在水處理領(lǐng)域:功能性的微球可以除去水里有機(jī)雜質(zhì)和金屬離子成分,可制備用在半導(dǎo) 體工業(yè),醫(yī)藥,核工業(yè)等的超純水,也可用于凈化日常飲用水。水為人類(lèi)洗滌了污穢, 微球卻可以鏟除水里的污穢,到達(dá)凈化水的目的。 在血液凈化領(lǐng)域:微球可以替代腎臟用來(lái)去除血液0物質(zhì),***和延長(zhǎng)病人壽命。 微球是制造人工腎的關(guān)鍵材料。 在計(jì)量領(lǐng)域:粒徑高度均一的微球可以作為標(biāo)準(zhǔn)顆粒用于精確測(cè)量常規(guī)尺子無(wú)法計(jì)量的 納米尺寸的物質(zhì),標(biāo)準(zhǔn)顆粒作為計(jì)量工具也可用于矯正精密計(jì)量?jī)x器。 在醫(yī)療診斷領(lǐng)域:功能化微球如磁性微球,多色熒光編碼微球可***地應(yīng)用于免疫分析, 進(jìn)行多樣品或多標(biāo)靶的高通量檢測(cè)。由于微球的使用,使我們可以更快速,方便地進(jìn)行疾 病檢測(cè)和診斷。 在生物技術(shù)領(lǐng)域:微球由于具有極高的表面積并且容易分散在培養(yǎng)液中,因此在動(dòng)物細(xì)胞 培養(yǎng)上,微球作為動(dòng)物細(xì)胞載體能夠提供大量的比表面積讓細(xì)胞在其表面生產(chǎn),微球作為 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的載體,能夠在有限的空間實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的高密度培養(yǎng),而且控制簡(jiǎn)單,生產(chǎn)重 復(fù)性好。鄭州分離純化微球哪家強(qiáng)
磁性高分子微球的制備
目前制備磁性高分子納米微球的方法主要分為五類(lèi),其主要包括:包埋法、原位法、單體聚合法、界面沉積法及自組裝法。
2.1包埋法
包埋法是將聚合物溶解在含有磁性超微粒子的溶液中,然后加入大量的沉淀劑,通過(guò)交聯(lián)、絮凝、霧化、沉積、蒸發(fā)等手段使高分子物質(zhì)沉析在磁性粒子表面形成具有核殼結(jié)構(gòu)的復(fù)合微球。高分子物質(zhì)與磁性粒子主要通過(guò)范德華力、氫鍵、螯合作用或共價(jià)鍵等作用力結(jié)合。Li等通過(guò)化學(xué)共沉淀法合成納米粒子Fe3O4磁核,以殼聚糖為包裹材料包被自制的磁核,采用乳化交聯(lián)法制備了具有核-殼結(jié)構(gòu)的磁性高分子微球-殼聚糖磁性微球,并偶聯(lián)肝素配基得到了一種新型親和磁性微球。所得親和磁性微球具有較窄的粒徑分布、形狀規(guī)整,粒徑在50nm左右。將磁分離技術(shù)應(yīng)用于凝血酶的分離純化,得到了較好的效果(酶比活達(dá)1879.71U/mg,得率85%,純化倍數(shù)11.057,為傳統(tǒng)柱層析法的兩倍)。Chi?riuc等將含F(xiàn)e2+和Fe3+溶液逐滴加入殼聚糖的NaOH溶液中制的可用于負(fù)載頭孢霉素的磁性殼聚糖微球。
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寸的單乳液滴和多重乳液液滴的技術(shù)。
前段時(shí)間科技日?qǐng)?bào)總編劉亞?wèn)|列出包括芯片,飛機(jī)發(fā)動(dòng)機(jī)等在內(nèi)的35項(xiàng)中國(guó)給人卡脖子的技術(shù),
其中微球材料也是其中之一。大多數(shù)人可能很容易理解芯片和飛機(jī)發(fā)動(dòng)機(jī)的技術(shù)難度及其重要性
,但很少人可以理解微球?yàn)槭裁匆策@么重要這么難做。我們所熟知的宏觀球體如籃球,乒乓球,
玻璃珠是如此之普通,而微球只不過(guò)是把這些球體做到足夠“小”而已,為什么中國(guó)這么一個(gè)
大的一個(gè)***卻做不了。其實(shí)很多技術(shù)的難度都是因?yàn)椤靶 痹斐傻?。芯片之所以難做就是因
為里面的結(jié)構(gòu)要精細(xì)控制到納米尺寸。乒乓球可以很容易通過(guò)模具做出來(lái),而要把乒乓球做到
納米和微米范圍的尺度其實(shí)難度是很大的。在微觀尺度下,大家習(xí)以為常的宏觀工具和制作技
術(shù)已完全不適用,需要全新的技術(shù)手段,使得宏觀很容易的事情在微觀變成高不可攀的技術(shù)難
題。當(dāng)然也正是因?yàn)樾。屛⑶虿牧闲阅艿玫酱蠓鹊奶嵘?,比如說(shuō)微球表面效應(yīng)和體積效應(yīng),
