微生物檢驗培養(yǎng)基制備的要點:調(diào)培養(yǎng)基pH,雖然中海培養(yǎng)基中含有緩沖物質,可以盡量使培養(yǎng)基的pH值保持在標準范圍內(nèi),但如果配制的培養(yǎng)基不能要求,則必須進行必要的調(diào)整。如果您有校準過的pH計,則可以使用pH計。如果沒有,可以使用精確的pH試紙,然后根據(jù)需要使用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸進行微調(diào)。使用0.1氫氧化鈉或0.1mol/L鹽酸進行調(diào)整至所需的pH值。培養(yǎng)基有酸性或堿性,pH值一般為7.4~7.6。對于需要用氫氧化鈉高壓滅菌的介質,將pH調(diào)至比要求值高0.1~0.2個單位,因為用氫氧化鈉調(diào)節(jié)時,高壓滅菌后介質的pH值要降低0.1~0.2。如果微生物培養(yǎng)基中含有碳酸鈣,則無需調(diào)整pH值。為防止冷凝水過多,也可將培養(yǎng)基冷卻至45 ~ 50°C再倒平板。新疆自動攪拌培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的實驗室制備:正確制備培養(yǎng)基時微生物檢驗的較基礎步驟之一。使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會導致培養(yǎng)基出現(xiàn)質量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配置。記錄所有相關數(shù)據(jù),如質量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。使用各別成分制備培養(yǎng)基時,應按照配方準確配制,記錄所有細節(jié)信息,如;培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便潮源。全自動培養(yǎng)基制備器哪個品牌好培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內(nèi)。
培養(yǎng)基的分裝:大批量配制時使用的自動分配器須經(jīng)校準和確認。每次使用前后,均要對分配器的管道系統(tǒng)進行沖洗,在分裝無菌培養(yǎng)基前,則要采用無菌硅膠管。固體培養(yǎng)基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中,高壓滅菌后根據(jù)需要分裝平皿或試管。平皿:傾注平皿,應在無菌室中放置3—4h,如用塑料平皿須在35℃培養(yǎng)箱中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發(fā)。斜面:制備低層斜面分裝于試管,約占容積1/5,滅菌后趁熱斜放在細玻璃棒和木桿上,使成斜度,分裝使注意管口和瓶塞上勿沾有培養(yǎng)基,如沾有培養(yǎng)基應用布抹去,以避免污染。
過濾:配成的培養(yǎng)基,若無特殊要求,可省略此步。若有沉淀或渾濁,需要澄清的,液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾。而固體培養(yǎng)基可用中間夾一薄層脫脂棉的雙層紗布過濾。如果過濾法還不能達到澄清的要求,則可用蛋清澄清法,即培養(yǎng)基加熱冷卻到50℃~60℃,裝入三角瓶內(nèi)(不超過容量的二分之一),按1000ml加入1個~2個雞蛋的蛋清,用力搖晃3min~5min,高壓蒸汽滅菌121℃、20min,取出趁熱過濾即可。擺斜面:裝在試管中的瓊脂培養(yǎng)基,在滅菌完成后,趁熱立即擺放在木棒(或玻璃棒)上,并完成適時地斜度,冷卻后,瓊脂凝固即成斜面。斜面長度不要超過試管的二分之一。培養(yǎng)基制備器完全稱取完畢后,還應進行一次檢查。
培養(yǎng)基各成份的混合和溶化:培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細菌不易生長。好好使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動,以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化.迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,較后必須加以補足。培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。湖北培養(yǎng)基制備器安裝調(diào)試
合成培養(yǎng)基是一類化學成分和數(shù)量完全知道的培養(yǎng)基,它是用已知化學成分的化學藥品配制而成。新疆自動攪拌培養(yǎng)基制備器
簡單制作培養(yǎng)基,需要完成以下幾個主要步驟:需要對其進行消毒處理,普通介質使用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘。本發(fā)明適用于各種介質的制備,如無特殊要求,可用于滅菌。一些熱成分,如碳水化合物,應該單獨制備20%或更多的濃縮液,過濾或間斷殺菌,然后通過無菌操作技術加入到培養(yǎng)液中。在低溫下,明膠培養(yǎng)基也能殺菌。血、體液及素應經(jīng)無菌處理后,加至約50℃冷卻培養(yǎng)基中。需要對培養(yǎng)基的質量進行檢測。每次處理完培養(yǎng)基,都要仔細檢查,如破損、浸漬、顏色異常、棉塞污染等,要進行篩選和棄置,才能確定pH值。培養(yǎng)基培養(yǎng)一晚,若有細菌生長,培養(yǎng)基將被丟棄。常規(guī)菌株接種1×2管或瓶培養(yǎng)基,24h培養(yǎng),對生長不良或無菌的菌株進行培養(yǎng),追蹤其產(chǎn)生原因,并反復接種。如不發(fā)生變化,應丟棄培養(yǎng)基,禁止使用。新疆自動攪拌培養(yǎng)基制備器