2.3.2懸浮聚合
懸浮聚合法是單體小液滴懸浮在水中的聚合方法，在磁性粒子、穩(wěn)定劑和表面活性劑存在下、靠油溶性引發(fā)劑的作用使一種或幾種單體在磁性粒子表面聚合可將磁性粒子包裹在聚合物中。與乳液聚合相比，懸浮聚合單體液滴粒徑通常是微米級(jí)別的。Li等[17]合成一種新型的核殼式P(DVB-MAA)/Fe3O4納米復(fù)合微球，可作為分散模式的磁介導(dǎo)微觀粒子的固相萃取吸附劑。Fe3O4納米粒子通過(guò)溶劑熱法制備，P(DVB-MAA)通過(guò)懸浮聚合合成，微球的平均粒徑在300~700nm，微球殼層的P(DVB-MAA)厚度在10nm左右。該微球可用于水中微量的有機(jī)污染物的快速、高靈敏檢測(cè)。
2.3分散聚合
分散聚合是懸浮聚合的一種，也是一種特殊的沉淀聚合，反應(yīng)之前單體、溶劑、穩(wěn)定劑、引發(fā)劑等是均一的混合體系，當(dāng)反應(yīng)開(kāi)始，聚合物達(dá)到一定分子量之后，聚合物逐漸從反應(yīng)體系中沉淀出來(lái)。Zhang等合成了Fe3O4含量高達(dá)70wt%、且分布比較均一的P(St–GMA)/Fe3O4的納米復(fù)合微球。由于只有當(dāng)磁性粒子在反應(yīng)初期成核過(guò)程中捕獲，并聚合增長(zhǎng)才能得到復(fù)合微球，因此此方法的磁含量往往不高，且該法需使用的溶劑多為有機(jī)溶劑，聚合物與有機(jī)溶劑的親和性導(dǎo)致聚合物沉淀出時(shí)鏈長(zhǎng)較長(zhǎng)，粒徑較大，限制了其應(yīng)用。
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常用的純化方法冷凍結(jié)晶法 冷凍結(jié)晶法是在低溫的條件下，依據(jù)混合脂肪酸各組分的凝固點(diǎn)差異進(jìn)行純化，進(jìn)而達(dá)到純化多不飽和脂肪酸的目的。將混合脂肪酸溶解在**或乙醇中，置于低溫下，在溶液中短鏈脂肪酸較長(zhǎng)鏈脂肪酸的溶解度低，飽和脂肪酸較不飽和脂肪酸的溶解度低，這種溶解度差異隨溫度降低表現(xiàn)更為。 冷凍結(jié)晶法工藝原理簡(jiǎn)單，操作方便，有效成分不易發(fā)生變性反應(yīng)。但其操作過(guò)程中溫度要求苛刻，需要回收大量的有機(jī)溶劑，純化效率不高，這限制了大規(guī)模的生產(chǎn)，但可以用于生產(chǎn)低成本的保健品類，從而滿足中低層消費(fèi)者的需求。青島質(zhì)量分離純化微球
如何制作納米微球呢？ 離子交聯(lián)法是制作納米微球的基本方法之一，適用于以殼聚糖、海藻酸鈉等 為材料的納米微球。其主要原理是作為***載體的材料通過(guò)離子交聯(lián)法從乳 液中析出，同時(shí)通過(guò)氫鍵相互作用和疏水相互作用將***包埋在載體中，從 而制備成載藥微球。該方法制備條件溫和，整個(gè)過(guò)程不使用對(duì)人體有害的試 劑，也成為載藥微球的理想制備方法之一。 納米微球的典型制備方法還有“乳化-溶劑揮發(fā)法”和“微流控法”。“乳 化-溶劑揮發(fā)法”是將模型***先溶解于有機(jī)溶劑中,然后滴加到含有表面活 性劑的水相中,在均質(zhì)機(jī)的高速剪切下形成油相/水相型乳液,再通過(guò)常壓或減 壓方式除去乳液分散相中的揮發(fā)性有機(jī)溶劑,使納米粒硬化,***通過(guò)冷凍干 燥從水性混懸液中收集納米粒?！拔⒘骺胤ā笔且环N在微米尺度的通道中操 控兩種或幾種互不相溶的微小體積液體,連續(xù)、可控地生產(chǎn)具有高度單分散尺 寸的單乳液滴和多重乳液液滴的技術(shù)。
