植物和鑒定多倍體的判別和鑒定方法從原理上是依據(jù)其外在和內(nèi)在的特征性衍生而來的,可以以形態(tài)外形觀察為基礎(chǔ),組織化學(xué)、葉綠體計(jì)數(shù)為輔助,進(jìn)行初步鑒別,然后再通過檢查花粉母細(xì)胞、根尖細(xì)胞或幼葉細(xì)胞的染色體數(shù)目來確定植株的倍性。染色體計(jì)數(shù)法也是目前較直接、較準(zhǔn)確的一種鑒定法。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,人們開始從分子水平入手研究多倍體,對(duì)其倍性、來源進(jìn)行鑒定??梢岳脪呙杓?xì)胞光度儀來測(cè)定DNA含量,再根據(jù)DNA含量比較來推斷細(xì)胞的倍性。同時(shí),原位雜交技術(shù)的日漸成熟也為多倍體的鑒定提供了全新途徑。GISH,F(xiàn)ISH計(jì)數(shù)的應(yīng)用不僅能鑒定細(xì)胞的倍性,而且還能鑒定其親本的來源;此外RAPD和RFLP技術(shù)也已成功地應(yīng)用到本領(lǐng)域的研究中。流式細(xì)胞儀是以流式細(xì)胞術(shù)為理論基礎(chǔ),集流體力學(xué)、激光技術(shù)、和計(jì)算機(jī)為一體的一種新型高科技儀器。廣州高精確性倍性分析儀原理
流式細(xì)胞分析是一種現(xiàn)代分析技術(shù),其在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被范圍廣使用,具有“實(shí)驗(yàn)室的 CT”之稱。雖然流式細(xì)胞術(shù)在植物研究中起步較晚,但由于它具有制樣簡(jiǎn)單用量少、操作高效快速且數(shù)據(jù)重復(fù)性高等優(yōu)勢(shì),已逐漸發(fā)展為一種常用的植物基因組大小或植物倍性研究方法。植物的核 DNA 含量和倍性水平是植物學(xué)研究中重要的基礎(chǔ)研究指標(biāo)。流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用,提高了植物核 DNA 含量檢測(cè)的準(zhǔn)確度和檢測(cè)速度.流式細(xì)胞儀克服了傳統(tǒng)鑒定方法操作難、時(shí)間長(zhǎng)等不足,可進(jìn)行快速、大量的染色體倍性分析,為后續(xù)棉花倍性育種提供技術(shù)支撐。中國(guó)智能型倍性分析儀配套試劑使用流式細(xì)胞術(shù)和成像流式細(xì)胞術(shù)分析了 10 色雙等位基因 Confetti 報(bào)告基因。
菌類的基因組大小信息很少,只有不到 2000 個(gè)物種的信息可用。到目前為止,大多數(shù)記錄都是使用靜態(tài)的、基于顯微鏡的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法獲得的,或者來自基因組測(cè)序項(xiàng)目。流式細(xì)胞術(shù)現(xiàn)在被認(rèn)為是獲得基因組大小測(cè)量的較先進(jìn)方法,并且可以使用適當(dāng)?shù)姆椒ê?DNA 標(biāo)準(zhǔn),從而能夠以快速、可靠和廉價(jià)的方式分析大多數(shù)基因組大小范圍。平均菌類基因組大小為 60 Mbp,但大小因系統(tǒng)發(fā)育而異,從 2.2到 3706 Mbp 。在幾個(gè)菌類進(jìn)化枝中,基因組大小的擴(kuò)張似乎伴隨著植物共生或植物寄生的進(jìn)化,與植物相互作用的菌類似乎比腐生菌和與動(dòng)物相互作用的菌類具有更大的基因組。雖然用于核 DNA 定量的流式細(xì)胞術(shù)在植物科學(xué)中常規(guī)用于基因組大小和倍性研究,但其在菌類生物學(xué)中的使用仍然很少。此處描述了適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)、方法和比較好實(shí)踐,旨在促進(jìn)流式細(xì)胞術(shù)在菌類基因組大小測(cè)量中更普遍和更多的應(yīng)用。
