培養(yǎng)平板培養(yǎng)基是被用于獲得微生物純培養(yǎng)的很常用的固體培養(yǎng)基形式,它是冷卻凝固后的固體培養(yǎng)基在無菌培養(yǎng)皿中形成的培養(yǎng)基固體平面,常被簡稱為培養(yǎng)平板。也叫平面培養(yǎng)基、平皿培養(yǎng)基。平板培養(yǎng)基常用于單孢分離,測定菌絲生長速度,觀察菌落的形態(tài),拮抗實驗,測定接種空間雜菌數(shù)。平板培養(yǎng)基制作方法如下:將培養(yǎng)皿洗凈、干燥,使各培養(yǎng)皿蓋方向一致,用牛皮紙包好,或放入特制鐵罐內(nèi),注明皿蓋的方向。高壓滅菌或干燥滅菌后備用。取剛滅菌后尚未凝固的培養(yǎng)基置于無菌箱或超凈工作臺內(nèi),先左手持三角瓶,右手反轉(zhuǎn)手掌用中指和無名指撥出棉塞或硅膠賽(或不翻轉(zhuǎn)手掌用小指和手掌撥出棉塞),同時將三角瓶轉(zhuǎn)換至右手,而后左手拿平皿,以大拇指和中指將皿蓋打開一縫,至瓶口剛好伸人。三角瓶口經(jīng)火焰燒灼后,傾入滅菌或溶化、冷卻至55~60°C的培養(yǎng)基約15mL(勿使瓶口靠在平皿壁上,以免沾染皿壁),迅速蓋好皿蓋,置于桌上輕輕旋轉(zhuǎn)平皿,使培養(yǎng)基均勻分布于整個平皿底部,冷凝后即為平板培養(yǎng)基。有時凝固后的培養(yǎng)基表面有冷凝水,可將平皿蓋打開倒置于37℃溫箱,除去冷凝水,否則將影響平板分離培養(yǎng)效果。為防止冷凝水過多,也可將培養(yǎng)基冷卻至45~50°C再倒平板。培養(yǎng)基制備器各種工作模式預(yù)存五組分配參數(shù)。四川培養(yǎng)基制備器哪家好
在制備培養(yǎng)基時,通常要考慮以下因素:1.緩沖能力碳算鹽緩沖系統(tǒng)由于毒性小、成本低、對培養(yǎng)物有營養(yǎng)作用,因此比其他緩沖系統(tǒng)用得多。在pH值條件下的緩沖能力差。2.滲透壓多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞對滲透壓有很寬的耐受范圍,一般常用冰點降低或蒸汽壓升高測定。如果自己配培養(yǎng)基,可通過測定滲透壓防止3.粘度培養(yǎng)基的粘度主要受血清含量的影響,在多數(shù)情況下,對細(xì)胞生長沒有什么影響。在攪拌條件下,用羧甲基纖維素增加培養(yǎng)基的粘度,可減輕細(xì)胞損害。這對在低血清濃度或無血清下條件下培養(yǎng)細(xì)胞顯得尤為重要。實驗室培養(yǎng)基制備器制備培養(yǎng)基的操作要點:體培養(yǎng)基營養(yǎng)成分分布均勻。
培養(yǎng)基的實驗室制備:―般要求:正確制備培養(yǎng)基是微生物檢驗的好基礎(chǔ)步驟之一,使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(zhì)(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應(yīng)遵守良好實驗室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會導(dǎo)致培養(yǎng)基出現(xiàn)質(zhì)量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時,應(yīng)嚴(yán)格按照廠商提供的使用說明配制。如重量(體積)、pH制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實驗室使用各種基礎(chǔ)成分制備培養(yǎng)基時,應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制,并記錄相關(guān)信息,如:培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質(zhì)含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便溯源。
實驗室在制作培養(yǎng)基時候的經(jīng)驗總結(jié):1、培養(yǎng)基pH值的調(diào)正:pH因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正。例如,牛肉浸液約可降低pH0.2,而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應(yīng)隨時注意探索經(jīng)驗、以期能掌握培養(yǎng)基的較終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)整后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。2、培養(yǎng)基過濾澄清:液體培養(yǎng)基必須澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達(dá)到此項要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應(yīng)折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。
培養(yǎng)基的分裝:培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時好好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時,分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時滅菌,以為測定該批培養(yǎng)基好終pH之用。半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學(xué)試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。西藏培養(yǎng)基制備器售后
培養(yǎng)基制備器殺菌劑可從此口加入,也可用注射器從硅酮膜注入。四川培養(yǎng)基制備器哪家好
培養(yǎng)基:是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基的種類:培養(yǎng)基種類很多,根據(jù)配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基;根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基;根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等;根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、菌培養(yǎng)基等。四川培養(yǎng)基制備器哪家好
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