在遺傳學上,一般是通過染色體的數量來確定植物的倍性,隨著科技的發(fā)展,目前植物倍性鑒定有多種方法。在形態(tài)學層次上,觀察不同倍體植株的形態(tài)特征的差異,可間接確定植株的倍性,但準確性不夠高,而且要在植株生長發(fā)育的特定時期才能鑒定,往往難以及時采取染色體加倍措施,致使育種材料不能得到及時利用,故常不被采用。在分子生物學層次上,利用流式細胞儀測定植物基因組DNA含量,即C值的大小,也可直接確定再生植株的倍性。由于該方法所用的儀器設備昂貴,普通實驗室難以具備,故制約了該方法的應用和推廣。在細胞學層次上,有染色體計數直接鑒定方法和葉片保衛(wèi)細胞葉綠體計數間接鑒定法。染色體計數法準確、可靠,但費時而且需要熟練的細胞學操作技術。CyFlow Analyser倍性分析儀靈活便捷:結構緊湊,便于移動,適用于多種工作場所。中國倍性分析儀生命科學用品
CyFlowPloidyAnalyserDemo倍性分析儀開機前儀器檢查:1)在開機之前,需要先確認連接線(包括電源線、鞘液瓶連接線和廢液瓶連接線)是否連接正常。2)要確保鞘液瓶至少裝有700ml的的鞘液(無菌、已過濾并且去除氣泡),然后要把瓶蓋旋緊。注意:鞘液太多會導致液流不穩(wěn)。3)為了保證高質量的檢測,建議使用SysmexPartecSheathFluid(orderno.04-4007)。4)建議至少一周更換一次鞘液,或者在每天使用前更換。5)在添加鞘液后,請確保鞘液瓶中的黃色過濾器中沒有氣泡!6)請確保廢液瓶已經清空,并且瓶蓋已經旋緊。注意:每個實驗人員在使用前和使用后,都請把廢液清空。在使用生物毒性樣本時,建議在空的廢液瓶中加入50ml0.5%次氯酸溶液(OrderNo04-4012),以做初始消毒。山東CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析儀DNA熒光染料Ploidy Analyser倍性分析儀采用Partec*染色技術。
擬南芥是一種生長迅速的小型植物,可進行范圍廣的核內復制,在不發(fā)生有絲分裂的情況下進行基因組擴增。該物種含有有花植物中較小的基因組,約157Mb,C值為0.321pg。這些特征使得擬南芥特別適合作為測定基因組大小的內參,并且可以用于儀器線性度的質量控制。用于流式實驗的植物樣品通常只需少量植物組織。使用標準手術刀片將植物組織切碎并浸泡于緩沖液中,過濾含植物細胞核的勻漿以去除大的碎片,用DNA特異性熒光染料進行標記,然后在流式細胞儀上采集數據,根據每個細胞核的熒光強度來計算DNA含量。通過與已知標準品比較,可以用熒光強度換算出DNA含量的相對值。擬南芥通常用作內參,只需將內參樣品和未知樣品的細胞核同時進行分離、染色和分析即可。
樣品的新鮮程度直接影響實驗的結果。由于次生代謝產物的影響,會導致信號峰過寬,甚至檢測不到信號峰的情況。嫩葉的選擇要選擇新鮮、完全展開、無蟲咬、無枯萎、分裂不活躍的部位。嫩葉的檢測效果明顯好于較老的葉片。倍性檢測首先需要裂解液裂解細胞獲得游離細胞核,然后用 DAPI 染液將細胞核染色體上的 A-T 堿基染色,再用倍性分析儀儀器檢測細胞核里被染色的 A-T 堿基發(fā)出的熒光強度。比如二倍體的熒光強度是 100(橫坐標),那么四倍體的熒光強度就是 200(橫坐標),如下圖所示,用 DAPI 染色法檢測蠶豆的倍性。結果的縱坐標是細胞數量的顯示,通常來說,信號峰高說明信號比較好,雜質少。流式細胞術可用于鑒別死細胞和活細胞等。
CyFlow Analyser倍性分析儀為DNA倍性分析和基因組大小檢測提供了專門且適合的DNA熒光染料(DNPI、PI等)。進行基因組大小分析需要通過DNA嵌入染料進行化學計量染色,該染料應該具有較低的DNA峰值變異系數。所使用的365nm的紫外光源可以高效激發(fā)DAPI,DAPI作為一種熒光染料具有眾多優(yōu)點,眾所周知的高分辨率DNA直方圖、簡單易用、且具有對其他細胞成分較低的敏感性等,這些特點使DAPI成為DNA倍性分析和異倍體分析的較好佳料。除DAPI外,532nm激光激發(fā)可以更高效的碘化丙啶(PI)染料,相比傳統(tǒng)流式細胞儀使用的488nm激發(fā),532nm激發(fā)下的PI得到的數據更準確。Sysmex倍性分析儀是一種特殊的流式細胞儀。全自動倍性分析儀應用
CyFlow Analyser倍性分析儀在醫(yī)學、農業(yè)科學、育種水產養(yǎng)殖等應用領域提供完美解決方案。中國倍性分析儀生命科學用品
CyFlow Analyser倍性分析儀的特點:1、方便快捷(倍體和基因組大小分析時間小于1分鐘、無需對中期染色體進行制備和染色、取代了耗時的顯微鏡鏡檢、Sysmex-Partec簡單快捷的樣品制備過程、可選擇96型孔板或120離心管的自動進樣系統(tǒng))2、多功能性(任何植物樣品均可被檢測分析:葉、秧苗、根莖、花、種子等)3、高精確性(絕大多數動植物倍體檢測精度可以達到±1條染色體)4、靈活便捷(結構緊湊,便于移動,適用于多種工作場所)5、獨特的儀器設計6、內置15TFT液晶顯示屏7、提供兩種不同的波8、直觀強大的FCM軟件系統(tǒng)。中國倍性分析儀生命科學用品
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