實(shí)驗(yàn)儀器:Sysmex CyFlow® Ploidy Analyser 倍性分析儀(Sysmex Partec)試劑盒:CyStain® UV Precise P(Sysmex Partec)實(shí)驗(yàn)步驟:1、取新鮮待測(cè)植物葉片 0.5 平方厘米,置于培養(yǎng)皿中2. 取 Partec CyStain UV Precise P 裂解液 400ul 加于植物葉片周圍,用刀片將葉片切碎,以充分提取出完整的細(xì)胞核,持續(xù) 30-60 秒3. 將培養(yǎng)皿中的液體用 30um 濾網(wǎng)過濾至樣品管中4. 向樣品管中加入 Partec CyStain UV Precise P 的 DAPI 染液 1600ul5. 上機(jī)(CyFiow Analyser倍性分析儀)檢測(cè)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)對(duì)象:單細(xì)胞懸液或生物顆粒。進(jìn)口CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀系統(tǒng)
流式細(xì)胞術(shù)的潛在應(yīng)用有非常多,1其中包括檢測(cè)和測(cè)量:1、蛋白質(zhì)表達(dá) - 遍及所有細(xì)胞,包括細(xì)胞核內(nèi)2、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)譯后修飾 - 包括剪切和磷酸化蛋白質(zhì)3、RNA - 包括IncRNA、 miRNA和mRNA轉(zhuǎn)錄物4、細(xì)胞健康狀態(tài) - 從存活率到晚期凋亡或程序化細(xì)胞死亡5、細(xì)胞周期狀態(tài) - 是評(píng)估細(xì)胞處于G0/G1期、S期、G2期或多倍體狀態(tài)的強(qiáng)大工具,包括分析細(xì)胞凋亡和活化6、鑒定和表征異質(zhì)樣本中的不同細(xì)胞亞群 - 包括區(qū)分中樞效應(yīng)記憶細(xì)胞和耗竭T細(xì)胞或調(diào)節(jié)性T細(xì)胞。中國雙螺旋生物儀器倍性分析儀性能參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)是一種在功能水平上對(duì)單細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行定量分析和分選的檢測(cè)手段。
CyFlow Analyser倍性分析儀軟件集成了儀器控制功能,并為倍性和基因組大小檢測(cè)提供了一整套數(shù)據(jù)分析解決方案。它包含一個(gè)單參數(shù)的DNA直方圖用來顯示基因組大小和倍性測(cè)定結(jié)果。另外還有一個(gè)雙參數(shù)的點(diǎn)圖用來顯示柵極和單獨(dú)完整且零散的細(xì)胞核。軟件系統(tǒng)設(shè)計(jì)了兩個(gè)倍體峰值自動(dòng)識(shí)別算法和一個(gè)用戶手動(dòng)設(shè)置峰值功能。該軟件系統(tǒng)還可以創(chuàng)建用戶自義定峰值識(shí)別程序,以便在具體實(shí)驗(yàn)環(huán)境下實(shí)現(xiàn)儀器的分析功能較大化。數(shù)據(jù)分析結(jié)果將會(huì)清晰的顯示在屏幕上,同時(shí),也可以直接和相關(guān)的DNA值方圖一起提供Ms Excel表格導(dǎo)出。
CyFlow Ploidy Analyser Demo倍性分析儀注意事項(xiàng):1、儀器的外殼不要隨意打開;、2實(shí)驗(yàn)樣品的前處理要和儀器盡量避開,比方液體飛濺損傷儀器;3、上機(jī)操作請(qǐng)一定要進(jìn)行應(yīng)用培訓(xùn),或者請(qǐng)參加過培訓(xùn)的老師、同學(xué)進(jìn)行指導(dǎo),切不可單獨(dú)上機(jī);、4制作好預(yù)約流程,盡量避免一日之內(nèi)重復(fù)開機(jī),并做好實(shí)驗(yàn)上機(jī)記錄,以更好的評(píng)估儀器的使用情況;5、如果操作過程中出現(xiàn)堵孔現(xiàn)象,啟動(dòng)清洗功能,并重新用超純水沖洗2min;6、將儀器的操作手冊(cè)、光路圖及部件做好詳細(xì)表格標(biāo)注,放在實(shí)驗(yàn)室明顯的地方,方便使用者查閱;7、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)在進(jìn)行拷貝時(shí),盡量不要使用自帶的優(yōu)盤,較好外接一個(gè)光驅(qū),將數(shù)據(jù)拷貝在光盤中,如果實(shí)驗(yàn)條件有限,應(yīng)在使用前將優(yōu)盤進(jìn)行格式化后方可操作。Ploidy Analyser倍性分析儀采用Partec*染色技術(shù)。
