珠三角CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-07-05

CyFlow Analyser倍性分析儀是一款緊湊型流式細(xì)胞儀,可用于植物、動(dòng)物以及微生物的倍性分析儀、高分辨率DNA和基因組大小分析。由光源、光學(xué)系統(tǒng)、液流系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)軟件組成。該模塊化設(shè)備配有365nm的紫外光源和/或532nm的Nd-YAG綠色激光器。儀器配置1或2個(gè)具有光電倍增(PMT)的光學(xué)參數(shù)。適用于PI標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置和過濾器裝置(590nm長(zhǎng)通濾波器)和/DAPI/SSC(435nm長(zhǎng)通濾波器)液流系統(tǒng)(合成石英流動(dòng)室專門在層流樣本。取樣口配備由計(jì)算機(jī)控制的生物安全清潔系統(tǒng),避免了樣品飛沫。無污染的計(jì)算機(jī)控制精密注射泵。樣品量高達(dá)1000ul,且采樣速率可在0.2到20ul/s之間進(jìn)行連續(xù)調(diào)節(jié)。使用方便的鞘液和廢液液位傳感器。提供2*1升的玻璃瓶用于存放鞘液和廢液)CyFlow Analyser倍性分析儀應(yīng)用:植物、動(dòng)物DNA倍體檢測(cè),基因組大小檢測(cè),細(xì)胞周期檢測(cè)。珠三角CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀

樣品的新鮮程度直接影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。由于次生代謝產(chǎn)物的影響,會(huì)導(dǎo)致信號(hào)峰過寬,甚至檢測(cè)不到信號(hào)峰的情況。嫩葉的選擇要選擇新鮮、完全展開、無蟲咬、無枯萎、分裂不活躍的部位。嫩葉的檢測(cè)效果明顯好于較老的葉片。倍性檢測(cè)首先需要裂解液裂解細(xì)胞獲得游離細(xì)胞核,然后用 DAPI 染液將細(xì)胞核染色體上的 A-T 堿基染色,再用倍性分析儀儀器檢測(cè)細(xì)胞核里被染色的 A-T 堿基發(fā)出的熒光強(qiáng)度。比如二倍體的熒光強(qiáng)度是 100(橫坐標(biāo)),那么四倍體的熒光強(qiáng)度就是 200(橫坐標(biāo)),如下圖所示,用 DAPI 染色法檢測(cè)蠶豆的倍性。結(jié)果的縱坐標(biāo)是細(xì)胞數(shù)量的顯示,通常來說,信號(hào)峰高說明信號(hào)比較好,雜質(zhì)少。上海高精確性倍性分析儀CyFlow Analyser倍性分析儀為DNA倍性分析和基因組大小檢測(cè)提供了專門且適合的DNA熒光染料(DNPI、PI等)。

菌類的基因組大小信息很少,只有不到 2000 個(gè)物種的信息可用。到目前為止,大多數(shù)記錄都是使用靜態(tài)的、基于顯微鏡的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法獲得的,或者來自基因組測(cè)序項(xiàng)目。流式細(xì)胞術(shù)現(xiàn)在被認(rèn)為是獲得基因組大小測(cè)量的較先進(jìn)方法,并且可以使用適當(dāng)?shù)姆椒ê?DNA 標(biāo)準(zhǔn),從而能夠以快速、可靠和廉價(jià)的方式分析大多數(shù)基因組大小范圍。平均菌類基因組大小為 60 Mbp,但大小因系統(tǒng)發(fā)育而異,從 2.2到 3706 Mbp 。在幾個(gè)菌類進(jìn)化枝中,基因組大小的擴(kuò)張似乎伴隨著植物共生或植物寄生的進(jìn)化,與植物相互作用的菌類似乎比腐生菌和與動(dòng)物相互作用的菌類具有更大的基因組。雖然用于核 DNA 定量的流式細(xì)胞術(shù)在植物科學(xué)中常規(guī)用于基因組大小和倍性研究,但其在菌類生物學(xué)中的使用仍然很少。此處描述了適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)、方法和比較好實(shí)踐,旨在促進(jìn)流式細(xì)胞術(shù)在菌類基因組大小測(cè)量中更普遍和更多的應(yīng)用。

