隨機多色轉(zhuǎn)基因標記系統(tǒng),開始設(shè)計用于在人口稠密的組織中對神經(jīng)元投射進行大規(guī)模映射,它們已被重新用于多種用途。傳統(tǒng)上,讀數(shù)依賴于原位成像,提供有關(guān)組織基質(zhì)內(nèi)細胞定位的信息。然而,該技術(shù)近段的應(yīng)用已經(jīng)轉(zhuǎn)移到造血衍生的運動細胞類型,例如 T 和 B 淋巴細胞及其后代,創(chuàng)造了一個未滿足的需求,即在體外調(diào)查更大的細胞群,以確定標記密度或顏色表示隨時間的偏差,以讀出克隆擴增和選擇效應(yīng)。這些報告基因開始是為成像方法設(shè)計的,在熒光團的光譜特性及其亞細胞定位中編碼信息,使其不適合傳統(tǒng)的流式細胞術(shù)分析。高內(nèi)涵成像和成像流式細胞術(shù)的出現(xiàn)開始彌合了流式細胞術(shù)和成像之間的差距。我們使用流式細胞術(shù)和成像流式細胞術(shù)分析了 10 色雙等位基因 Confetti 報告基因。除了用作隨時間推移測量報告基因標記密度和顏色分布的高通量方法外,它還為依賴類似讀數(shù)的新研究途徑打開了大門,例如,克隆動力學(xué)。流式細胞分析是一種現(xiàn)代分析技術(shù),其在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被范圍廣使用,具有“實驗室的 CT”之稱。國產(chǎn)配備365nm光源倍性分析儀DNA熒光染料
細胞衰老是衰老的標志,也是治療方法的有前途的目標。衰老細胞的鑒定需要多種生物標志物和復(fù)雜的實驗程序,導(dǎo)致變異性增加和敏感性降低。在這里,我們提出了一種簡單且范圍廣適用的成像流式細胞術(shù) (IFC) 方法。該方法基于測量自發(fā)熒光和形態(tài)學(xué)參數(shù),并應(yīng)用先進的人工智能 (AI) 和機器學(xué)習(xí) (ML) 工具。我們表明,該方法的結(jié)果優(yōu)于測量經(jīng)典衰老標記、衰老相關(guān) β-半乳糖苷酶 (SA-β-Gal) 獲得的結(jié)果。我們提供的證據(jù)表明,這種方法具有診斷或預(yù)后應(yīng)用的潛力,因為它能夠檢測從受終末期心力衰竭影響的患者心臟中分離出來的心臟周細胞的衰弱。我們還證明它可用于量化“體內(nèi)”衰老,并可用于評估抵抗老化化合物的作用。我們得出的結(jié)論是,這種方法可以用作一種簡單快速的衰老測定,而與細胞的來源和誘導(dǎo)衰老的程序無關(guān)。深圳全自動倍性分析儀細胞周期檢測流式細胞儀具有制樣簡單用量少、操作高效快速且數(shù)據(jù)重復(fù)性高等優(yōu)勢。
利用流式細胞儀快速檢測棉花 DNA 倍性,為棉花的倍性鑒定和育種研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。以陸地棉珂字棉 312( Gossypium hirsutumLinn.)的老葉和嫩葉為試材,用 WPB 和 LB01 解離液提取細胞核,經(jīng) PI 染色后使用流式細胞儀檢測細胞倍性。結(jié)果發(fā)現(xiàn),用 WPB 解離液提取棉花嫩葉獲得的細胞核用于倍性檢測效果更好,表現(xiàn)為主峰離子團清晰而集中、背景碎片少,可以得到明顯的主峰、雜峰更少,且收集到的細胞核數(shù)目更多。初步建立了利用流式細胞儀快速檢測棉花 DNA 倍性的方法。
擬南芥是一種生長迅速的小型植物,可進行范圍廣的核內(nèi)復(fù)制,在不發(fā)生有絲分裂的情況下進行基因組擴增。該物種含有有花植物中較小的基因組,約157Mb,C值為0.321pg。這些特征使得擬南芥特別適合作為測定基因組大小的內(nèi)參,并且可以用于儀器線性度的質(zhì)量控制。用于流式實驗的植物樣品通常只需少量植物組織。使用標準手術(shù)刀片將植物組織切碎并浸泡于緩沖液中,過濾含植物細胞核的勻漿以去除大的碎片,用DNA特異性熒光染料進行標記,然后在流式細胞儀上采集數(shù)據(jù),根據(jù)每個細胞核的熒光強度來計算DNA含量。通過與已知標準品比較,可以用熒光強度換算出DNA含量的相對值。擬南芥通常用作內(nèi)參,只需將內(nèi)參樣品和未知樣品的細胞核同時進行分離、染色和分析即可。CyFlow Analyser倍性分析儀 染色速度快:DNA倍體標本上機檢測小于2分鐘。
使用熒光核酸染料標記植物中DNA含量,隨后用流式細胞儀高通量進行植物倍性分析,已經(jīng)成為植物研究中的常用分析手段[1]。相較傳統(tǒng)的根尖壓片染色體計數(shù),流式細胞法制備樣本簡單,無需制備中期染色體,通量高,結(jié)果準確,并且可以兼容幾乎所有植物的任何組織。使用Sysmex-Partec原廠倍性分析試劑和CellTrics過濾器,只需要:1、切碎2、過濾3、上機三步,2分鐘內(nèi)完成倍性分析實驗。使用Sysmex-Partec CyFlow PA對植株基因組大小進行預(yù)測,染色體倍性進行預(yù)測,對突變株進行倍性鑒定,構(gòu)建植物進化樹。流式細胞儀是對細胞進行自動,高通量分析和分選的裝置。上海Sysmex倍性分析儀生命科學(xué)用品
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樣品上樣到儀器 典型的實驗從單細胞懸浮液中的熒光標記細胞開始,但是可以使用任何顆粒類型的樣品。將樣品置于流式細胞儀上,樣品被吸到儀器中,細胞懸浮在一種被稱為鞘液的生理緩沖液。流體系統(tǒng)(管道、泵和閥)將初始樣品懸浮液排列成單列細胞流,并使細胞通過流式細胞儀以進行分析。流式細胞儀的流體學(xué)。流動池(也稱為流式小室)使樣品中的細胞(顆粒)排成一列。這是單細胞分析的關(guān)鍵步驟。激光檢測點 細胞與激光發(fā)生相互作用的地方稱為激光檢測點。您也可能聽過它的另一個名字“激光攔截”。這是熒光檢測發(fā)生的地方。當激光束照射到單個細胞時,一些光會撞到細胞內(nèi)的物理結(jié)構(gòu),導(dǎo)致光線散射。這種光散射可被測量,并且與相對細胞大小和細胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)相關(guān)。這些測量稱為前向角散射(FSC)和側(cè)角散射(SSC),取決于收集光的位置相對于激光路徑的角度。幾乎同時,來自激光器的光激發(fā)與細胞相關(guān)的所有熒光團,產(chǎn)生熒光發(fā)射。所有這些光被檢測器收集并通過流式細胞儀的電子元件進行處理。通過激光檢測點之后,流體系統(tǒng)會將不需要的細胞輸送到廢液桶中。在細胞分選儀中,細胞將在激光檢測點被分選和輸送到收集管中,以供后續(xù)實驗使用。國產(chǎn)配備365nm光源倍性分析儀DNA熒光染料
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