熒光微球分析技術(shù)屬于化學(xué)材料發(fā)展結(jié)果,可用于細胞表面抗原的檢測、退行性神經(jīng)病變示蹤物、吞噬功能的檢測、血流分析、敏感性診斷試劑等,本文介紹了熒光微球分析技術(shù)以及熒光微球吞噬實驗的操作步驟。 熒光微球分析 技術(shù)簡介 熒光微球分析技術(shù)是近年來化學(xué)材料科學(xué)活躍發(fā)展 的產(chǎn)物,各種大小(0.2~10μm)可產(chǎn)生熒光和色彩的人工微球應(yīng)運而生,目前各種材料人工合成、多種顏色和規(guī)格的熒光微球有2大類,一種是表面不帶修飾基團的微球,另一種是攜帶各種化學(xué)修飾基團,包括羧基化修飾、氨基修飾、巰基或醛巰基修飾等的微球。 蘇州銷售診斷微球
在水處理領(lǐng)域:功能性的微球可以除去水里有機雜質(zhì)和金屬離子成分,可制備用在半導(dǎo) 體工業(yè),醫(yī)藥,核工業(yè)等的超純水,也可用于凈化日常飲用水。水為人類洗滌了污穢, 微球卻可以鏟除水里的污穢,到達凈化水的目的。 在血液凈化領(lǐng)域:微球可以替代腎臟用來去除血液0物質(zhì),***和延長病人壽命。 微球是制造人工腎的關(guān)鍵材料。 在計量領(lǐng)域:粒徑高度均一的微球可以作為標準顆粒用于精確測量常規(guī)尺子無法計量的 納米尺寸的物質(zhì),標準顆粒作為計量工具也可用于矯正精密計量儀器。 在醫(yī)療診斷領(lǐng)域:功能化微球如磁性微球,多色熒光編碼微球可***地應(yīng)用于免疫分析, 進行多樣品或多標靶的高通量檢測。由于微球的使用,使我們可以更快速,方便地進行疾 病檢測和診斷。 在生物技術(shù)領(lǐng)域:微球由于具有極高的表面積并且容易分散在培養(yǎng)液中,因此在動物細胞 培養(yǎng)上,微球作為動物細胞載體能夠提供大量的比表面積讓細胞在其表面生產(chǎn),微球作為 動物細胞培養(yǎng)的載體,能夠在有限的空間實現(xiàn)細胞的高密度培養(yǎng),而且控制簡單,生產(chǎn)重 復(fù)性好。診斷微球銷售廠家
前段時間科技日報總編劉亞東列出包括芯片,飛機發(fā)動機等在內(nèi)的35項中國給人卡脖子的技術(shù), 其中微球材料也是其中之一。大多數(shù)人可能很容易理解芯片和飛機發(fā)動機的技術(shù)難度及其重要性 ,但很少人可以理解微球為什么也這么重要這么難做。我們所熟知的宏觀球體如籃球,乒乓球, 玻璃珠是如此之普通,而微球只不過是把這些球體做到足夠“小”而已,為什么中國這么一個 大的一個***卻做不了。其實很多技術(shù)的難度都是因為“小”造成的。芯片之所以難做就是因 為里面的結(jié)構(gòu)要精細控制到納米尺寸。乒乓球可以很容易通過模具做出來,而要把乒乓球做到 納米和微米范圍的尺度其實難度是很大的。在微觀尺度下,大家習(xí)以為常的宏觀工具和制作技 術(shù)已完全不適用,需要全新的技術(shù)手段,使得宏觀很容易的事情在微觀變成高不可攀的技術(shù)難 題。當(dāng)然也正是因為小,讓微球材料性能得到大幅度的提升,比如說微球表面效應(yīng)和體積效應(yīng),一個乒乓球直徑40毫米,重量2-3克。如果把乒乓球做到直徑40納米微球,由于1毫米是106納米,因此一個普通乒乓球就可以做出1018個直徑40納米微球。其表面積有5000多平米,相當(dāng)與5個足球場大小,同樣重量的40納米微球與40毫米乒乓球相比表面積增加了1012倍,因此納米微
利用超細的固體顆??梢源姹砻婊钚詣┓€(wěn)定地存在于油/水界面,能阻止分散的油(水)微滴再次凝聚為大液滴而分相,起到了穩(wěn)定乳液的作用。Yin等用溫和的Pickering乳液聚合法一步制備PS/Fe3O4高磁性微球。用溴化十六烷基三甲銨(CTAB)改性的Fe3O4粒子作為穩(wěn)定劑(錨定在聚合物外層),完全疏水的油酸改性的Fe3O4粒子則被包埋在微球中。
Liu等首先利用無皂乳液法制備油酸包裹的Fe3O4納米粒子,再利用種子乳液聚合法制備了P(MMA-DVB(二乙烯基苯)-GMA)/Fe3O4磁性復(fù)合微球,***在微球表面接枝聚酰胺(PAMAM)(圖1)。所得的接枝聚酰胺磁性高分子微球的比飽和磁化強度為4.9A·m2/kg,遠低于純磁性納米粒子,分析可能是微球的殼層比較厚所致.