細(xì)胞核DNA含量和基因組大小對(duì)于研究生物的多樣性至關(guān)重要,尤其是在基礎(chǔ)植物學(xué)和應(yīng)用植物學(xué)等多個(gè)研究領(lǐng)域。這些研究的基礎(chǔ)是細(xì)胞的內(nèi)多倍化(即C值)。細(xì)胞的內(nèi)多倍化**了細(xì)胞核內(nèi)DNA含量倍增,指的是同一個(gè)體內(nèi)相鄰體細(xì)胞具有多種倍性的細(xì)胞核現(xiàn)象,由細(xì)胞內(nèi)復(fù)制產(chǎn)生。細(xì)胞內(nèi)多倍化在真核生物中普遍存在,尤其在植物中變化范圍較大,對(duì)研究個(gè)體的生長發(fā)育具有重要的生物學(xué)意義。盡管C值非常重要,但是目前已知C值的植物品種*占所有植物品種的一小部分?;诹魇降臋z測(cè)技術(shù)簡單、快速、準(zhǔn)確、可靠,目前該技術(shù)已作為測(cè)定植物勻漿中C值的優(yōu)先方法,并且在植物學(xué)中的應(yīng)用越來越范圍廣。流式細(xì)胞儀是對(duì)細(xì)胞進(jìn)行自動(dòng),高通量分析和分選的裝置。國產(chǎn)雙螺旋生物儀器倍性分析儀CyFlow分選系統(tǒng)
使用倍性分析儀 ,對(duì) 4 8種培養(yǎng)多年不同基因型的柑橘愈傷組織的細(xì)胞DNA含量進(jìn)行了測(cè)定。進(jìn)口CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀系統(tǒng)
利用流式細(xì)胞儀快速檢測(cè)棉花 DNA 倍性,為棉花的倍性鑒定和育種研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。以陸地棉珂字棉 312( Gossypium hirsutumLinn.)的老葉和嫩葉為試材,用 WPB 和 LB01 解離液提取細(xì)胞核,經(jīng) PI 染色后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞倍性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),用 WPB 解離液提取棉花嫩葉獲得的細(xì)胞核用于倍性檢測(cè)效果更好,表現(xiàn)為主峰離子團(tuán)清晰而集中、背景碎片少,可以得到明顯的主峰、雜峰更少,且收集到的細(xì)胞核數(shù)目更多。初步建立了利用流式細(xì)胞儀快速檢測(cè)棉花 DNA 倍性的方法。進(jìn)口CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀系統(tǒng)
廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司位于廣州市黃埔區(qū)銳豐三街4號(hào)617房,交通便利,環(huán)境優(yōu)美,是一家服務(wù)型企業(yè)。公司是一家有限責(zé)任公司(自然)企業(yè),以誠信務(wù)實(shí)的創(chuàng)業(yè)精神、專業(yè)的管理團(tuán)隊(duì)、踏實(shí)的職工隊(duì)伍,努力為廣大用戶提供***的產(chǎn)品。公司業(yè)務(wù)涵蓋數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀,價(jià)格合理,品質(zhì)有保證,深受廣大客戶的歡迎。雙螺旋科學(xué)儀器順應(yīng)時(shí)代發(fā)展和市場(chǎng)需求,通過**技術(shù),力圖保證高規(guī)格高質(zhì)量的數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀。