培養(yǎng)基配制--稱量:培養(yǎng)基的制備環(huán)節(jié),應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照培養(yǎng)基配方制備,在培養(yǎng)基的稱量過程中,建議在干爽、無風(fēng)的區(qū)域或者通風(fēng)柜中進(jìn)行,這樣能夠避免培養(yǎng)基吸潮使稱量結(jié)果不準(zhǔn)。應(yīng)當(dāng)選擇靈敏度較高的稱重天平,這樣能夠保證稱量的準(zhǔn)確性,同時稱量過程中要選擇的稱量匙,避免其他雜質(zhì)混入培養(yǎng)基中。操作人員應(yīng)當(dāng)對稱量過程進(jìn)行詳細(xì)的記錄,記錄中應(yīng)該體現(xiàn)培養(yǎng)基名稱、批號、稱量數(shù)量、具體配制方法、制備人姓名日期、復(fù)核人姓名日期等信息,方便后期的溯源調(diào)查。全自動培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng):鋁制表面光滑平坦;易于清潔,無孔隙和裂縫,以防培養(yǎng)基流進(jìn)去。寧夏培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)
培養(yǎng)基配置原則:控制pH條件,當(dāng)培養(yǎng)基中酸性物質(zhì)積累導(dǎo)致H+濃度增加時,H+與弱堿性鹽結(jié)合形成弱酸性化合物,培養(yǎng)基pH不會過度降低;如果培養(yǎng)基中OH-濃度增加,OH-則與弱酸性鹽結(jié)合形成弱堿性化合物,培養(yǎng)基pH也不會過度升高。但KH2PO4和K2HPO4緩沖系統(tǒng)只能在一定的pH范圍內(nèi)(6.4-7.2)起調(diào)節(jié)作用。有些微生物,如乳酸菌能大量產(chǎn)酸,上述緩沖系統(tǒng)就難以起到緩沖作用,此時可在培養(yǎng)基中添加難溶的碳酸鹽(如CaCO3)來進(jìn)行調(diào)節(jié),CaCO3難溶于水,不會使培養(yǎng)基pH過度升高,但它可以不斷中和微生物產(chǎn)生的酸,同時釋放出CO2,將培養(yǎng)基pH控制在一定范圍內(nèi)。在培養(yǎng)基中還存在一些天然的緩沖系統(tǒng),如氨基酸、肽、蛋白質(zhì)都屬于兩性電解質(zhì),也可起到緩沖劑的作用。新疆培養(yǎng)基制備器廠家培養(yǎng)基制備器使用注射器將添加劑加入,確保了添加劑的無菌添加。
馬鈴薯培養(yǎng)基的分裝:1.根據(jù)需要將培養(yǎng)基分裝于不同容量的三角燒瓶、試管中。分裝的量不宜超過容器的2/3以免滅菌時外溢。2.瓊脂斜面分裝量為試管容量的1/5,滅菌后須趁熱放置成斜面,斜面長約為試管長的2/3。3.半固體培養(yǎng)基分裝量約為試管長的1/3,滅菌后直立凝固待用。4.高層瓊脂分裝量約為試管的1/3,滅菌后趁熱直立,待冷后凝固待用。5.液體培養(yǎng)基分裝于試管中,約是試管長度的1/3。6.瓊脂平板:將滅菌(或加熱融化)后的培養(yǎng)基冷至50℃左右,以無菌手續(xù)傾人滅菌平皿內(nèi),內(nèi)徑225px的平皿傾注培養(yǎng)基約13~15ml,輕搖平皿底,使培養(yǎng)基平鋪于平皿底部,待凝固后即成,傾注培養(yǎng)基時,切勿將皿蓋全部啟開,以免空氣中塵埃及細(xì)菌落入新制成的平板培養(yǎng)基(簡稱平板),表面水分較多,不利于細(xì)菌的分離,通常應(yīng)將平皿倒扣擱置于37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約30分鐘待平板平面干燥后使用。
實驗室在制作培養(yǎng)基時候的經(jīng)驗總結(jié):培養(yǎng)基分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時較好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時,分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為恰當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基較終pH之用。全自動培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng):一體化控制;主機(jī)和選配件(附加劑泵)可通過Mediafill觸摸屏一起控制。
培養(yǎng)基的實驗室制備:―般要求:正確制備培養(yǎng)基是微生物檢驗的好基礎(chǔ)步驟之一,使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應(yīng)遵守良好實驗室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時,應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說明配制。如重量(體積)、pH制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實驗室使用各種基礎(chǔ)成分制備培養(yǎng)基時,應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制,并記錄相關(guān)信息,如:培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質(zhì)含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便溯源。培養(yǎng)基制備器必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁或明顯標(biāo)簽。寧夏培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)
制備培養(yǎng)基的操作要點:固體培養(yǎng)基在實際中用得十分普遍。寧夏培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)
干粉培養(yǎng)基有哪些注意事項:①熔化培養(yǎng)基制備必須在玻璃容器中進(jìn)行,如果使用銅或鐵器皿,會影響細(xì)菌的生長。②注意按照先加水再加顆粒干粉培養(yǎng)基順序,反之則不利于培養(yǎng)基溶解。③單在必要時進(jìn)行加熱溶解操作,其加熱溫度也不要過高時間不要過長,主要原因是高溫會破壞瓊脂和培養(yǎng)基中的一些營養(yǎng)成分。④生產(chǎn)的干粉培養(yǎng)基和顆粒培養(yǎng)基都經(jīng)過pH校準(zhǔn),使用時無需特殊驗證。因為高壓會影響pH值,則應(yīng)在高壓后驗證pH值。⑤液體培養(yǎng)基通常是預(yù)先包裝好的,分裝時應(yīng)注意每管的用量不得高于試管的三分之二。⑥高壓后冷卻至五六十度環(huán)境,再導(dǎo)入平板,否則會形成更多的水蒸氣,導(dǎo)致細(xì)菌分離數(shù)量。寧夏培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)