楊酸降解在GLS耐受中的關(guān)鍵作用。云南篩庫酵母文庫做什么
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