華南地區(qū)智能型倍性分析儀細(xì)胞周期檢測(cè)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-01-19

在遺傳學(xué)上,一般是通過(guò)染色體的數(shù)量來(lái)確定植物的倍性,隨著科技的發(fā)展,目前植物倍性鑒定有多種方法。在形態(tài)學(xué)層次上,觀察不同倍體植株的形態(tài)特征的差異,可間接確定植株的倍性,但準(zhǔn)確性不夠高,而且要在植株生長(zhǎng)發(fā)育的特定時(shí)期才能鑒定,往往難以及時(shí)采取染色體加倍措施,致使育種材料不能得到及時(shí)利用,故常不被采用。在分子生物學(xué)層次上,利用流式細(xì)胞儀測(cè)定植物基因組DNA含量,即C值的大小,也可直接確定再生植株的倍性。由于該方法所用的儀器設(shè)備昂貴,普通實(shí)驗(yàn)室難以具備,故制約了該方法的應(yīng)用和推廣。在細(xì)胞學(xué)層次上,有染色體計(jì)數(shù)直接鑒定方法和葉片保衛(wèi)細(xì)胞葉綠體計(jì)數(shù)間接鑒定法。染色體計(jì)數(shù)法準(zhǔn)確、可靠,但費(fèi)時(shí)而且需要熟練的細(xì)胞學(xué)操作技術(shù)。流式細(xì)胞儀主要由流動(dòng)室及液流系統(tǒng)、激光器及光學(xué)系統(tǒng)、光電管及檢測(cè)系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)及分析系統(tǒng)組成。華南地區(qū)智能型倍性分析儀細(xì)胞周期檢測(cè)

樣品上樣到儀器 典型的實(shí)驗(yàn)從單細(xì)胞懸浮液中的熒光標(biāo)記細(xì)胞開(kāi)始,但是可以使用任何顆粒類型的樣品。將樣品置于流式細(xì)胞儀上,樣品被吸到儀器中,細(xì)胞懸浮在一種被稱為鞘液的生理緩沖液。流體系統(tǒng)(管道、泵和閥)將初始樣品懸浮液排列成單列細(xì)胞流,并使細(xì)胞通過(guò)流式細(xì)胞儀以進(jìn)行分析。流式細(xì)胞儀的流體學(xué)。流動(dòng)池(也稱為流式小室)使樣品中的細(xì)胞(顆粒)排成一列。這是單細(xì)胞分析的關(guān)鍵步驟。激光檢測(cè)點(diǎn) 細(xì)胞與激光發(fā)生相互作用的地方稱為激光檢測(cè)點(diǎn)。您也可能聽(tīng)過(guò)它的另一個(gè)名字“激光攔截”。這是熒光檢測(cè)發(fā)生的地方。當(dāng)激光束照射到單個(gè)細(xì)胞時(shí),一些光會(huì)撞到細(xì)胞內(nèi)的物理結(jié)構(gòu),導(dǎo)致光線散射。這種光散射可被測(cè)量,并且與相對(duì)細(xì)胞大小和細(xì)胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)相關(guān)。這些測(cè)量稱為前向角散射(FSC)和側(cè)角散射(SSC),取決于收集光的位置相對(duì)于激光路徑的角度。幾乎同時(shí),來(lái)自激光器的光激發(fā)與細(xì)胞相關(guān)的所有熒光團(tuán),產(chǎn)生熒光發(fā)射。所有這些光被檢測(cè)器收集并通過(guò)流式細(xì)胞儀的電子元件進(jìn)行處理。通過(guò)激光檢測(cè)點(diǎn)之后,流體系統(tǒng)會(huì)將不需要的細(xì)胞輸送到廢液桶中。在細(xì)胞分選儀中,細(xì)胞將在激光檢測(cè)點(diǎn)被分選和輸送到收集管中,以供后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。中國(guó)配備532nm光源倍性分析儀生命科學(xué)用品CyFlow Analyser倍性分析儀靈活便捷:結(jié)構(gòu)緊湊,便于移動(dòng),適用于多種工作場(chǎng)所。

細(xì)胞核DNA含量和基因組大小對(duì)于研究生物的多樣性至關(guān)重要,尤其是在基礎(chǔ)植物學(xué)和應(yīng)用植物學(xué)等多個(gè)研究領(lǐng)域。這些研究的基礎(chǔ)是細(xì)胞的內(nèi)多倍化(即C值)。細(xì)胞的內(nèi)多倍化**了細(xì)胞核內(nèi)DNA含量倍增,指的是同一個(gè)體內(nèi)相鄰體細(xì)胞具有多種倍性的細(xì)胞核現(xiàn)象,由細(xì)胞內(nèi)復(fù)制產(chǎn)生。細(xì)胞內(nèi)多倍化在真核生物中普遍存在,尤其在植物中變化范圍較大,對(duì)研究個(gè)體的生長(zhǎng)發(fā)育具有重要的生物學(xué)意義。盡管C值非常重要,但是目前已知C值的植物品種*占所有植物品種的一小部分?;诹魇降臋z測(cè)技術(shù)簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確、可靠,目前該技術(shù)已作為測(cè)定植物勻漿中C值的優(yōu)先方法,并且在植物學(xué)中的應(yīng)用越來(lái)越范圍廣。

