技術(shù)酵母文庫(kù)多少錢

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-10-24

歐易生物酵母文庫(kù)技術(shù)發(fā)表的又一篇高水平研究論文。植物***茉莉酸(JA)參與植物許多發(fā)育過程的調(diào)控。JAZ蛋白是茉莉酸信號(hào)反應(yīng)的阻遏物,通過抑制JA轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)劑來(lái)負(fù)向調(diào)節(jié)JA信號(hào)?;ㄇ嗨睾驮ㄇ嗨厥欠N子、葉、花和果實(shí)中重要的植物次生代謝產(chǎn)物,可充當(dāng)抗氧化劑,幫助***活性氧和對(duì)**老,對(duì)人類健康具有重要價(jià)值。已有研究表明,花青素和原花青素的生物合成基因的轉(zhuǎn)錄受MYB、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的調(diào)控。其中,蘋果MYB轉(zhuǎn)錄因子MdMYB9參與調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的生物合成,但其分子機(jī)制仍有待深入研究。酵母文庫(kù)雙雜交技術(shù)及應(yīng)用。技術(shù)酵母文庫(kù)多少錢

根系是植物從土壤中吸收水分、養(yǎng)分和感知環(huán)境刺激的獨(dú)特***。根系結(jié)構(gòu)的優(yōu)化有助于提高植株的抗逆性和產(chǎn)量。ERF(ETHYLENERESPONSIVEFACTOR)是植物特有的轉(zhuǎn)錄因子家族之一,與植物的多種發(fā)育過程和抗逆性有關(guān)。ERFs在擬南芥和水稻根系發(fā)育中的作用已經(jīng)多有報(bào)道,但小麥ERFs在根系發(fā)育中的作用尚待研究。報(bào)道了小麥 TaSRL1 轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控根長(zhǎng)的分子機(jī)制。文章中酵母雙雜交文庫(kù)由歐易生物完成。從小麥基因組中克隆了 TaSRL1 基因,RT-PCR 顯示 TaSRL1 主要在小麥苗期的根中表達(dá)。對(duì) TaSRL1 啟動(dòng)子序列進(jìn)行預(yù)測(cè)分析。上海運(yùn)用酵母文庫(kù)歐易生物21天極速建庫(kù),一個(gè)文庫(kù)可以同時(shí)做單雜、雙雜、三雜,化藥小分子篩選。

酵母文庫(kù)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)表明,MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。MdTRB1 與 MdMYB9 結(jié)合可以增強(qiáng)后者對(duì)下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性。而 MdTRB1 與 MdJAZ1 的結(jié)合,可以干擾其與 MdMYB9 的互作,進(jìn)而負(fù)向調(diào)控 MdTRB1 介導(dǎo)的對(duì)花青素和原花青素積累的促進(jìn)作用。本研究表明,JAZ1-TRB1-MYB9 復(fù)合物可以動(dòng)態(tài)調(diào)控 JA 介導(dǎo)的花青素和原花青素的積累。本研究為進(jìn)一步研究 JA 對(duì)花青素和原花青素生物合成的調(diào)節(jié)提供了新見解。本研究鑒定了一個(gè)可以與 MdMYB9 相互作用的蛋白 MdTRB1。實(shí)驗(yàn)表明,MdTRB1 可以正向調(diào)節(jié)花青素和原花青素的累積。

酵母單雜交結(jié)果顯示,磷酸鹽饑餓響應(yīng)因子OsPHR1/2/3可以***51個(gè)目標(biāo)啟動(dòng)子中的25個(gè),包括OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A等。OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A自身又可以調(diào)控許多菌根共生相關(guān)基因的表達(dá)(圖A)。對(duì)叢枝菌根共生響應(yīng)基因啟動(dòng)子序列預(yù)測(cè)分析顯示,有78個(gè)轉(zhuǎn)錄因子被富集,87%的菌根共生響應(yīng)基因受到OsPHR1/2/3的調(diào)控,其中42%受到OsPHR1/2/3的直接調(diào)控。因此推測(cè)OsPHR1/2/3可能是菌根共生調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的一個(gè)關(guān)鍵調(diào)控樞紐(圖A-B)。EMSA和熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)證實(shí),OsPHR12可以直接結(jié)合并***OsRAM1、OsWRI5A、OsPT11、OsAMT3啟動(dòng)子序列(圖C-F),并且這種結(jié)合依賴于啟動(dòng)子中的P1BS元件(圖G)。酵母文庫(kù)酵母雙雜交篩庫(kù)個(gè)性化定制研究方案。

通過酵母雙雜交進(jìn)行篩選,結(jié)果顯示 SWC6 可以在藍(lán)光下與 CRY1 相互作用(圖 A-C)。同樣,酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)顯示 CRY2 也可以在藍(lán)光下與 SWC6 相互作用(圖 D)。并通過 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)(圖 E-L)證實(shí) CRY1、CRY2 與 SWC6 的結(jié)合是藍(lán)光依賴性的。SWC6 是真核生物中已報(bào)道的 SWR1 復(fù)合物亞基,負(fù)責(zé)催化 H2A.Z 在染色質(zhì)上的替換。已報(bào)道 SWR1 復(fù)合物中 SWC6 可以與 ARP6 亞基結(jié)合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實(shí)驗(yàn)(圖 A-H)顯示,CRY1、CRY2 可以藍(lán)光依賴性與 ARP6 結(jié)合。10年酵母雙雜交建庫(kù)篩庫(kù)經(jīng)驗(yàn)結(jié)合SMART和GATEWAY建庫(kù)技術(shù)優(yōu)勢(shì)。江蘇技術(shù)酵母文庫(kù)做什么

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酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)表明,PtMADS11 與 PtDAL1 之間存在直接的相互作用(圖 C),并通過 BiFC、GST pull-down 得以證實(shí)(圖 D-E)。為進(jìn)一步研究在年齡信號(hào)調(diào)控中的作用機(jī)制,分別構(gòu)建了過表達(dá)PtDAL1和PtMADS11的擬南芥。與對(duì)照相比,過表達(dá)PtDAL1***提前了擬南芥的營(yíng)養(yǎng)-生殖時(shí)相轉(zhuǎn)換(圖A),證實(shí)PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了關(guān)鍵作用。過表達(dá)PtMADS11植株在短日照下表現(xiàn)出早開花和花序結(jié)構(gòu)過早終止,表明PtMADS11在開花調(diào)節(jié)和花序內(nèi)分生組織命運(yùn)起到調(diào)控作用。在擬南芥中利用年齡調(diào)控通路不同節(jié)點(diǎn)關(guān)鍵基因突變體進(jìn)行功能互補(bǔ)實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示過表達(dá)PtDAL1可以恢復(fù)由于過表達(dá)miR156導(dǎo)致的開花延遲,但ft缺失會(huì)導(dǎo)致PtDAL1失活,PtDAL1過表達(dá)也不能恢復(fù)soc1-1-2突變體的表型,表明PtDAL1依賴或處于FT/SOC1的上游。而過表達(dá)PtMADS11可以恢復(fù)由過表達(dá)miR156或ft缺失導(dǎo)致的開花延遲,表明PtMADS11對(duì)開花的調(diào)控不依賴于miR156或FT。技術(shù)酵母文庫(kù)多少錢

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