實驗儀器:Sysmex CyFlow® Ploidy Analyser 倍性分析儀(Sysmex Partec)試劑盒:CyStain® UV Precise P(Sysmex Partec)實驗步驟:1、取新鮮待測植物葉片 0.5 平方厘米,置于培養(yǎng)皿中2. 取 Partec CyStain UV Precise P 裂解液 400ul 加于植物葉片周圍,用刀片將葉片切碎,以充分提取出完整的細(xì)胞核,持續(xù) 30-60 秒3. 將培養(yǎng)皿中的液體用 30um 濾網(wǎng)過濾至樣品管中4. 向樣品管中加入 Partec CyStain UV Precise P 的 DAPI 染液 1600ul5. 上機(CyFiow Analyser倍性分析儀)檢測。CyFlow Analyser倍性分析儀為DNA倍性分析和基因組大小檢測提供了專門且適合的DNA熒光染料(DNPI、PI等)。配備532nm光源倍性分析儀儀器
樣品的新鮮程度直接影響實驗的結(jié)果。由于次生代謝產(chǎn)物的影響,會導(dǎo)致信號峰過寬,甚至檢測不到信號峰的情況。嫩葉的選擇要選擇新鮮、完全展開、無蟲咬、無枯萎、分裂不活躍的部位。嫩葉的檢測效果明顯好于較老的葉片。倍性檢測首先需要裂解液裂解細(xì)胞獲得游離細(xì)胞核,然后用 DAPI 染液將細(xì)胞核染色體上的 A-T 堿基染色,再用倍性分析儀儀器檢測細(xì)胞核里被染色的 A-T 堿基發(fā)出的熒光強度。比如二倍體的熒光強度是 100(橫坐標(biāo)),那么四倍體的熒光強度就是 200(橫坐標(biāo)),如下圖所示,用 DAPI 染色法檢測蠶豆的倍性。結(jié)果的縱坐標(biāo)是細(xì)胞數(shù)量的顯示,通常來說,信號峰高說明信號比較好,雜質(zhì)少。中國全自動倍性分析儀系統(tǒng)CyFlow Analyser倍性分析儀 染色速度快:DNA倍體標(biāo)本上機檢測小于2分鐘。
流式細(xì)胞分析是一種現(xiàn)代分析技術(shù),其在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被范圍廣使用,具有“實驗室的 CT”之稱。雖然流式細(xì)胞術(shù)在植物研究中起步較晚,但由于它具有制樣簡單用量少、操作高效快速且數(shù)據(jù)重復(fù)性高等優(yōu)勢,已逐漸發(fā)展為一種常用的植物基因組大小或植物倍性研究方法。植物的核 DNA 含量和倍性水平是植物學(xué)研究中重要的基礎(chǔ)研究指標(biāo)。流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用,提高了植物核 DNA 含量檢測的準(zhǔn)確度和檢測速度.流式細(xì)胞儀克服了傳統(tǒng)鑒定方法操作難、時間長等不足,可進行快速、大量的染色體倍性分析,為后續(xù)棉花倍性育種提供技術(shù)支撐。
提取高質(zhì)量的細(xì)胞核用于倍性檢測至關(guān)重要,Peng 等比較了刀切法和研磨法提取棉花細(xì)胞核的效果,結(jié)果發(fā)現(xiàn),刀切法提取的細(xì)胞核質(zhì)量更高,因此我們選擇刀切法來提取棉花細(xì)胞核。根據(jù)其他植物材料已有的研究報道,植物取材需要考慮樣品易獲性、細(xì)胞核型的穩(wěn)定性和保存性等因素。如果材料選取不當(dāng),會導(dǎo)致提取的細(xì)胞核顆粒較少,生成大量的雜質(zhì),甚至形成變異系數(shù)較大的 DNA 峰。本研究以棉花的老葉和嫩葉為材料制備樣品進行對比,結(jié)果表明棉花幼嫩葉片檢測效果好,完全可以作為倍性鑒定試材。CyFlow Analyser倍性分析儀靈活便捷:結(jié)構(gòu)緊湊,便于移動,適用于多種工作場所。
CyFlow Ploidy Analysere倍性分析儀一機全能:1、特殊設(shè)計,專為醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)、育種及水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域提供完美的倍性和周期解決方案2、配備365nm光源,高效激發(fā)DAPI染料,避免RNA的影響和次生代謝物的影響3、配備532nm光源,高效激發(fā)PI染料,激發(fā)效率遠超488nm和561nm激光器4、超高熒光分辨率, DNA檢測CV<1%,適合高精度倍性實驗。