目前市場上采用免疫比濁法的膠乳免疫比濁試劑產(chǎn)品有:(1)腦肭肽檢測試劑;(2)α1-微球蛋白檢測試劑;(3)糖化血紅蛋白檢測試劑;(4)脂蛋白a?檢測試劑;(5)高敏C-反應(yīng)蛋白檢測試劑;(6)C-反應(yīng)蛋白檢測試劑;(7)抗鏈球菌溶血素“O”檢測試劑;(8)視黃醇結(jié)合蛋白檢測試劑;(9)類風(fēng)濕因子檢測試劑;(10)β2-微球蛋白檢測試劑;(11)中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白檢測試劑;(12)D-二聚體檢測試劑;(13)CK-MB?檢測試劑;(14)胱抑素C?檢測試劑;(15)肌紅蛋白檢測試劑;(16)甲胎蛋白檢測試劑;(17)肌鈣蛋白檢測試劑;(18)心型脂肪酸結(jié)合蛋白檢測試劑;等等。廣州羧基微球
包埋法方法簡單,由于適用的多為水溶性天然高分子,因此其生物相容性好,表面富含多種功能基團(tuán),容易直接偶聯(lián)生物大分子,但是其主要缺點(diǎn)是制備的微球粒徑分布寬,形狀不規(guī)則,磁粒子在不同微粒內(nèi)含量不均一,各微球磁響應(yīng)能力差別大,在外環(huán)境中易發(fā)生磁泄漏。而且包覆的殼層中難免會有些乳化劑之類的雜質(zhì),使其在生物醫(yī)用等領(lǐng)域的應(yīng)用受到一定的限制。
2.2原位法
原位法是一種制備彌散型結(jié)構(gòu)磁性高分子復(fù)合微球的方法,該方法主要步驟如下:首先制備出多孔型高分子微球,然后通過磺化或硝化處理,使高分子微球能與鐵、猛、鈷等金屬離子具有親和性,***將制備的微球中加入鐵鹽,在堿性條件氧化沉淀鐵離子,使得磁性粒子在高分子微球的孔中生成,**終得到磁性復(fù)合微球。Ugelstad等釆用此法制備出磁性高分子微球且開發(fā)了一系列已商品化的產(chǎn)品(Dynabeeds),并在微生物免疫學(xué)、分子生物學(xué)和**等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。
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利用超細(xì)的固體顆??梢源姹砻婊钚詣┓€(wěn)定地存在于油/水界面,能阻止分散的油(水)微滴再次凝聚為大液滴而分相,起到了穩(wěn)定乳液的作用。Yin等用溫和的Pickering乳液聚合法一步制備PS/Fe3O4高磁性微球。用溴化十六烷基三甲銨(CTAB)改性的Fe3O4粒子作為穩(wěn)定劑(錨定在聚合物外層),完全疏水的油酸改性的Fe3O4粒子則被包埋在微球中。
Liu等首先利用無皂乳液法制備油酸包裹的Fe3O4納米粒子,再利用種子乳液聚合法制備了P(MMA-DVB(二乙烯基苯)-GMA)/Fe3O4磁性復(fù)合微球,***在微球表面接枝聚酰胺(PAMAM)(圖1)。所得的接枝聚酰胺磁性高分子微球的比飽和磁化強(qiáng)度為4.9A·m2/kg,遠(yuǎn)低于純磁性納米粒子,分析可能是微球的殼層比較厚所致.
亞微米(50~500nm)液滴構(gòu)成的穩(wěn)定的液/液分散體系稱為細(xì)乳液,在穩(wěn)定的細(xì)乳液聚合中,細(xì)乳液液滴是主要的成核點(diǎn)即聚合場所,聚合前液滴的數(shù)目和大小在聚合過程中基本保持不變,決定了**終的乳膠粒的數(shù)目和尺寸,不像常規(guī)聚合由聚合動力學(xué)決定。Zhang等[14]通過細(xì)乳液聚合法制備P(St-MMA)/Fe3O4復(fù)合微球,磁性微球的比飽和磁化強(qiáng)度達(dá)到51.0A·m2/kg,磁性Fe3O4納米粒子的含量達(dá)到61.5wt%。
一個乒乓球直徑40毫米,重量2-3克。如果把乒乓球做到直徑40納米微球,由于1毫米是106納米,
因此一個普通乒乓球就可以做出1018個直徑40納米微球。其表面積有5000多平米,相當(dāng)與5個足
球場大小,同樣重量的40納米微球與40毫米乒乓球相比表面積增加了1012倍,因此納米微球
表面吸附能力也增加了1012倍。當(dāng)尺寸變小,表面吸附能力大幅度增加還是一個物理量變的過程,
而某些物質(zhì)小到一定程度時,其性能還會出現(xiàn)質(zhì)的變化。比如說量子點(diǎn)就是有一類物質(zhì)當(dāng)尺寸小到
納米尺度時,這些物質(zhì)就會發(fā)生質(zhì)的變化,由原本不發(fā)光的物質(zhì)變成會發(fā)光的物質(zhì),而且發(fā)光的顏
色或波長與尺寸還有關(guān)系。因此只要控制這些物質(zhì)的尺寸就可以控制這類物質(zhì)的發(fā)光波長。材質(zhì)不
變,只依靠尺寸的變化就可以改變其性能的巨大變化就是納米技術(shù)領(lǐng)域興起的重要原因之一。另外
一個案例也可以說明這個問題。一個普通塑料(聚苯乙烯)組成的微球,當(dāng)其尺寸與光的波長相當(dāng)
我們要明白水和液態(tài)氨并不等同,它們**類似而已。兩個體系內(nèi)的許多生命化學(xué)特征必定會出現(xiàn)不少差異。例如,莫爾頓(Molton)提出,氨基生命形態(tài)可能會使用銫和銣的氯化物來調(diào)整細(xì)胞膜的電勢,同地球生命使用的鉀鹽和鈉鹽相比,這些鹽在液態(tài)氨里面的可溶性更好。看來,銫和銣的氯化物在氨基生命的外星人那里恐怕會是美味的調(diào)料,就如同我們?nèi)祟愑寐然c作為食鹽當(dāng)調(diào)料一樣。但銫和銣的豐度遠(yuǎn)不如鉀和鈉,那里的人們是否會為了美味的調(diào)料發(fā)動呢?這應(yīng)該是有趣的話題。天津羧基微球
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2.3表面引發(fā)活性聚合法
表面引發(fā)活性活性聚合法是指通過一定的方法使自由基活性種鍵合到磁性粒子表面,然后引發(fā)單體聚合的一種方法,其比較大特點(diǎn)是可以控制聚合物分子量及得到窄分子量的聚合物,容易實(shí)現(xiàn)對磁性聚合物微粒粒徑的均一可控以及聚合物層的厚度控制及功能化。常見的表面引發(fā)活性聚合法主要包括:氮氧穩(wěn)定自由基(NMRP)、可逆加成斷裂鏈轉(zhuǎn)移聚合聚合法(RAFT)、原子轉(zhuǎn)移自由基聚合法(ATRP)[21]、活性開環(huán)聚合等。
陳志軍等采用化學(xué)共沉淀法合成了Fe3O4納米粒子,然后用3-甲基丙稀酷氧基三甲氧基硅院(3-MPS)對其表面改性引入雙鍵,然后以苯乙稀為卑體,4-經(jīng)基-2,2,6,6-四甲基呢淀-1-氧化物自由基(HTEMPO)為穩(wěn)定自由基介質(zhì),采用可控“活性”自由基聚合在納米粒子表面原位引發(fā)聚合制備了粒徑為20-30nm,磁含量為62.6%的磁性聚苯乙稀復(fù)合納米粒子。
Qin先制備了含有RAFT鏈轉(zhuǎn)移劑的S-節(jié)基-S’-三甲氧基桂基丙基三硫碳酸醋(BTPT),并對共沉淀法制備的Fe3O4納米粒子表面進(jìn)行改性得到表面負(fù)載RAFT試劑的磁性納米粒子,然后在其表面引發(fā)聚乙二醇甲基丙稀酸酯聚合。由于表面聚乙二醇的生物相容性,其對牛血清蛋白,溶菌酶及球蛋白無特異性吸附,說明其在納米顆粒在體內(nèi)有較長循環(huán)時間,在***輸送和釋放等方面具有潛在的應(yīng)用。
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