微球(microsphere)是指分散或被吸附在高分子、聚合物基質(zhì)中而形成的微粒分散體系。制備微球的載體材料很多,主要分為天然高分子微球(如淀粉微球,白蛋白微球,明膠微球,殼聚糖等)和合成聚合物微球(如聚乳酸微球)。納米微球一般是高分子聚合而成,多是樹脂,有乳液聚合比較多,聚苯乙烯,聚丙烯酸。目前藥劑學(xué)上關(guān)于微球(microspheres)的定義是指***溶解或分散于高分子材料中形成的微小球狀實(shí)體,球形或類球形,一般制備成混懸劑供注射或口服用。微球粒徑范圍一般為1~500um,小的可以是幾納米,大的可達(dá)800um,其中粒徑小于500nm的,通常又稱為納米球(nanospheres)或納米粒(nanoparticles),屬于膠體范疇。成都質(zhì)量二乙烯基苯微球
2.3.2懸浮聚合
懸浮聚合法是單體小液滴懸浮在水中的聚合方法,在磁性粒子、穩(wěn)定劑和表面活性劑存在下、靠油溶性引發(fā)劑的作用使一種或幾種單體在磁性粒子表面聚合可將磁性粒子包裹在聚合物中。與乳液聚合相比,懸浮聚合單體液滴粒徑通常是微米級別的。Li等[17]合成一種新型的核殼式P(DVB-MAA)/Fe3O4納米復(fù)合微球,可作為分散模式的磁介導(dǎo)微觀粒子的固相萃取吸附劑。Fe3O4納米粒子通過溶劑熱法制備,P(DVB-MAA)通過懸浮聚合合成,微球的平均粒徑在300~700nm,微球殼層的P(DVB-MAA)厚度在10nm左右。該微球可用于水中微量的有機(jī)污染物的快速、高靈敏檢測。
2.3分散聚合
分散聚合是懸浮聚合的一種,也是一種特殊的沉淀聚合,反應(yīng)之前單體、溶劑、穩(wěn)定劑、引發(fā)劑等是均一的混合體系,當(dāng)反應(yīng)開始,聚合物達(dá)到一定分子量之后,聚合物逐漸從反應(yīng)體系中沉淀出來。Zhang等合成了Fe3O4含量高達(dá)70wt%、且分布比較均一的P(St–GMA)/Fe3O4的納米復(fù)合微球。由于只有當(dāng)磁性粒子在反應(yīng)初期成核過程中捕獲,并聚合增長才能得到復(fù)合微球,因此此方法的磁含量往往不高,且該法需使用的溶劑多為有機(jī)溶劑,聚合物與有機(jī)溶劑的親和性導(dǎo)致聚合物沉淀出時(shí)鏈長較長,粒徑較大,限制了其應(yīng)用。
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熒光微球分析技術(shù)屬于化學(xué)材料發(fā)展結(jié)果,可用于細(xì)胞表面抗原的檢測、退行性神經(jīng)病變示蹤物、吞噬功能的檢測、血流分析、敏感性診斷試劑等,本文介紹了熒光微球分析技術(shù)以及熒光微球吞噬實(shí)驗(yàn)的操作步驟。 熒光微球分析 技術(shù)簡介 熒光微球分析技術(shù)是近年來化學(xué)材料科學(xué)活躍發(fā)展 的產(chǎn)物,各種大小(0.2~10μm)可產(chǎn)生熒光和色彩的人工微球應(yīng)運(yùn)而生,目前各種材料人工合成、多種顏色和規(guī)格的熒光微球有2大類,一種是表面不帶修飾基團(tuán)的微球,另一種是攜帶各種化學(xué)修飾基團(tuán),包括羧基化修飾、氨基修飾、巰基或醛巰基修飾等的微球。
在LED 照明領(lǐng)域:在LED芯片或封裝材料里加入納微米球不僅可以大幅度提高LED發(fā)光效 率,并增加光的柔和性保護(hù)人的眼睛。 在化妝品領(lǐng)域: 在化妝品里添加微球不僅可以增加手感和抗紫外功能,還可遮蓋皮膚的缺 陷,延長有效成分的穩(wěn)定性,增加皮膚的美感。 在水處理領(lǐng)域:功能性的微球可以除去水里有機(jī)雜質(zhì)和金屬離子成分,可制備用在半導(dǎo) 體工業(yè),醫(yī)藥,核工業(yè)等的超純水,也可用于凈化日常飲用水。水為人類洗滌了污穢, 微球卻可以鏟除水里的污穢,到達(dá)凈化水的目的。 