培養(yǎng)基的滅菌:一般培養(yǎng)基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中,如無特殊規(guī)定,即可用此法滅菌。某些熱敏成分,如糖類,應(yīng)另行配成20%或更高的濃液,以過濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無菌操作技術(shù)、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌。血液、體液和等則應(yīng)以無菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50°C左右的培養(yǎng)基中。瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出,冷至55℃-60℃時,擺置成適當(dāng)斜面,待其自然凝固。Systec培養(yǎng)基準(zhǔn)備器能夠保證快速溫和的制備標(biāo)準(zhǔn)和高敏感性培養(yǎng)基。內(nèi)蒙古進口培養(yǎng)基制備器
配制好的培養(yǎng)基保存:滅菌以后培養(yǎng)基應(yīng)該迅速冷卻至所需溫度,避免長時間保存在滅菌鍋內(nèi),造成過度滅菌,影響培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分或選擇性效果。所配制的培養(yǎng)基的量,應(yīng)該是在較長保存期限內(nèi)正好使用完。含染料的培養(yǎng)基應(yīng)閉光保存;倒好的瓊脂平板如果配制的當(dāng)天未使用完,應(yīng)于冷藏保存,如果保存時間超過2天,應(yīng)將其放入密封的塑料袋中保存;配好的肉湯類培養(yǎng)基如果保存時間超過2個星期,應(yīng)將其放在帶有螺旋蓋的試管或其它密閉的試管或容器中防止蒸發(fā)。自動攪拌培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試培養(yǎng)基制備器滅菌鍋關(guān)閉放氣閥前,將鍋內(nèi)氣體排干凈。
培養(yǎng)基的過濾澄清:液體培養(yǎng)基必須較全澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復(fù)過濾。如過濾法不能達到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55-60℃的培養(yǎng)基放入大的三角燒瓶內(nèi),裝入量不得超過燒瓶容量的1/2,每1000ml培養(yǎng)基加入1-2個雞蛋的蛋白.強力振搖3-5分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項:1.培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進行配制外.一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料.加以比較核對.再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來源。2.培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)推各稱,配方及其來源.和各種成份的牌號。好終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳椋瑥?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。培養(yǎng)基制備器可直接連接標(biāo)準(zhǔn)、通用的蠕動泵和稀釋、充填培養(yǎng)皿系統(tǒng)。
微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:培養(yǎng)基倒入平板,將滅菌溶化的培養(yǎng)基冷卻至五十度后,倒入無菌干燥的培養(yǎng)皿中。微生物培養(yǎng)基制備的溫度不能太高,否則培養(yǎng)皿內(nèi)蓋容易形成過多的冷凝水;溫度太低,中海培養(yǎng)基容易凝固成塊狀,不能做成平板。倒平板時,要靠近酒精的火焰以防止外來細(xì)菌落入盤中。左手托住培養(yǎng)皿,右手托住三角瓶底部。用小指和手掌拉出錐形瓶的棉塞,燒灼燒瓶口,用拇指和食指在培養(yǎng)皿蓋上打開一條縫,直到燒瓶口剛好伸手進去,倒入培養(yǎng)基,直到底部被覆蓋。不要超過培養(yǎng)皿高度的三分之一,迅速蓋上蓋子,放在桌子上,輕輕旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基分布均勻,凝結(jié)后即可。高壓蒸汽滅菌一般使培養(yǎng)基pH降低,應(yīng)在配制培養(yǎng)基時加以調(diào)節(jié)。云南自動培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。內(nèi)蒙古進口培養(yǎng)基制備器
配置培養(yǎng)基注意問題:1、根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。2、注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度及合適配比,保持合適滲透壓。3、將培養(yǎng)基的pH控制在適宜的范圍之內(nèi),以利于不同類型微生物的生長繁殖或代謝產(chǎn)物的積累。4、要注意各種原料的配比,每種培養(yǎng)基的配比合適的配比,可以按照老師的要求去做。5、如需要加熱的時候注意時間的把握。培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動物生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽、維生素和水等幾大類物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。內(nèi)蒙古進口培養(yǎng)基制備器