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文章中酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)由歐易生物完成。2021 年 3 月,揚(yáng)州大學(xué)陳忱教授為通訊作者,在 The Plant Journal 雜志(IF: 6.141)在線發(fā)表了題為“The rice LEC1-like transcription factor OsNF-YB9 interacts with SPK, an endosperm specific sucrose synthase protein kinase, and functions in seed development”的研究論文,報(bào)道了 OsNF-YB9 在調(diào)控水稻種子發(fā)育中的作用機(jī)制。NF-Y轉(zhuǎn)錄因子家族成員LEC1在擬南芥胚胎發(fā)生和種子發(fā)育中發(fā)揮了重要作用。水稻中的OsNF-YB9和OsNF-YB7是擬南芥LEC1的同源基因。這些LEC1同源基因在水稻中的作用尚未經(jīng)報(bào)道。酵母雙雜交技術(shù)服務(wù)酵母雙雜交文庫(kù)構(gòu)建。山東發(fā)展酵母文庫(kù)
酵母雙雜交、pulldown和BiFC實(shí)驗(yàn)均顯示,MdTRB1可以通過(guò)其C末端與JAZ1蛋白互作。在蘋果葉片和愈傷組織中過(guò)表達(dá)MdJAZ1,花青素和原花青素的累積受到明顯抑制。在蘋果葉片和愈傷組織***表達(dá)MdJAZ1/MdJAZ1,結(jié)果顯示過(guò)表達(dá)MdJAZ1抑制了MdTRB1對(duì)花青素和原花青素累積的促進(jìn)作用。Pull down 實(shí)驗(yàn)和熒光素酶互補(bǔ)成像實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在 MdJAZ1 存在下,MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合減弱(圖 a-c);外源施加 JA 可以部分恢復(fù) MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合。對(duì)于 MdTRB1 在 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素積累中的作用機(jī)制,本研究建立了一個(gè)新的模型:MdTRB1 通過(guò)與 MdMYB9 互作,增強(qiáng)了 MdMYB9 對(duì)下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性,進(jìn)而正向調(diào)節(jié)了 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素累積。在 JA 缺乏的條件下,MdJAZ1 與 MdTRB1 互作,干擾了 MdTRB1 與 MdMYB9 之間的結(jié)合;在 JA 存在的條件下,MdJAZ1 被降解,MdTRB1 被釋放出來(lái)以參與后續(xù)過(guò)程。江西運(yùn)用酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)眾所周知,酵母雜交技術(shù)存在一定的假陽(yáng)性。
酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn):本研究發(fā)現(xiàn)了一個(gè)硝酸鹽響應(yīng)的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2,它參與調(diào)節(jié)硝酸鹽介導(dǎo)的蘋果植株生長(zhǎng)。利用酵母雙雜交、蛋白質(zhì) pull-down、BiFC 實(shí)驗(yàn)證實(shí),MdBT2 可以與一個(gè) DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作,這種互作是 MdRGL3a 蛋白經(jīng)由 26S 蛋白酶體途徑的泛素化及降解所必需的。此外,異源表達(dá) MdBT2 部分回復(fù)了 MdRGL3a 過(guò)表達(dá)所導(dǎo)致的擬南芥生長(zhǎng)抑制。綜上表明,MdBT2 可以通過(guò)降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的豐度促進(jìn)硝酸鹽介導(dǎo)的植物生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)顯示,培養(yǎng) 45 天,蘋果幼苗的高度和生物量隨硝酸鹽濃度的增加而增加(圖 A-C)。
酵母雙雜交技術(shù),自創(chuàng)建以來(lái)被廣泛應(yīng)用于蛋白互作研究領(lǐng)域,在生命科學(xué)的基礎(chǔ)探秘研究中起著重要作用。然而該技術(shù)設(shè)計(jì)初衷,*是斯坦利先生為了完成申請(qǐng)學(xué)校經(jīng)費(fèi)的目的。該技術(shù)設(shè)計(jì)巧妙,它的許多優(yōu)點(diǎn)在設(shè)計(jì)之初并未顯現(xiàn),反而在這么多年的高頻使用和進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用過(guò)程中越發(fā)明顯。(引用自MarcVidal&StanleyFields的“Theyeasttwo-hybridassay:stillfindingconnectionsafter25years”):(1)盡管酵母雜交技術(shù)揭示了蛋白質(zhì)結(jié)合位點(diǎn)的詳細(xì)信息,但操作簡(jiǎn)單。只需2個(gè)質(zhì)粒+1個(gè)菌株即可完成,且有不同體系方便選擇。(2)該技術(shù)利用比較好的DNA結(jié)合位點(diǎn),有效的***結(jié)構(gòu)域和友好的報(bào)告基因系統(tǒng),可以放大弱互作的信號(hào)。(3)該技術(shù)可用于各種物種的蛋白互作檢測(cè),具有物種普適性,尤其是人類蛋白。(4)衍生技術(shù)具有更***的應(yīng)用,可擴(kuò)展到檢測(cè)蛋白質(zhì)與DNA、蛋白質(zhì)與RNA、蛋白質(zhì)與小分子以及其他組合之間的相互作用,甚至可實(shí)現(xiàn)將生理相互作用與表型數(shù)據(jù)直接關(guān)聯(lián)。當(dāng)然,做過(guò)酵母雜交實(shí)驗(yàn)的小伙伴應(yīng)該都了解,互作結(jié)果的判斷,往往要等酵母生長(zhǎng)好幾天才能看出來(lái)(當(dāng)然,小歐認(rèn)為這在偉大的科研事業(yè)過(guò)程中算不上啥),互作強(qiáng)弱也是主觀判斷性較強(qiáng),存在假陽(yáng)性。合作文章上百篇,平均影響因子高達(dá)7.124 歐易生物酵母文庫(kù)。
