植物和鑒定多倍體的判別和鑒定方法從原理上是依據(jù)其外在和內(nèi)在的特征性衍生而來(lái)的,可以以形態(tài)外形觀察為基礎(chǔ),組織化學(xué)、葉綠體計(jì)數(shù)為輔助,進(jìn)行初步鑒別,然后再通過(guò)檢查花粉母細(xì)胞、根尖細(xì)胞或幼葉細(xì)胞的染色體數(shù)目來(lái)確定植株的倍性。染色體計(jì)數(shù)法也是目前較直接、較準(zhǔn)確的一種鑒定法。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,人們開(kāi)始從分子水平入手研究多倍體,對(duì)其倍性、來(lái)源進(jìn)行鑒定??梢岳脪呙杓?xì)胞光度儀來(lái)測(cè)定DNA含量,再根據(jù)DNA含量比較來(lái)推斷細(xì)胞的倍性。同時(shí),原位雜交技術(shù)的日漸成熟也為多倍體的鑒定提供了全新途徑。GISH,F(xiàn)ISH計(jì)數(shù)的應(yīng)用不僅能鑒定細(xì)胞的倍性,而且還能鑒定其親本的來(lái)源;此外RAPD和RFLP技術(shù)也已成功地應(yīng)用到本領(lǐng)域的研究中。利用流式細(xì)胞儀快速檢測(cè)棉花 DNA 倍性,為棉花的倍性鑒定和育種研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。中國(guó)Sysmex倍性分析儀CyFlow分選系統(tǒng)
上機(jī)(CyFlow Ploidy Analysere倍性分析儀)操作前,樣品保存要求:新鮮葉片濾紙打濕后包裹樣品保濕,放入自封袋中做好標(biāo)記,再放入泡沫箱密封。若短期內(nèi)不能檢測(cè)??蓪⑷~片使用硅膠干燥法進(jìn)行保存。每一個(gè)測(cè)試需求的葉片面積是0.5 cm2,大約小拇指甲蓋大小。準(zhǔn)備測(cè)試的葉片應(yīng)為次量的 4 倍以上,已備實(shí)驗(yàn)重復(fù)使用。準(zhǔn)備標(biāo)樣,要有已知倍性的標(biāo)樣作為參照,來(lái)預(yù)測(cè)待測(cè)樣品的倍性,檢測(cè)結(jié)果是一個(gè)相對(duì)值,并非相對(duì)值。特別注意:一定要隨樣本寄出同物種親緣較近的已知倍性樣本,作為參照,否則樣本無(wú)法確定倍性。華南地區(qū)倍性分析儀DNA熒光染料CyFlow Analyser倍性分析儀 染色速度快:DNA倍體標(biāo)本上機(jī)檢測(cè)小于2分鐘。
細(xì)胞核DNA含量和基因組大小對(duì)于研究生物的多樣性至關(guān)重要,尤其是在基礎(chǔ)植物學(xué)和應(yīng)用植物學(xué)等多個(gè)研究領(lǐng)域。這些研究的基礎(chǔ)是細(xì)胞的內(nèi)多倍化(即C值)。細(xì)胞的內(nèi)多倍化**了細(xì)胞核內(nèi)DNA含量倍增,指的是同一個(gè)體內(nèi)相鄰體細(xì)胞具有多種倍性的細(xì)胞核現(xiàn)象,由細(xì)胞內(nèi)復(fù)制產(chǎn)生。細(xì)胞內(nèi)多倍化在真核生物中普遍存在,尤其在植物中變化范圍較大,對(duì)研究個(gè)體的生長(zhǎng)發(fā)育具有重要的生物學(xué)意義。盡管C值非常重要,但是目前已知C值的植物品種*占所有植物品種的一小部分?;诹魇降臋z測(cè)技術(shù)簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確、可靠,目前該技術(shù)已作為測(cè)定植物勻漿中C值的優(yōu)先方法,并且在植物學(xué)中的應(yīng)用越來(lái)越范圍廣。
CyFlow Ploidy Analyser Demo倍性分析儀注意事項(xiàng):1、儀器的外殼不要隨意打開(kāi);、2實(shí)驗(yàn)樣品的前處理要和儀器盡量避開(kāi),比方液體飛濺損傷儀器;3、上機(jī)操作請(qǐng)一定要進(jìn)行應(yīng)用培訓(xùn),或者請(qǐng)參加過(guò)培訓(xùn)的老師、同學(xué)進(jìn)行指導(dǎo),切不可單獨(dú)上機(jī);、4制作好預(yù)約流程,盡量避免一日之內(nèi)重復(fù)開(kāi)機(jī),并做好實(shí)驗(yàn)上機(jī)記錄,以更好的評(píng)估儀器的使用情況;5、如果操作過(guò)程中出現(xiàn)堵孔現(xiàn)象,啟動(dòng)清洗功能,并重新用超純水沖洗2min;6、將儀器的操作手冊(cè)、光路圖及部件做好詳細(xì)表格標(biāo)注,放在實(shí)驗(yàn)室明顯的地方,方便使用者查閱;7、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)在進(jìn)行拷貝時(shí),盡量不要使用自帶的優(yōu)盤(pán),較好外接一個(gè)光驅(qū),將數(shù)據(jù)拷貝在光盤(pán)中,如果實(shí)驗(yàn)條件有限,應(yīng)在使用前將優(yōu)盤(pán)進(jìn)行格式化后方可操作。流式細(xì)胞儀是對(duì)細(xì)胞進(jìn)行自動(dòng),高通量分析和分選的裝置。