5、采用TVAC定體積相對計數(shù)功能,無需相對計數(shù)微球,隨時掌握樣本濃度6、樣本流速從0-20ul/s連續(xù)精確可調(diào),適合極低濃度樣本的檢測7、可選配自動上樣器CyFlow Robby,兼容48孔板,96孔板和流式管,實現(xiàn)無人值守的高通量上樣8、結(jié)合配套植物倍性試劑,可在5min內(nèi)完成植物倍性檢測實驗。9、支持樣本快速處理和檢測;10、基于PI和DAPI的熒光DNA分析;11、提供樣本快速處理試劑盒,用于 DAPI 和PI 標(biāo)記的倍體分析;12、配套的儀器質(zhì)控試劑;13、所有樣本的細(xì)胞核染色(包括 ,葉、根、愈合組織、懸浮組織、雜交細(xì)胞等);14、可用于任何動物組織、培養(yǎng)細(xì)胞、懸浮細(xì)胞的倍體分析。流式細(xì)胞儀是以流式細(xì)胞術(shù)為理論基礎(chǔ),集流體力學(xué)、激光技術(shù)、和計算機為一體的一種新型高科技儀器。珠三角Sysmex倍性分析儀生命科學(xué)用品
Ploidy Analyser倍性分析儀采用Partec*染色技術(shù)。配備532nm光源倍性分析儀儀器
精細(xì)化學(xué)品行業(yè)的傳統(tǒng)領(lǐng)域主要包括數(shù)字PCR,純水機,病理切片機,倍性分析儀等領(lǐng)域。經(jīng)過長期積累,我國精細(xì)化工行業(yè)在傳統(tǒng)領(lǐng)域已經(jīng)基本滿足了國民經(jīng)濟發(fā)展的需要,部分產(chǎn)品已具有一定的國際競爭力,染料、農(nóng)藥的產(chǎn)量已處于全球**,涂料產(chǎn)量已達到全球第四位。精細(xì)化工在生產(chǎn)過程中會產(chǎn)生廢水、廢氣、固體廢物等有害物質(zhì),企業(yè)需加入大量資本用于這些有害物質(zhì)的治理,使服務(wù)型企業(yè)生產(chǎn)符合我國環(huán)境保護標(biāo)準(zhǔn)。隨著我國環(huán)境保護標(biāo)準(zhǔn)日益提高,企業(yè)必須持續(xù)加大污染物處理技術(shù)研發(fā)、環(huán)境保護設(shè)施加入和污染物處置力度。此外,由于發(fā)達地區(qū)人力成本高,超過**保護期的農(nóng)藥原藥和醫(yī)藥原料藥已無生產(chǎn)優(yōu)勢,以中國與印度為象征的發(fā)展中國地區(qū)逐漸成為農(nóng)藥、醫(yī)藥中間體和銷售的主要生產(chǎn)基地。隨著我國環(huán)境保護政策、安全生產(chǎn)政策和職工福利政策的日益完善,以及美歐等發(fā)達家對精細(xì)化學(xué)品中間體進口標(biāo)準(zhǔn)的日益嚴(yán)格,精細(xì)化工中間體行業(yè)的準(zhǔn)入門檻越來越高,這些都需要精細(xì)化工中間體生產(chǎn)商在環(huán)保、安全、產(chǎn)品研發(fā)和經(jīng)營規(guī)模等方面進行較大的加入,導(dǎo)致其初始及持續(xù)加入不斷攀升。配備532nm光源倍性分析儀儀器
廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司公司是一家專門從事數(shù)字PCR,純水機,病理切片機,倍性分析儀產(chǎn)品的生產(chǎn)和銷售,是一家服務(wù)型企業(yè),公司成立于2015-04-17,位于廣州市黃埔區(qū)銳豐三街4號617房。多年來為國內(nèi)各行業(yè)用戶提供各種產(chǎn)品支持。主要經(jīng)營數(shù)字PCR,純水機,病理切片機,倍性分析儀等產(chǎn)品服務(wù),現(xiàn)在公司擁有一支經(jīng)驗豐富的研發(fā)設(shè)計團隊,對于產(chǎn)品研發(fā)和生產(chǎn)要求極為嚴(yán)格,完全按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)研發(fā)和生產(chǎn)。臻準(zhǔn),美國艾科浦,銳訊生物,Sysmex,Eprerdia為用戶提供真誠、貼心的售前、售后服務(wù),產(chǎn)品價格實惠。公司秉承為社會做貢獻、為用戶做服務(wù)的經(jīng)營理念,致力向社會和用戶提供滿意的產(chǎn)品和服務(wù)。廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司注重以人為本、團隊合作的企業(yè)文化,通過保證數(shù)字PCR,純水機,病理切片機,倍性分析儀產(chǎn)品質(zhì)量合格,以誠信經(jīng)營、用戶至上、價格合理來服務(wù)客戶。建立一切以客戶需求為前提的工作目標(biāo),真誠歡迎新老客戶前來洽談業(yè)務(wù)。