分離純化多肽的常用方法-疏水作用色譜 HIC 是利用多肽中含有疏水基因,可與固定相之間產(chǎn)生疏水作用而達(dá)到分離分析的目的,其比RP-GPLC 具有較少使多肽變性的特點(diǎn)。利用GIC 分離生產(chǎn)(GH)產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)與活性比EP-GPLC 分離的要穩(wěn)定,活性較穩(wěn)定。Geng 等利用HIC 柱的低變性特點(diǎn),將大腸桿菌表達(dá)出的經(jīng)鹽酸胍乙啶變性得到人重組干擾素-γ。通過HIC 柱純化、折疊出高生物活性的產(chǎn)品。不同人尿表皮生長因子(EGF)也利用HIC 純化到了,均具有良好的生物活性。HIC 可將未經(jīng)離子交換柱的樣品純化。而RP-HPLC 則不能達(dá)到這一要求。濟(jì)南質(zhì)量多肽分離填料
分離純化多肽的常用方法-膜蛋白色譜 CMP+分離強(qiáng)蔬水性蛋白、多肽混合物的層析系統(tǒng),一般有去垢劑(如SDS)溶解膜蛋白后形成SDS-融膜蛋白,并由羥基磷灰石為固定相的柱子分離純化。羥基磷灰石柱具有陰離子磷酸基團(tuán)(P-端),又具有陽離子鈣(C-端),與固定相結(jié)合主要決定于膜蛋白的大小、SDS 結(jié)合量有關(guān)。利用原子散射法研究cAMP的分離機(jī)制發(fā)現(xiàn),樣品與SDS 結(jié)合后在離子交換柱上存在SDS 分子、帶電荷氨基酸與固定相中帶電離子間的交換,從而達(dá)到分級分離的目的。廈門質(zhì)量多肽分離填料
分離純化多肽的常用方法-分子排阻色譜 SEC 是利用多肽分子大小、形狀差異來分離純化多肽物質(zhì),特別對一些較大的聚集態(tài)的分子更為方便,如人重組生長(hgH)的分離,不同結(jié)構(gòu)、構(gòu)型的GH 在SEC 柱上分離行為完全不同,從而可分離不同構(gòu)型或在氨基酸序列上有微小差異的變異體,利用SEC 研究修飾化的PEG 的分離方法,此PEC 具有半衰期長、作用強(qiáng)的特點(diǎn)。一些分子量較大的肽或蛋白均可利用此法分離分析。 分離純化多肽的常用方法--離子交換色譜 IEXC 可在中性條件下,利用多肽的帶電性不同分離純化具有生物活性的多肽。其可分為陽離子柱與陰離子柱兩大類,還有一些新型樹脂,如大孔型樹脂、均孔型樹脂、離子交換纖維素、葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠樹脂等。在多肽類物質(zhì)的分離分析研究中,對多肽的性質(zhì)、洗脫劑、洗脫條件的研究較多,不同的多肽分離條件有所不同,特別是洗脫劑的離子強(qiáng)度、鹽濃度等對純化影響較大。Wu 等報(bào)道利用離子交換柱層析法,探討分離牛碳酸酐異構(gòu)體和牛血清白蛋白、雞血清白蛋白酶的提取條件,獲得了有價(jià)值的數(shù)據(jù)供今后此類物質(zhì)分離研究。
分離純化多肽的常用方法-反相高效液相色譜 結(jié)果與保留值之間的關(guān)系:利用RP-HPLC 分離多肽首先得確定不同結(jié)構(gòu)的多肽在柱上的保留情況。為了獲得一系列的保留系數(shù),Wilce 等利用多線性回歸方法對2106 種肽的保留性質(zhì)與結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析,得出了不同氨基酸組成對保留系數(shù)影響的關(guān)系,其中極性氨基酸殘基在2~20 氨基酸組成的肽中,可減少在柱上的保留時(shí)間;在10~60 氨基酸組成的肽中,非極性氨基酸較多也可減少在柱上的保留時(shí)間,而含5~25 個(gè)氨基酸的小肽中,非極性氨基酸增加可延長在柱上的保留時(shí)間。 同時(shí)有不少文獻(xiàn)報(bào)道了肽鏈長度、氨基酸組成、溫度等條件對保留情況的影響,并利用計(jì)算機(jī)處理分析得到每種多肽的分離提取的比較好條件。 肽圖分析(Peptide Mapping):肽圖分析是根據(jù)蛋白質(zhì)、多肽的分子量大小以及氨基酸組成特點(diǎn),使用專一性較強(qiáng)的蛋白水解酶[ 一般未肽鏈內(nèi)切酶(endopeptidase)]作用于特殊的肽鏈位點(diǎn)將多肽裂解成小片斷,通過一定的分離檢測手段形成特征性指紋圖譜,肽圖分析對多肽結(jié)構(gòu)研究合特性鑒別具有重要意義。