多克隆抗體的純化 多抗的純化是一件比較簡(jiǎn)單的事情，因?yàn)槿斯じ深A(yù)比較大，所以對(duì)實(shí)驗(yàn)者的操作依賴性較強(qiáng)。很多新手覺(jué)得這是一件比較復(fù)雜困難的工作，但是如果理解了原理，就可以自行改進(jìn)實(shí)驗(yàn)了。多抗純化方法比較多，過(guò)去有用鹽析法純化的，有用辛酸-銨沉淀的方式純化的，也有用冷酒精沉淀的方式純化的，也有后來(lái)的離子交換層析和Protein A,G,A/G純化的，但是在，市場(chǎng)上幾乎所有的抗體都是通過(guò)抗原親和純化得到的，與其它方法相比，抗原親和層析得到的抗體效率高、產(chǎn)量高、產(chǎn)品純、操作簡(jiǎn)單。 步驟如下： 1、介質(zhì)的制備 2、抗原與填料的連接 3、連接效果的評(píng)估 4、多余位點(diǎn)的封閉 5、抗血清與beads的結(jié)合 6、非特異性結(jié)合的抗體的洗滌 7、洗脫 具體 操作與原理可以看看中國(guó)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)網(wǎng)上的詳細(xì)講解。
磁性高分子微球的制備
目前制備磁性高分子納米微球的方法主要分為五類，其主要包括：包埋法、原位法、單體聚合法、界面沉積法及自組裝法。
2.1包埋法
包埋法是將聚合物溶解在含有磁性超微粒子的溶液中，然后加入大量的沉淀劑，通過(guò)交聯(lián)、絮凝、霧化、沉積、蒸發(fā)等手段使高分子物質(zhì)沉析在磁性粒子表面形成具有核殼結(jié)構(gòu)的復(fù)合微球。高分子物質(zhì)與磁性粒子主要通過(guò)范德華力、氫鍵、螯合作用或共價(jià)鍵等作用力結(jié)合。Li等通過(guò)化學(xué)共沉淀法合成納米粒子Fe3O4磁核，以殼聚糖為包裹材料包被自制的磁核，采用乳化交聯(lián)法制備了具有核-殼結(jié)構(gòu)的磁性高分子微球-殼聚糖磁性微球，并偶聯(lián)肝素配基得到了一種新型親和磁性微球。所得親和磁性微球具有較窄的粒徑分布、形狀規(guī)整，粒徑在50nm左右。將磁分離技術(shù)應(yīng)用于凝血酶的分離純化，得到了較好的效果（酶比活達(dá)1879.71U/mg，得率85%，純化倍數(shù)11.057，為傳統(tǒng)柱層析法的兩倍）。Chi?riuc等將含F(xiàn)e2+和Fe3+溶液逐滴加入殼聚糖的NaOH溶液中制的可用于負(fù)載頭孢霉素的磁性殼聚糖微球。
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微球是直徑在納米和微米尺度范圍的球型粒子。球形物體是自然界存在**穩(wěn)定的物質(zhì)形態(tài)， 它是三維幾何空間理想的對(duì)稱體，也是單位體積中所有立體形態(tài)中面積**小的。自然界大 到星球如地球，小到籃球，乒乓球，玻璃珠等都是球體。 地球直徑是1.28萬(wàn)千米，而籃球 直徑是0.25米，1納米等于十億分之一米，相當(dāng)于一根頭發(fā)絲橫切面的六萬(wàn)分之一，如果拿 納米的微球與籃球相比，就相當(dāng)于籃球與地球之比例。 如此之小的納米微球材料卻是現(xiàn)代 產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要基礎(chǔ)。上海專業(yè)分離純化微球
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