常用的純化方法冷凍結(jié)晶法 冷凍結(jié)晶法是在低溫的條件下，依據(jù)混合脂肪酸各組分的凝固點(diǎn)差異進(jìn)行純化，進(jìn)而達(dá)到純化多不飽和脂肪酸的目的。將混合脂肪酸溶解在**或乙醇中，置于低溫下，在溶液中短鏈脂肪酸較長(zhǎng)鏈脂肪酸的溶解度低，飽和脂肪酸較不飽和脂肪酸的溶解度低，這種溶解度差異隨溫度降低表現(xiàn)更為。 冷凍結(jié)晶法工藝原理簡(jiǎn)單，操作方便，有效成分不易發(fā)生變性反應(yīng)。但其操作過(guò)程中溫度要求苛刻，需要回收大量的有機(jī)溶劑，純化效率不高，這限制了大規(guī)模的生產(chǎn)，但可以用于生產(chǎn)低成本的保健品類，從而滿足中低層消費(fèi)者的需求。質(zhì)量分離純化微球哪家專業(yè)
2.3表面引發(fā)活性聚合法
表面引發(fā)活性活性聚合法是指通過(guò)一定的方法使自由基活性種鍵合到磁性粒子表面，然后引發(fā)單體聚合的一種方法，其比較大特點(diǎn)是可以控制聚合物分子量及得到窄分子量的聚合物，容易實(shí)現(xiàn)對(duì)磁性聚合物微粒粒徑的均一可控以及聚合物層的厚度控制及功能化。常見(jiàn)的表面引發(fā)活性聚合法主要包括：氮氧穩(wěn)定自由基(NMRP)、可逆加成斷裂鏈轉(zhuǎn)移聚合聚合法(RAFT)、原子轉(zhuǎn)移自由基聚合法(ATRP)[21]、活性開(kāi)環(huán)聚合等。
陳志軍等采用化學(xué)共沉淀法合成了Fe3O4納米粒子，然后用3-甲基丙稀酷氧基三甲氧基硅院(3-MPS)對(duì)其表面改性引入雙鍵，然后以苯乙稀為卑體，4-經(jīng)基-2,2,6,6-四甲基呢淀-1-氧化物自由基(HTEMPO)為穩(wěn)定自由基介質(zhì)，采用可控“活性”自由基聚合在納米粒子表面原位引發(fā)聚合制備了粒徑為20-30nm，磁含量為62.6%的磁性聚苯乙稀復(fù)合納米粒子。
Qin先制備了含有RAFT鏈轉(zhuǎn)移劑的S-節(jié)基-S’-三甲氧基桂基丙基三硫碳酸醋(BTPT),并對(duì)共沉淀法制備的Fe3O4納米粒子表面進(jìn)行改性得到表面負(fù)載RAFT試劑的磁性納米粒子，然后在其表面引發(fā)聚乙二醇甲基丙稀酸酯聚合。由于表面聚乙二醇的生物相容性，其對(duì)牛血清蛋白，溶菌酶及球蛋白無(wú)特異性吸附，說(shuō)明其在納米顆粒在體內(nèi)有較長(zhǎng)循環(huán)時(shí)間，在***輸送和釋放等方面具有潛在的應(yīng)用。
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常用的純化方法 1、分子蒸餾法 分子蒸餾法是根據(jù)混合物各組分的分子在高真空條件下分子平均自由程差異而達(dá)到純化的目的。在特定的溫度和壓力下，不同的分子由于有效直徑不同，從而它們的平均自由程不同，分子蒸餾就是利用不同分子的平均自由程不同這一性質(zhì)來(lái)對(duì)混合脂肪酸進(jìn)行純化。 在分子蒸餾術(shù)純化花椒籽試驗(yàn)中，蒸餾溫度低于120.0℃時(shí)，隨著溫度的升高，輕組分比例逐漸增多，重組分中的輕組分比例減少，α-亞麻酸在產(chǎn)品中的純度逐漸增加。在確定的操作壓力下，蒸餾溫度過(guò)高對(duì)產(chǎn)品純度的影響是不利的。 有學(xué)者認(rèn)為蒸餾溫度和蒸餾壓力是影響該工藝**主要因素，降低蒸餾壓力使α-亞麻酸純度不斷增加，純化效果愈加。因此，在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)選擇低壓蒸餾。 分子蒸餾法操作是物理純化過(guò)程，可以很好地保護(hù)被純化物質(zhì)不被外來(lái)物質(zhì)污染，可連續(xù)化生產(chǎn)，更適用于現(xiàn)代工業(yè)化。但**終產(chǎn)品純度較低，且設(shè)備能耗較高，投資成本大。單獨(dú)應(yīng)用時(shí)存在著局限性。