待測(cè)細(xì)胞被制備成單細(xì)胞懸液,經(jīng)特異性熒光染料染色后置于專門(mén)樣品管中,在氣體壓力推動(dòng)下被壓入流動(dòng)室,流動(dòng)室內(nèi)充滿鞘液(不含細(xì)胞或微粒的緩沖液),在高壓作用下從鞘液管?chē)姵霭?xì)胞,使細(xì)胞排成單列形成細(xì)胞液柱,依次通過(guò)檢測(cè)區(qū)。液柱與高度聚焦的激光束垂直相交,被熒光染料染色的細(xì)胞受到激光激發(fā)產(chǎn)生熒光信號(hào)和散射光信號(hào),這些光信號(hào)通過(guò)波長(zhǎng)選擇的濾光片,由相應(yīng)的光電管和電子檢測(cè)器接收并轉(zhuǎn)換成電信號(hào),經(jīng)放大器放大后送入計(jì)算機(jī)并進(jìn)行分析顯示和結(jié)果輸出,測(cè)定的結(jié)果常用單參數(shù)直方圖、雙參數(shù)散點(diǎn)圖、輪廓(等高)圖和三維立體圖來(lái)表示。用熒光核酸染料標(biāo)記植物中DNA含量,流式細(xì)胞儀高通量進(jìn)行植物倍性分析,已成為植物研究中的常用分析手段。

植物染色體倍性鑒定在植物遺傳育種中具有十分重要的作用。在育種過(guò)程中,通過(guò)花藥(花粉小孢子)、未受精子房等途徑再生出的植株,往往是單倍體、雙單倍體及其他倍性植株的混合群體,有效的倍性鑒定是了解其遺傳背景和進(jìn)一步應(yīng)用的基礎(chǔ)。多倍體育種是植物育種的一種途徑之一,它不僅可以對(duì)性狀進(jìn)行改良,還可以提高植物體內(nèi)各種有效成分的含量。利用倍性鑒定,準(zhǔn)確地辨認(rèn)多倍體并將其挑選出來(lái),也是多倍體育種中的重要環(huán)節(jié)一環(huán)。另外,倍性鑒定也可用于分析細(xì)胞分裂活動(dòng)等生理和遺傳研究。倍性鑒定特別是苗期倍性鑒定,不僅可以減少育種工作量,而且可以減少土地和資金的投入。國(guó)內(nèi)外關(guān)于各種鑒定方法報(bào)道不少,但較分散。本文綜述了各種倍性鑒定方法并對(duì)其優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行了評(píng)選。不同倍性植株在細(xì)胞學(xué)和形態(tài)解剖學(xué)上具有明顯差異,目前主要有兩大類型直接鑒定法和間接鑒定法。倍性分析儀進(jìn)行基因組大小需通過(guò)DNA嵌入染料進(jìn)行化學(xué)計(jì)量染色,該染料應(yīng)具有較低的DNA峰值變異系數(shù)。山東配備532nm光源倍性分析儀試劑盒

CyFlow Analyser倍性分析儀可以高分辨率DNA和基因組大小分析。華南地區(qū)智能型倍性分析儀細(xì)胞周期檢測(cè)

染色體分析傳統(tǒng)上通過(guò)對(duì)中期擴(kuò)散進(jìn)行核型分析,或通過(guò)對(duì)間期細(xì)胞或中期擴(kuò)散進(jìn)行熒光原位雜交 (FISH) 進(jìn)行。流式細(xì)胞術(shù)在 1970 年代被引入作為分析染色體數(shù)量(倍性)和結(jié)構(gòu)(端粒長(zhǎng)度)的新方法,其數(shù)據(jù)解釋主要基于熒光強(qiáng)度。主要由于分析方面的挑戰(zhàn),這項(xiàng)技術(shù)很少被人類細(xì)胞遺傳學(xué)應(yīng)用所采用。成像流式細(xì)胞術(shù)的引入,以及在標(biāo)準(zhǔn)多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)定量工具中添加數(shù)字圖像,增加了一個(gè)新的維度。當(dāng)數(shù)據(jù)只限于熒光強(qiáng)度時(shí),顯示染色體和 FISH 信號(hào)的能力克服了固有的困難。這個(gè)領(lǐng)域現(xiàn)在正在向前發(fā)展,正在開(kāi)發(fā)評(píng)估懸浮全細(xì)胞(正常和惡性)染色體數(shù)量和結(jié)構(gòu)的方法。近的一項(xiàng)進(jìn)展是包括免疫表型分析,這樣抗原表達(dá)可用于識(shí)別特定細(xì)胞的特定染色體及其異常。這種能力已在血*中得到證實(shí),例如慢性淋巴細(xì)胞白血病。可實(shí)現(xiàn)的高靈敏度和特異性突出了流式細(xì)胞術(shù)在細(xì)胞基因組應(yīng)用(即診斷和疾病監(jiān)測(cè))中的潛在成像應(yīng)用。這篇綜述介紹并描述了成像流式細(xì)胞儀在人類染色體染色體分析中的發(fā)展、現(xiàn)狀和應(yīng)用。華南地區(qū)智能型倍性分析儀細(xì)胞周期檢測(cè)

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