湖南高通量篩選平臺(tái)

充分利用藥用資源由于高通量篩選依賴數(shù)量龐大的樣品庫(kù)，實(shí)現(xiàn)了藥物篩選的規(guī)?；?，較大限度地利用了藥用物質(zhì)資源，提高了藥物發(fā)現(xiàn)的幾率，同時(shí)提高了發(fā)現(xiàn)新藥的質(zhì)量。微量篩選系統(tǒng)由于高通量篩選采用的是細(xì)胞、分子水平的篩選模型．樣品用量一般在微克級(jí)（μg），節(jié)省了樣品資源，奠定了“一藥多篩”的物質(zhì)基礎(chǔ)，同時(shí)節(jié)省了實(shí)驗(yàn)材料，降低了單藥篩選成本。高度自動(dòng)化操作隨著對(duì)高通量藥物篩選的重視程度不斷提高，用于高通量藥物篩選操作設(shè)備和檢測(cè)儀器都有了長(zhǎng)足發(fā)展，實(shí)現(xiàn)了計(jì)算機(jī)控制的自動(dòng)化，減少了操作誤差的發(fā)生，提高了篩選效率和結(jié)果的準(zhǔn)確性。多學(xué)科理論和技術(shù)的結(jié)合在高通量篩選過(guò)程中，不僅應(yīng)用了普通的藥理學(xué)技術(shù)和理論，而且與藥物化學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、數(shù)學(xué)、微生物學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)等多學(xué)科緊密結(jié)合。這種多學(xué)科的有機(jī)結(jié)合，在藥物篩選領(lǐng)域產(chǎn)生大量新的課題和發(fā)展機(jī)會(huì)，促進(jìn)了藥物篩選理論和技術(shù)的發(fā)展。全自動(dòng)高通量篩選工作站。湖南高通量篩選平臺(tái)

高通量篩選的實(shí)驗(yàn)方法必須具備條件穩(wěn)定，樣本之間差異性小，容易檢測(cè)，且可以大批量同時(shí)檢測(cè)等特性。除了以上介紹的三種較為常用的方法之外，第二信使檢測(cè)、細(xì)胞活力檢測(cè)等方法也是常用的細(xì)胞水平的檢測(cè)手段?；衔飵?kù)的使用在篩選前期也起著十分重要的作用。在化合物未知的情況下，數(shù)量足夠大的化合物庫(kù)可增加識(shí)別目標(biāo)的概率；不同細(xì)分用途的化合物庫(kù)，則能進(jìn)一步整合具有某項(xiàng)作用的盡可能多的化合物。MCE對(duì)不同方向、不同種類、性質(zhì)不同的化合物做了詳細(xì)分類，如生物活性化合物庫(kù)、FDA上市庫(kù)、天然產(chǎn)物庫(kù)等可以供不同需求的科學(xué)家選擇。隨著技術(shù)的發(fā)展，MCE化合物庫(kù)數(shù)量會(huì)越來(lái)越多，分類也越來(lái)越精細(xì)，這將節(jié)約前期篩選合適化合物所需的時(shí)間。此外，MCE還可以根據(jù)你的不同需求提供定制庫(kù)~湖南小分子高通量篩選藥物高通量篩選的特點(diǎn)。

瓊脂平板篩選法，對(duì)突變體間差異可視化較弱，適用于突變庫(kù)的初步篩選，篩選后的突變體仍需要其他檢測(cè)方法如微孔板法進(jìn)行準(zhǔn)確定量。數(shù)字影像分光光度計(jì)在瓊脂平板篩選方法中的應(yīng)用使瓊脂平板法的靈敏度提高且通量達(dá)到10^5克隆/d，若可根據(jù)目標(biāo)酶或代謝產(chǎn)物的特性建立瓊脂平板篩選方法，則無(wú)需使用依賴復(fù)雜儀器設(shè)備的超高通量篩選法。平板篩選法是微生物在平板固體培養(yǎng)基上進(jìn)行生殖反應(yīng)，從而反應(yīng)出來(lái)的性狀。微孔板篩選方法微孔板篩選方法通過(guò)檢測(cè)微孔板中底物或目標(biāo)產(chǎn)物所引起的吸光度或熒光變化對(duì)其進(jìn)行定量分析，可以保證篩選的精確性和靈敏度，是目前常用的篩選方法。根據(jù)熒光或吸光度精確檢測(cè)目標(biāo)產(chǎn)物的微孔板(Microtiterplate，MTP)篩選方法應(yīng)運(yùn)而生，并已廣泛應(yīng)用于酶和細(xì)胞工廠的定向改造中。但微孔板篩選法存在通量低、操作耗時(shí)等缺點(diǎn)。微孔板篩選法，可以理解成非常小的搖瓶，是微生物在液體環(huán)境中反應(yīng)出來(lái)的性狀。