亞微米(50~500nm)液滴構(gòu)成的穩(wěn)定的液/液分散體系稱為細乳液,在穩(wěn)定的細乳液聚合中,細乳液液滴是主要的成核點即聚合場所,聚合前液滴的數(shù)目和大小在聚合過程中基本保持不變,決定了**終的乳膠粒的數(shù)目和尺寸,不像常規(guī)聚合由聚合動力學(xué)決定。Zhang等[14]通過細乳液聚合法制備P(St-MMA)/Fe3O4復(fù)合微球,磁性微球的比飽和磁化強度達到51.0A·m2/kg,磁性Fe3O4納米粒子的含量達到61.5wt%。
寸的單乳液滴和多重乳液液滴的技術(shù)。
前段時間科技日報總編劉亞東列出包括芯片,飛機發(fā)動機等在內(nèi)的35項中國給人卡脖子的技術(shù),
其中微球材料也是其中之一。大多數(shù)人可能很容易理解芯片和飛機發(fā)動機的技術(shù)難度及其重要性
,但很少人可以理解微球為什么也這么重要這么難做。我們所熟知的宏觀球體如籃球,乒乓球,
玻璃珠是如此之普通,而微球只不過是把這些球體做到足夠“小”而已,為什么中國這么一個
大的一個***卻做不了。其實很多技術(shù)的難度都是因為“小”造成的。芯片之所以難做就是因
為里面的結(jié)構(gòu)要精細控制到納米尺寸。乒乓球可以很容易通過模具做出來,而要把乒乓球做到
納米和微米范圍的尺度其實難度是很大的。在微觀尺度下,大家習(xí)以為常的宏觀工具和制作技
術(shù)已完全不適用,需要全新的技術(shù)手段,使得宏觀很容易的事情在微觀變成高不可攀的技術(shù)難
題。當(dāng)然也正是因為小,讓微球材料性能得到大幅度的提升,比如說微球表面效應(yīng)和體積效應(yīng),
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這些熒光微球正廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究的多個領(lǐng)域中,如: (1)細胞表面抗原的檢測,包括CD4/CD8表面抗原的***計數(shù);細胞表面低豐度表達受體的分析;骨髓移植受體內(nèi)供體紅細胞的檢測;白色***抗原檢測等。 (2)退行性神經(jīng)病變示蹤物,熒光微球具有***、與神經(jīng)細胞結(jié)合時間長以及受注射部位影響極小的特點。 (3)吞噬功能的檢測,0.6~2.0μm大小的熒光微球適合于這一類的研究,如分析大鼠中性粒細胞、人橫紋導(dǎo)管細胞、小鼠腹膜巨噬細胞、人多核白細胞的吞噬功能或不同調(diào)理素調(diào)理作用對吞噬功能的影響等。 (4)血流分析,10-15 μm大小7種顏色的熒光可供研究組織中局部血流情況,如**脈管血流速率、視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜循環(huán)、肺泡微管的功能直徑定位等。 (5)敏感性診斷試劑,如替代一些已開展應(yīng)用的微球診斷試驗:膠乳凝集試驗、微球捕獲ELASA、雙位點夾心法等,它較傳統(tǒng)比色方法更為靈敏;另有新近誕生的流式微球分析技術(shù)(Cytometric Bead Array CBA)通過將不同熒光強度的聚苯乙烯微球包被上多種高特異性的單克隆抗體,在微球“三明治”平臺上進行可溶性蛋白的檢測,由此而使得1份微量標本可同時1次定量分析多種可溶性蛋白,**節(jié)約了樣本量和操作時間,靈敏度也較傳統(tǒng)的ELISA蘇州銷售診斷微球
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