純化抗體簡(jiǎn)介 制備高特異性、價(jià)的抗體是實(shí)驗(yàn)免疫學(xué)技術(shù)的基礎(chǔ)，抗體質(zhì)量的高低將直接影響試驗(yàn)的成敗。 通過(guò)不同方法制備的抗體往往與多種雜蛋白混雜在一起，為了獲得成分相對(duì)單一的抗體或?qū)⒖贵w用于特定的用途，就需要進(jìn)行抗體純化。從成分的角度分析, 抗體分子是一類蛋白質(zhì)分子，與其他蛋白質(zhì)一樣，它有一定的等電點(diǎn)、溶解度、荷電性及疏水性，可以用電泳、 鹽析沉淀或其他層析技術(shù)進(jìn)行分離、 純化。純化抗體通常用于直接檢測(cè)抗原。此時(shí)抗體標(biāo)記有一個(gè)易于鑒定的標(biāo)記物，用于結(jié)合和檢測(cè)所研究的抗原。在間接檢測(cè)抗原方法中，一抗不被標(biāo)記，而是用標(biāo)記的二抗(一種抗免疫球蛋白抗體)來(lái)檢測(cè)。一般而言，建議使用間接法。因?yàn)樵S多商家能夠提供可靠的標(biāo)記二抗，用間接法不僅省力，結(jié)果同樣可靠。 盡管如此，有幾種方法需要標(biāo)記的一級(jí)抗體。例如，在免疫染色試驗(yàn)中，需要研究2個(gè)或2個(gè)以上抗原的相對(duì)位置時(shí)，常需要純化抗體并用不同標(biāo)記物標(biāo)記，這樣能比較它們的相對(duì)位置。
利用超細(xì)的固體顆粒可以代替表面活性劑穩(wěn)定地存在于油/水界面，能阻止分散的油(水)微滴再次凝聚為大液滴而分相，起到了穩(wěn)定乳液的作用。Yin等用溫和的Pickering乳液聚合法一步制備PS/Fe3O4高磁性微球。用溴化十六烷基三甲銨（CTAB）改性的Fe3O4粒子作為穩(wěn)定劑(錨定在聚合物外層)，完全疏水的油酸改性的Fe3O4粒子則被包埋在微球中。
Liu等首先利用無(wú)皂乳液法制備油酸包裹的Fe3O4納米粒子，再利用種子乳液聚合法制備了P(MMA-DVB(二乙烯基苯)-GMA)/Fe3O4磁性復(fù)合微球，***在微球表面接枝聚酰胺(PAMAM)（圖1）。所得的接枝聚酰胺磁性高分子微球的比飽和磁化強(qiáng)度為4.9A·m2/kg，遠(yuǎn)低于純磁性納米粒子，分析可能是微球的殼層比較厚所致.
亞微米(50~500nm)液滴構(gòu)成的穩(wěn)定的液/液分散體系稱為細(xì)乳液，在穩(wěn)定的細(xì)乳液聚合中，細(xì)乳液液滴是主要的成核點(diǎn)即聚合場(chǎng)所，聚合前液滴的數(shù)目和大小在聚合過(guò)程中基本保持不變，決定了**終的乳膠粒的數(shù)目和尺寸，不像常規(guī)聚合由聚合動(dòng)力學(xué)決定。Zhang等[14]通過(guò)細(xì)乳液聚合法制備P(St-MMA)/Fe3O4復(fù)合微球，磁性微球的比飽和磁化強(qiáng)度達(dá)到51.0A·m2/kg，磁性Fe3O4納米粒子的含量達(dá)到61.5wt%。
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包埋法方法簡(jiǎn)單，由于適用的多為水溶性天然高分子，因此其生物相容性好，表面富含多種功能基團(tuán)，容易直接偶聯(lián)生物大分子，但是其主要缺點(diǎn)是制備的微球粒徑分布寬，形狀不規(guī)則，磁粒子在不同微粒內(nèi)含量不均一，各微球磁響應(yīng)能力差別大，在外環(huán)境中易發(fā)生磁泄漏。而且包覆的殼層中難免會(huì)有些乳化劑之類的雜質(zhì)，使其在生物醫(yī)用等領(lǐng)域的應(yīng)用受到一定的限制。
2.2原位法
原位法是一種制備彌散型結(jié)構(gòu)磁性高分子復(fù)合微球的方法，該方法主要步驟如下：首先制備出多孔型高分子微球，然后通過(guò)磺化或硝化處理，使高分子微球能與鐵、猛、鈷等金屬離子具有親和性，***將制備的微球中加入鐵鹽，在堿性條件氧化沉淀鐵離子，使得磁性粒子在高分子微球的孔中生成，**終得到磁性復(fù)合微球。Ugelstad等釆用此法制備出磁性高分子微球且開(kāi)發(fā)了一系列已商品化的產(chǎn)品(Dynabeeds)，并在微生物免疫學(xué)、分子生物學(xué)和**等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。
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