高通量的抗體制備，篩選技術(shù)不僅可以的提高工作效率，而且可能提高雙特異抗體篩選的成功率。接下來(lái)介紹三類雙特異抗體高通量篩選技術(shù)，包括雙特異抗體的制備，雙特異抗體的質(zhì)量分析等。為了能夠篩選到針對(duì)自身性免疫疾病如SLE（系統(tǒng)性紅斑狼瘡）的雙特異抗體，作者對(duì)B細(xì)胞表面的23個(gè)靶點(diǎn)進(jìn)行單克隆抗體的篩選，每個(gè)靶點(diǎn)有1-8個(gè)候選的單克隆抗體，并且這些抗體沒(méi)有進(jìn)行過(guò)親合力或者表位的預(yù)先篩選。雙特異抗體是為了模擬雙抗結(jié)構(gòu)而建立的平臺(tái)，該平臺(tái)中，雙抗包括兩個(gè)部分Fab-X (Fab-scFv) 和 Fab-Y (Fab-peptide)。為了能夠篩選到針對(duì)自身性免疫疾病如SLE（系統(tǒng)性紅斑狼瘡）的雙特異抗體，作者對(duì)B細(xì)胞表面的23個(gè)靶點(diǎn)進(jìn)行單克隆抗體的篩選，每個(gè)靶點(diǎn)有1-8個(gè)候選的單克隆抗體，并且這些抗體沒(méi)有進(jìn)行過(guò)親合力或者表位的預(yù)先篩選。催化劑高通量篩選技術(shù)。

蛋白質(zhì)片段互補(bǔ)分析(PCA，也稱為雙分子熒光互補(bǔ))和雙雜交篩選允許檢測(cè)細(xì)胞中蛋白質(zhì)相互作用的形成/抑制。PCA將單個(gè)檢測(cè)蛋白（熒光素酶、GFP、GAL）分成兩部分，這些部分與感興趣的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用融合；如果伴侶結(jié)合，檢測(cè)蛋白會(huì)重新形成并檢測(cè)到信號(hào)。高內(nèi)涵成像平臺(tái)（HCS）由于其能夠提供出色的單細(xì)胞分析功能和短的數(shù)據(jù)采集時(shí)間獲得大家的青睞。一般的實(shí)驗(yàn)流程為設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并使用自動(dòng)分液儀將細(xì)胞接種到96、384或1536孔板中；然后加入化合物，由于細(xì)胞在孵育過(guò)程中會(huì)對(duì)化合物做出反應(yīng)，隨后對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色，并通過(guò)HCS成像系統(tǒng)獲取圖像，通過(guò)軟件分析獲取的圖像以確定化合物的劑量反應(yīng)。高通量篩選的實(shí)驗(yàn)方案。湖南高通量篩選平臺(tái)

高通量篩選藥物分析儀。湖南高通量篩選平臺(tái)

高通量篩選作為主流的篩選技術(shù)，已得到了的應(yīng)用。其他篩選技術(shù)，比如組合庫(kù)(CombinatorialLibrary)和碎片化合物庫(kù)(FragmentLibrary)篩選技術(shù)運(yùn)用也相當(dāng)，只是相較而言運(yùn)用較少。另外，基于DNA編碼化合庫(kù)（DEL）技術(shù)的篩選文獻(xiàn)報(bào)道也不多見(jiàn)，并且大都發(fā)表于2016年之后，很多研究工作仍處于待發(fā)表狀態(tài)。正如2018年Brown和Bostr?m所指出，TheJournalofMedicinalChemistry上所報(bào)道的66個(gè)臨床化合物，就有1個(gè)是出自于DNA編碼化合物庫(kù)技術(shù)。湖南高通量篩選平臺(tái)