在血液凈化領(lǐng)域:微球可以替代腎臟用來去除血液0物質(zhì). 微球是制造人工腎的關(guān)鍵材料。 在計(jì)量領(lǐng)域:粒徑高度均一的微球可以作為標(biāo)準(zhǔn)顆粒用于精確測量常規(guī)尺子無法計(jì)量的 納米尺寸的物質(zhì),標(biāo)準(zhǔn)顆粒作為計(jì)量工具也可用于矯正精密計(jì)量儀器。 在醫(yī)療診斷領(lǐng)域:功能化微球如磁性微球,多色熒光編碼微球可應(yīng)用于免疫分析, 進(jìn)行多樣品或多標(biāo)靶的高通量檢測。由于微球的使用,使我們可以更快速,方便地進(jìn)行疾 病檢測和診斷。
如何制作納米微球呢? 離子交聯(lián)法是制作納米微球的基本方法之一,適用于以殼聚糖、海藻酸鈉等 為材料的納米微球。其主要原理是作為***載體的材料通過離子交聯(lián)法從乳 液中析出,同時(shí)通過氫鍵相互作用和疏水相互作用將***包埋在載體中,從 而制備成載藥微球。該方法制備條件溫和,整個(gè)過程不使用對人體有害的試 劑,也成為載藥微球的理想制備方法之一。 納米微球的典型制備方法還有“乳化-溶劑揮發(fā)法”和“微流控法”。“乳 化-溶劑揮發(fā)法”是將模型***先溶解于有機(jī)溶劑中,然后滴加到含有表面活 性劑的水相中,在均質(zhì)機(jī)的高速剪切下形成油相/水相型乳液,再通過常壓或減 壓方式除去乳液分散相中的揮發(fā)性有機(jī)溶劑,使納米粒硬化,***通過冷凍干 燥從水性混懸液中收集納米粒。“微流控法”是一種在微米尺度的通道中操 控兩種或幾種互不相溶的微小體積液體,連續(xù)、可控地生產(chǎn)具有高度單分散尺 寸的單乳液滴和多重乳液液滴的技術(shù)。 深圳口碑好二乙烯基苯微球
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這些熒光微球正廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究的多個(gè)領(lǐng)域中,如: (1)細(xì)胞表面抗原的檢測,包括CD4/CD8表面抗原的***計(jì)數(shù);細(xì)胞表面低豐度表達(dá)受體的分析;骨髓移植受體內(nèi)供體紅細(xì)胞的檢測;白色***抗原檢測等。 (2)退行性神經(jīng)病變示蹤物,熒光微球具有***、與神經(jīng)細(xì)胞結(jié)合時(shí)間長以及受注射部位影響極小的特點(diǎn)。 (3)吞噬功能的檢測,0.6~2.0μm大小的熒光微球適合于這一類的研究,如分析大鼠中性粒細(xì)胞、人橫紋導(dǎo)管細(xì)胞、小鼠腹膜巨噬細(xì)胞、人多核白細(xì)胞的吞噬功能或不同調(diào)理素調(diào)理作用對吞噬功能的影響等。 (4)血流分析,10-15 μm大小7種顏色的熒光可供研究組織中局部血流情況,如**脈管血流速率、視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜循環(huán)、肺泡微管的功能直徑定位等。 (5)敏感性診斷試劑,如替代一些已開展應(yīng)用的微球診斷試驗(yàn):膠乳凝集試驗(yàn)、微球捕獲ELASA、雙位點(diǎn)夾心法等,它較傳統(tǒng)比色方法更為靈敏;另有新近誕生的流式微球分析技術(shù)(Cytometric Bead Array CBA)通過將不同熒光強(qiáng)度的聚苯乙烯微球包被上多種高特異性的單克隆抗體,在微球“三明治”平臺(tái)上進(jìn)行可溶性蛋白的檢測,由此而使得1份微量標(biāo)本可同時(shí)1次定量分析多種可溶性蛋白,**節(jié)約了樣本量和操作時(shí)間,靈敏度也較傳統(tǒng)的ELISA成都質(zhì)量二乙烯基苯微球
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