分離純化多肽的常用方法 分離方法 采取何種分離純化方法要由所提取的組織材料、所要提取物質(zhì)的性質(zhì)決定。對蛋白質(zhì)、多肽提取分離常用的方法包括:鹽析法、超濾法、凝膠過濾法、等電點(diǎn)沉淀法、離子交換層析、親和層析、吸附層析、逆流分溶、酶解法等。這些方法常常組合到一起對特定的物質(zhì)進(jìn)行分離純化,同時(shí)上述這些方法也是蛋白、多肽類物質(zhì)分析中常用的手段,如層析、叫泳等。 核磁共振,基質(zhì)輔助激光解析/ 離子化-飛行時(shí)間質(zhì)譜, 電霧離子化質(zhì)譜,連續(xù)流快原子轟擊質(zhì)譜,質(zhì)譜分析除上述方法之外,氨基酸組成分析、氨基酸序列分析、場解析質(zhì)譜、IR、UV 光譜、CD、圓而色譜、生物鑒定法、放射性同位素標(biāo)記法及免疫學(xué)方法等都已應(yīng)用于多肽類物質(zhì)的結(jié)果鑒定、分析檢測之中。上海多肽分離填料制造廠家
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國際上精細(xì)化學(xué)品已有40-50個(gè)門類,10萬多個(gè)品種。精細(xì)化學(xué)品應(yīng)用于日常生活的方方面面,如醫(yī)藥、染料、農(nóng)藥、涂料、日化用品、電子材料、造紙化學(xué)品、油墨、食品添加劑、飼料添加劑、水處理等,還在航空航天、信息技術(shù)、新材料、新能源技術(shù)、環(huán)保等高新技術(shù)方面普遍應(yīng)用。隨著國內(nèi)經(jīng)濟(jì)飛速發(fā)展、生產(chǎn)技術(shù)的進(jìn)步、國內(nèi)市場需求的飛速增長、原料和資本供應(yīng)狀況的改善、全球化專業(yè)分工以及發(fā)達(dá)地區(qū)由于生產(chǎn)成本和市場飽和等原因而采取戰(zhàn)略轉(zhuǎn)移和重組等策略,我國納米材料、鍍膜材料、生物試劑、塑料制品(以上不含危險(xiǎn)化學(xué)品、藥品、獸藥)的研發(fā)、銷售;高分子科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓;從事上述產(chǎn)品及技術(shù)的進(jìn)出口業(yè)務(wù)(祖國限定企業(yè)經(jīng)營或禁止進(jìn)出口的商品和技術(shù)除外)。(依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動(dòng))行業(yè)遇到了前所未有的發(fā)展機(jī)遇。生產(chǎn)高附加值產(chǎn)品,調(diào)整產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu),是精細(xì)化工有限責(zé)任公司的發(fā)展趨勢。我國各部委正針對相關(guān)行業(yè)出臺具體的產(chǎn)業(yè)規(guī)劃,對產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)升級的支持性政策也會陸續(xù)出臺。我國有關(guān)部委制定的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),從精細(xì)化工行業(yè)流程、產(chǎn)品、工藝、設(shè)備、研發(fā)、資質(zhì)等各方面引導(dǎo)精細(xì)化工企業(yè)加入高附加精細(xì)化工產(chǎn)品,鼓勵(lì)企業(yè)在科學(xué)合理的前提下實(shí)施擴(kuò)張重組,提高企業(yè)競爭力,提升行業(yè)集中度。精細(xì)化學(xué)品主要應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、建筑業(yè)、紡織業(yè)、醫(yī)藥業(yè)、電子設(shè)備等行業(yè)。隨著下游各行業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展,對微球,聚苯乙烯微球,納米微球,熒光微球的需求數(shù)量上升,性能要求進(jìn)一步提高,精細(xì)化工行業(yè)與下**業(yè)之間的關(guān)系變得更加緊密。濟(jì)南質(zhì)量多肽分離填料
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