流式細(xì)胞術(shù)的特點(diǎn):1、檢測(cè)對(duì)象:?jiǎn)渭?xì)胞懸液或生物顆粒;2、檢測(cè)特點(diǎn):?jiǎn)渭?xì)胞水平分析;3、檢測(cè)參數(shù):多參數(shù)熒光信號(hào);4、檢測(cè)速度:高速,比較高達(dá)上萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/秒;5、檢測(cè)結(jié)果:精度高、準(zhǔn)確性好;可以對(duì)目標(biāo)細(xì)胞進(jìn)行分選。分析型流式細(xì)胞儀:細(xì)胞樣本分析后再進(jìn)入廢液桶,不能回收利用。分選型流式細(xì)胞儀:既能流式分析,還能對(duì)分析的目的細(xì)胞進(jìn)行分選。進(jìn)樣管道比較長(zhǎng),還需要保持無(wú)菌狀態(tài),所以分選型流式細(xì)胞儀一般只用于分選。利用流式細(xì)胞儀,溶液中的細(xì)胞以每秒1萬(wàn)個(gè)細(xì)胞的速度通過(guò)儀器的激光檢測(cè)區(qū),進(jìn)而對(duì)細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)和分析。上海配備532nm光源倍性分析儀性能參數(shù)
分選用流式細(xì)胞儀還可以分選細(xì)胞并回收細(xì)胞亞群以用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。中國(guó)Sysmex倍性分析儀CyFlow分選系統(tǒng)
CyFlow Analyser倍性分析儀是一款緊湊型流式細(xì)胞儀,可用于植物、動(dòng)物以及微生物的倍性分析儀、高分辨率DNA和基因組大小分析。由光源、光學(xué)系統(tǒng)、液流系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)軟件組成。該模塊化設(shè)備配有365nm的紫外光源和/或532nm的Nd-YAG綠色激光器。儀器配置1或2個(gè)具有光電倍增(PMT)的光學(xué)參數(shù)。適用于PI標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置和過(guò)濾器裝置(590nm長(zhǎng)通濾波器)和/DAPI/SSC(435nm長(zhǎng)通濾波器)液流系統(tǒng)(合成石英流動(dòng)室專(zhuān)門(mén)在層流樣本。取樣口配備由計(jì)算機(jī)控制的生物安全清潔系統(tǒng),避免了樣品飛沫。無(wú)污染的計(jì)算機(jī)控制精密注射泵。樣品量高達(dá)1000ul,且采樣速率可在0.2到20ul/s之間進(jìn)行連續(xù)調(diào)節(jié)。使用方便的鞘液和廢液液位傳感器。提供2*1升的玻璃瓶用于存放鞘液和廢液)中國(guó)Sysmex倍性分析儀CyFlow分選系統(tǒng)
廣州雙螺旋科學(xué)儀器有限公司屬于精細(xì)化學(xué)品的高新企業(yè),技術(shù)力量雄厚。雙螺旋科學(xué)儀器是一家有限責(zé)任公司(自然)企業(yè),一直“以人為本,服務(wù)于社會(huì)”的經(jīng)營(yíng)理念;“誠(chéng)守信譽(yù),持續(xù)發(fā)展”的質(zhì)量方針。公司擁有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),具有數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀等多項(xiàng)業(yè)務(wù)。雙螺旋科學(xué)儀器自成立以來(lái),一直堅(jiān)持走正規(guī)化、專(zhuān)業(yè)化路線,得到了廣大客戶(hù)及社會(huì)各界的普遍認(rèn)可與大力支持。