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馬鈴薯培養(yǎng)基的制作過程:(1)稱量和熬煮:按培養(yǎng)基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾,濾渣棄取。濾液補(bǔ)充水分到1000ml。(2)加熱溶解:把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉網(wǎng)上,小火加熱,并用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂完全溶解后,再補(bǔ)充水分至所需量。(3)分裝:按實(shí)訓(xùn)要求,將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶內(nèi)。分裝時(shí)可用三角漏斗以免使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上造成污染。分裝量:固體培養(yǎng)基約為試管高度的1/5,滅菌后制成斜面,分裝入三角瓶內(nèi)以不超過其容積的一半為宜;半固體培養(yǎng)基以試管高度的1/3為宜,滅菌后垂直待凝。(4)加棉塞:培養(yǎng)基分裝完畢后,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等),以阻止外界微生物進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)造成污染,并保證有良好的通氣性能。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng):一體化控制;主機(jī)和選配件(附加劑泵)可通過Mediafill觸摸屏一起控制。黑龍江觸摸屏培養(yǎng)基制備器
微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基制備的要點(diǎn):培養(yǎng)基溶化,將中海培養(yǎng)基納入燒杯容器中,加小適量的水,緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂,則不需要對(duì)培養(yǎng)基加熱;相反含有瓊脂,就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。待培養(yǎng)基完全溶解后再加入適量的水?dāng)嚢杈鶆?。如?zhǔn)備的北京中海培養(yǎng)基較多,在不銹鋼鍋中融化加熱,可以用溫水加熱,需不停攪拌,防止焦化。如果不小心出現(xiàn)焦化現(xiàn)象,則制備好的培養(yǎng)基將無法使用,必須重新配制中海生物培養(yǎng)基。不要使用銅或鐵容器溶解制備培養(yǎng)基,因?yàn)殂~或鐵容器可能會(huì)導(dǎo)致容器內(nèi)培養(yǎng)基中銅、鐵超標(biāo),影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,其中培養(yǎng)基中銅含量大于0.3毫克每升,細(xì)菌不適宜生長。鐵含量超過0.14毫克每升,防止細(xì)菌產(chǎn)生有毒的。容易發(fā)生反應(yīng)和沉淀的藥物應(yīng)單獨(dú)溶解,然后加入培養(yǎng)基中,如磷酸氫二鉀和硫酸鎂。自動(dòng)培養(yǎng)基制備器定制分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的徹底滅菌。
培養(yǎng)基配制--容器和水:配制培養(yǎng)基所用的容器不得影響培養(yǎng)基質(zhì)量,一般為玻璃容器,培養(yǎng)基配制所用的容器和配套器具應(yīng)潔凈,可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質(zhì)殘留。在大體積配制培養(yǎng)基時(shí),企業(yè)也可根據(jù)自己的情況采用不銹鋼容器,建議專鍋,且容器應(yīng)潔凈。不建議使用陶瓷或搪瓷容器。培養(yǎng)基用水是培養(yǎng)基制備過程中非常重要的一個(gè)物質(zhì)。不可以使用自來水,自來水中的雜質(zhì)可能會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果有一定的影響。許多法規(guī)在培養(yǎng)基配方中采用蒸餾水作為配制用水,實(shí)際上純化水的潔凈程度不差于蒸餾水,甚至更優(yōu),所以不必單獨(dú)制備蒸餾水,直接使用純化水即可,配制用純化水應(yīng)按藥典的要求定期進(jìn)行檢測(cè)。
簡(jiǎn)單制作培養(yǎng)基,需要完成以下幾個(gè)主要步驟:需要對(duì)其進(jìn)行消毒處理,普通介質(zhì)使用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘。本發(fā)明適用于各種介質(zhì)的制備,如無特殊要求,可用于滅菌。一些熱成分,如碳水化合物,應(yīng)該單獨(dú)制備20%或更多的濃縮液,過濾或間斷殺菌,然后通過無菌操作技術(shù)加入到培養(yǎng)液中。在低溫下,明膠培養(yǎng)基也能殺菌。血、體液及素應(yīng)經(jīng)無菌處理后,加至約50℃冷卻培養(yǎng)基中。需要對(duì)培養(yǎng)基的質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè)。每次處理完培養(yǎng)基,都要仔細(xì)檢查,如破損、浸漬、顏色異常、棉塞污染等,要進(jìn)行篩選和棄置,才能確定pH值。培養(yǎng)基培養(yǎng)一晚,若有細(xì)菌生長,培養(yǎng)基將被丟棄。常規(guī)菌株接種1×2管或瓶培養(yǎng)基,24h培養(yǎng),對(duì)生長不良或無菌的菌株進(jìn)行培養(yǎng),追蹤其產(chǎn)生原因,并反復(fù)接種。如不發(fā)生變化,應(yīng)丟棄培養(yǎng)基,禁止使用。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應(yīng)折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。
培養(yǎng)基配置原則:選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì),總體而言,所有微生物生長繁殖均需要培養(yǎng)基含有碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子、水及能源,但由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜,不同微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的需求是不一樣的,因此首先要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物能從簡(jiǎn)單的無機(jī)物合成自身需要的糖類、脂類、蛋白質(zhì)、核酸、維生素等復(fù)雜的有機(jī)物,因此培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基完全可以(或應(yīng)該)由簡(jiǎn)單的無機(jī)物組成。在該培養(yǎng)基配制過程中并未專門加入其他碳源物質(zhì),而是依靠空氣中和溶于水中的CO2為氧化硫硫桿菌提供碳源。就微生物主要類型而言,有細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌、原生動(dòng)物、藻類及病毒之分,培養(yǎng)它們所需的培養(yǎng)基各不相同。在實(shí)驗(yàn)室中常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(或簡(jiǎn)稱普通肉湯培養(yǎng)基)培養(yǎng)細(xì)菌,用高氏I號(hào)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)放線菌,培養(yǎng)酵母菌一般用麥芽汁培養(yǎng)基,培養(yǎng)霉菌則一般用查氏合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)基制備器利用與外部水連接的盤狀熱交換器,能夠使內(nèi)部迅速冷卻。實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備器哪個(gè)品牌好
干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。黑龍江觸摸屏培養(yǎng)基制備器
配制培養(yǎng)基應(yīng)遵循的幾個(gè)原則:1、目的明確:培養(yǎng)不同的微生物必須采用不同的培養(yǎng)條件;培養(yǎng)目的不同,原料的選擇和配比不同;2、營養(yǎng)協(xié)調(diào):微生物細(xì)胞組成元素的調(diào)查或分析,是設(shè)計(jì)培養(yǎng)基時(shí)的重要參考依據(jù),微生物細(xì)胞內(nèi)各種成分間有一較穩(wěn)定的比例。3、理化適宜:指培養(yǎng)基的pH值、滲透壓、水活度和氧化還原電勢(shì)等物理化學(xué)條件較為適宜。4、經(jīng)濟(jì)節(jié)約:配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)盡量利用廉價(jià)且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成份,特別是在發(fā)酵工業(yè)中,以降低生產(chǎn)成本。黑龍江觸摸屏培養(yǎng)基制備器
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