流式細(xì)胞分析是一種現(xiàn)代分析技術(shù),其在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被范圍廣使用,具有“實(shí)驗(yàn)室的 CT”之稱。雖然流式細(xì)胞術(shù)在植物研究中起步較晚,但由于它具有制樣簡(jiǎn)單用量少、操作高效快速且數(shù)據(jù)重復(fù)性高等優(yōu)勢(shì),已逐漸發(fā)展為一種常用的植物基因組大小或植物倍性研究方法。植物的核 DNA 含量和倍性水平是植物學(xué)研究中重要的基礎(chǔ)研究指標(biāo)。流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用,提高了植物核 DNA 含量檢測(cè)的準(zhǔn)確度和檢測(cè)速度.流式細(xì)胞儀克服了傳統(tǒng)鑒定方法操作難、時(shí)間長(zhǎng)等不足,可進(jìn)行快速、大量的染色體倍性分析,為后續(xù)棉花倍性育種提供技術(shù)支撐。CyFlow Analyser倍性分析儀是款緊湊型流式細(xì)胞儀,可用于植物、動(dòng)物以及微生物的倍性分析。

多光譜成像流式細(xì)胞術(shù) (MIFC) 每秒可測(cè)量多達(dá) 5000 個(gè)來自流體懸浮液的粒子,并且可以同時(shí)捕獲多達(dá) 12 張每個(gè)單個(gè)粒子的圖像,用于明場(chǎng)和不同的光譜范圍,放大倍率高達(dá) 60 倍。MIFC 的高通量具有提高環(huán)境監(jiān)測(cè)數(shù)量和準(zhǔn)確性的巨大潛力,例如目前依賴手動(dòng)顯微方法的植物-傳粉媒介相互作用、化石樣本、空氣、水或食品質(zhì)量。當(dāng) MIFC 與深度學(xué)習(xí)計(jì)算技術(shù)相結(jié)合時(shí),粒子和細(xì)胞的自動(dòng)識(shí)別也是可能的。此外,各種熒光染料可用于染色細(xì)胞的特定部位以突出生理和化學(xué)特征,包括:花粉或藻類的活力、單個(gè)花粉的過敏原含量、細(xì)胞的表面化學(xué)成分(碳水化合物涂層)、DNA-或酶-活性染色。在這里,我們概述了 MIFC 在各種研究領(lǐng)域和焦點(diǎn)生物的環(huán)境研究中的巨大潛力。此外,我們還提供比較好實(shí)踐建議。花粉或藻類的活力、單個(gè)花粉的過敏原含量、細(xì)胞的表面化學(xué)成分(碳水化合物涂層)、DNA 或酶活性染色。在這里,我們概述了 MIFC 在各種研究領(lǐng)域和焦點(diǎn)生物的環(huán)境研究中的巨大潛力。此外,我們還提供比較好實(shí)踐建議?;ǚ刍蛟孱惖幕盍Α蝹€(gè)花粉的過敏原含量、細(xì)胞的表面化學(xué)成分(碳水化合物涂層)、DNA 或酶活性染色。CyFlow Analyser倍性分析儀可以高分辨率DNA和基因組大小分析。深圳CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀性能參數(shù)

利用流式細(xì)胞儀快速檢測(cè)棉花 DNA 倍性,為棉花的倍性鑒定和育種研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。珠三角CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀

實(shí)驗(yàn)儀器:Sysmex CyFlow® Ploidy Analyser 倍性分析儀(Sysmex Partec)試劑盒:CyStain® UV Precise P(Sysmex Partec)實(shí)驗(yàn)步驟:1、取新鮮待測(cè)植物葉片 0.5 平方厘米,置于培養(yǎng)皿中2. 取 Partec CyStain UV Precise P 裂解液 400ul 加于植物葉片周圍,用刀片將葉片切碎,以充分提取出完整的細(xì)胞核,持續(xù) 30-60 秒3. 將培養(yǎng)皿中的液體用 30um 濾網(wǎng)過濾至樣品管中4. 向樣品管中加入 Partec CyStain UV Precise P 的 DAPI 染液 1600ul5. 上機(jī)(CyFiow Analyser倍性分析儀)檢測(cè)。珠三角CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀

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