酵母文庫(kù)研究:棉花是世界上天然纖維的主要來(lái)源。近年來(lái),氣候變化給植物帶來(lái)的干旱、高鹽等滲透脅迫,使棉花產(chǎn)量穩(wěn)步下降。為適應(yīng)變化莫測(cè)的氣候,植物不斷進(jìn)化出復(fù)雜而有組織的應(yīng)對(duì)非生物脅迫的反應(yīng)機(jī)制,其中數(shù)千個(gè)抗性相關(guān)基因間的相互作用,在提高植物的抗旱性和耐鹽性中發(fā)揮著重要作用。功能基因組學(xué)研究表明,植物胚胎發(fā)育晚期豐富蛋白(LEA)就是這樣一種基因,它在植物發(fā)育過(guò)程中,面對(duì)多種環(huán)境脅迫時(shí)均有表達(dá),對(duì)提高植物的抗旱性和耐鹽性具有重要作用。2022年3月,中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所在國(guó)際期刊上發(fā)表了BiologicalMacromolecules上發(fā)表了題為“LateembryogenesisabundantgeneLEA3(Gh_A08G0694)enhancesdroughtandsaltstresstoleranceincotton”的研究論文,該研究發(fā)現(xiàn)LEA3能夠增強(qiáng)棉花的抗旱性和耐鹽性。該項(xiàng)目中所用的棉花酵母文庫(kù)由歐易生物構(gòu)建。關(guān)于酵母雜交文庫(kù)構(gòu)建及篩選你需要知道這些。山西宣傳酵母文庫(kù)報(bào)價(jià)
酵母雜交案例專業(yè)的碩博團(tuán)隊(duì)。山東發(fā)展酵母文庫(kù)
目前,歐易生物負(fù)責(zé)該水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫(kù)的維護(hù)和保存工作,并對(duì)廣大水稻科研工作者提供轉(zhuǎn)錄因子篩選服務(wù)。如去年歐易生物助力中國(guó)科學(xué)院分子植物科學(xué)***創(chuàng)新中心的王二濤老師應(yīng)用該文庫(kù)對(duì)水稻-叢枝菌根進(jìn)行了深入研究,成功構(gòu)建了水稻-叢枝菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò),結(jié)果發(fā)表于《Cell》封面。截至文章發(fā)表,該文庫(kù)已收錄了1683個(gè)水稻轉(zhuǎn)錄因子,隸屬于54個(gè)家族,覆蓋預(yù)測(cè)的水稻轉(zhuǎn)錄因子總量的70%。文庫(kù)中水稻轉(zhuǎn)錄因子的a基因信息來(lái)源于PlantTFDB和KOME數(shù)據(jù)庫(kù)。文庫(kù)載體使用pGADT7,酵母菌株使用Y187,每一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子菌株**保存于96孔板中。山東發(fā)展酵母文庫(kù)
上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司是一家從事科研服務(wù),科研檢測(cè),學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢研發(fā)、生產(chǎn)、銷售及售后的服務(wù)型企業(yè)。公司坐落在聯(lián)航路1188號(hào)25幢,成立于2009-03-10。公司通過(guò)創(chuàng)新型可持續(xù)發(fā)展為重心理念,以客戶滿意為重要標(biāo)準(zhǔn)。歐易生物目前推出了科研服務(wù),科研檢測(cè),學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢等多款產(chǎn)品,已經(jīng)和行業(yè)內(nèi)多家企業(yè)建立合作伙伴關(guān)系,目前產(chǎn)品已經(jīng)應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域。我們堅(jiān)持技術(shù)創(chuàng)新,把握市場(chǎng)關(guān)鍵需求,以重心技術(shù)能力,助力醫(yī)藥健康發(fā)展。上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司研發(fā)團(tuán)隊(duì)不斷緊跟科研服務(wù),科研檢測(cè),學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢行業(yè)發(fā)展趨勢(shì),研發(fā)與改進(jìn)新的產(chǎn)品,從而保證公司在新技術(shù)研發(fā)方面不斷提升,確保公司產(chǎn)品符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和要求。上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司以市場(chǎng)為導(dǎo)向,以創(chuàng)新為動(dòng)力。不斷提升管理水平及科研服務(wù),科研檢測(cè),學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢產(chǎn)品質(zhì)量。本公司以良好的商品品質(zhì)、誠(chéng)信的經(jīng)營(yíng)理念期待您的到來(lái)!