CyFiowAnalyser倍性分析儀液流系統(tǒng):-專利設(shè)計(jì)薄片狀人造石英流動(dòng)室-生物安全系統(tǒng)控制進(jìn)樣口,防止樣品溢出,降低交叉污染-計(jì)算機(jī)精確控制樣品推進(jìn)器-進(jìn)樣體積可高達(dá)1000ul,進(jìn)樣速度在0.2ul/s至20ul/s間調(diào)節(jié)-鞘液和廢液液面水平自動(dòng)檢測(cè),異常狀態(tài)自動(dòng)報(bào)警軟件其他:-WindowsTM7操作系統(tǒng)-CyViewTM軟件支持實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)獲取,顯示和分析,提供標(biāo)準(zhǔn)的FCS數(shù)據(jù)格式-DNA直方圖和點(diǎn)狀圖顯示(64-4096檢測(cè)通道)-直接報(bào)告為PDF格式,數(shù)據(jù)導(dǎo)出至Excel和Powerpoint格式-自動(dòng)進(jìn)行96孔板倍性分析。CyFlow Analyser倍性分析儀一分鐘完成倍性分析全過程。
CyFlow Ploidy Analyser Demo倍性分析儀注意事項(xiàng):1、儀器的外殼不要隨意打開;、2實(shí)驗(yàn)樣品的前處理要和儀器盡量避開,比方液體飛濺損傷儀器;3、上機(jī)操作請(qǐng)一定要進(jìn)行應(yīng)用培訓(xùn),或者請(qǐng)參加過培訓(xùn)的老師、同學(xué)進(jìn)行指導(dǎo),切不可單獨(dú)上機(jī);、4制作好預(yù)約流程,盡量避免一日之內(nèi)重復(fù)開機(jī),并做好實(shí)驗(yàn)上機(jī)記錄,以更好的評(píng)估儀器的使用情況;5、如果操作過程中出現(xiàn)堵孔現(xiàn)象,啟動(dòng)清洗功能,并重新用超純水沖洗2min;6、將儀器的操作手冊(cè)、光路圖及部件做好詳細(xì)表格標(biāo)注,放在實(shí)驗(yàn)室明顯的地方,方便使用者查閱;7、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)在進(jìn)行拷貝時(shí),盡量不要使用自帶的優(yōu)盤,較好外接一個(gè)光驅(qū),將數(shù)據(jù)拷貝在光盤中,如果實(shí)驗(yàn)條件有限,應(yīng)在使用前將優(yōu)盤進(jìn)行格式化后方可操作。我們使用流式細(xì)胞術(shù)和成像流式細(xì)胞術(shù)分析了 10 色雙等位基因 Confetti 報(bào)告基因。珠三角全自動(dòng)倍性分析儀
流式細(xì)胞術(shù)可用于鑒別死細(xì)胞和活細(xì)胞等。廣州高精確性倍性分析儀原理
CyFlow Analyser倍性分析儀計(jì)算機(jī)(內(nèi)置裝有WIN7系統(tǒng)的計(jì)算機(jī)。外屏可選雙畫面模式。集成15TFT LED顯示屏。4個(gè)USB端口。彩色打印機(jī)。鼠標(biāo)和鍵盤。以太網(wǎng)連接)軟件(配備Windows 7操作系統(tǒng)。CyView軟件可進(jìn)行實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)采集、數(shù)據(jù)顯示和分析。流式細(xì)胞儀標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)格式FCS3。16位分辨率。支持多語(yǔ)言。定位積顆粒計(jì)數(shù)功能。自動(dòng)啟動(dòng)和自動(dòng)存儲(chǔ)功能。DNA直方圖和雙參數(shù)點(diǎn)圖顯示64-4096個(gè)頻道顯示。線性和對(duì)數(shù)顯示。用不同的算法進(jìn)行手動(dòng)和自動(dòng)DNA峰值分析。雙粘體辨別技術(shù)。直接報(bào)告為PDF文件。多管報(bào)告。數(shù)據(jù)以Excel和Power point格式導(dǎo)出。96孔板倍體分析的自動(dòng)化工作流程。設(shè)備要求 電源:100/240VAC,60VA,50/60HZ 操作環(huán)境:溫度為15至30℃,相對(duì)濕度20-85%(非冷凝),儀器置于潔凈室中,應(yīng)避免陽(yáng)光直射)廣州高精確性倍性分析儀原理
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