一個(gè)乒乓球直徑40毫米,重量2-3克。如果把乒乓球做到直徑40納米微球,由于1毫米是106納米,
因此一個(gè)普通乒乓球就可以做出1018個(gè)直徑40納米微球。其表面積有5000多平米,相當(dāng)與5個(gè)足
球場(chǎng)大小,同樣重量的40納米微球與40毫米乒乓球相比表面積增加了1012倍,因此納米微球
表面吸附能力也增加了1012倍。當(dāng)尺寸變小,表面吸附能力大幅度增加還是一個(gè)物理量變的過(guò)程,
而某些物質(zhì)小到一定程度時(shí),其性能還會(huì)出現(xiàn)質(zhì)的變化。比如說(shuō)量子點(diǎn)就是有一類(lèi)物質(zhì)當(dāng)尺寸小到
納米尺度時(shí),這些物質(zhì)就會(huì)發(fā)生質(zhì)的變化,由原本不發(fā)光的物質(zhì)變成會(huì)發(fā)光的物質(zhì),而且發(fā)光的顏
色或波長(zhǎng)與尺寸還有關(guān)系。因此只要控制這些物質(zhì)的尺寸就可以控制這類(lèi)物質(zhì)的發(fā)光波長(zhǎng)。材質(zhì)不
變,只依靠尺寸的變化就可以改變其性能的巨大變化就是納米技術(shù)領(lǐng)域興起的重要原因之一。另外
一個(gè)案例也可以說(shuō)明這個(gè)問(wèn)題。一個(gè)普通塑料(聚苯乙烯)組成的微球,當(dāng)其尺寸與光的波長(zhǎng)相當(dāng)
包埋法方法簡(jiǎn)單,由于適用的多為水溶性天然高分子,因此其生物相容性好,表面富含多種功能基團(tuán),容易直接偶聯(lián)生物大分子,但是其主要缺點(diǎn)是制備的微球粒徑分布寬,形狀不規(guī)則,磁粒子在不同微粒內(nèi)含量不均一,各微球磁響應(yīng)能力差別大,在外環(huán)境中易發(fā)生磁泄漏。而且包覆的殼層中難免會(huì)有些乳化劑之類(lèi)的雜質(zhì),使其在生物醫(yī)用等領(lǐng)域的應(yīng)用受到一定的限制。
2.2原位法
原位法是一種制備彌散型結(jié)構(gòu)磁性高分子復(fù)合微球的方法,該方法主要步驟如下:首先制備出多孔型高分子微球,然后通過(guò)磺化或硝化處理,使高分子微球能與鐵、猛、鈷等金屬離子具有親和性,***將制備的微球中加入鐵鹽,在堿性條件氧化沉淀鐵離子,使得磁性粒子在高分子微球的孔中生成,**終得到磁性復(fù)合微球。Ugelstad等釆用此法制備出磁性高分子微球且開(kāi)發(fā)了一系列已商品化的產(chǎn)品(Dynabeeds),并在微生物免疫學(xué)、分子生物學(xué)和**等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。
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摘要: 本發(fā)明提供了一種磁性微球分離純化納豆激酶的方法。將表面偶聯(lián)有親和配基的磁性微球加入到納豆激酶的發(fā)酵液中,在室溫下緩慢攪拌充分混合,使納豆激酶特異性地吸附在磁性微球表面;采用磁鐵將吸附有納豆激酶的磁性微球從發(fā)酵液中分離出來(lái),用緩沖溶液清洗一次去除雜質(zhì),再用解析液進(jìn)行解析,收集到納豆激酶的洗脫液;***經(jīng)過(guò)冷凍干燥得到納豆激酶產(chǎn)品。分離后納豆激酶的活力為85%,純化因子為6.0。本發(fā)明具有周期短、操作簡(jiǎn)單、生產(chǎn)成本低且易于規(guī)?;a(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。 利要求: 一種磁性微球分離純化納豆激酶的方法,其特征在于,所述的納豆激酶分離純化方法包括以下幾個(gè)步驟:(1)納豆激酶發(fā)酵液的制備從固體培養(yǎng)基上挑取納豆激酶的單菌落接入20-100mL的種子培養(yǎng)基中,搖床中培養(yǎng)12-24h,按2%-6% 接種量接入發(fā)酵液體培養(yǎng)基中,在25-37℃下發(fā)酵罐培養(yǎng)24-48h,液體發(fā)酵結(jié)束后,通過(guò)離心除去菌體,得到納豆激酶發(fā)酵液;(2)親和配基在磁性微球上的固定化將自制的磁性高分子微球進(jìn)行表面功能化修飾得到表面含有環(huán)氧功能基團(tuán)的磁 性微球,在50-80℃條件下,以氫氧化鈉為催化劑,進(jìn)行親和配基的固定化反應(yīng),獲得表面含有親和鄭州分離純化微球哪家強(qiáng)
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