美國微滴式數(shù)字PCR市場前景

來源: 發(fā)布時間:2023-01-14

naica®六通道微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng),源于crystal微滴芯片數(shù)字PCR技術,自動化微滴生成和擴增,每個樣本孔可實現(xiàn)6熒光通道的檢測,智能化識別微滴并進行質(zhì)控,3小時內(nèi)即可獲得至少6個靶標基因的一定程度上拷貝數(shù)濃度,融合傳統(tǒng)微滴式和芯片式優(yōu)勢,被稱為下一代數(shù)字PCR技術。只需一步移液操作,將PCR反應液加載于創(chuàng)新型微流控芯片,naica®六通道微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)即可自動生成單層平鋪的2D微滴陣列,隨后對每個微滴進行溫度均勻一致的PCR擴增后,進行六通道熒光信號采集,計數(shù)陰陽性微滴,通過泊松分布計算獲得靶標基因一定程度上拷貝數(shù)濃度。3D數(shù)字PCR是基于納米流體芯片進行檢測,通過一次檢測,將樣品分到數(shù)千個單獨的PCR。美國微滴式數(shù)字PCR市場前景

對于檢測需要高靈敏度以及技術確認的情況下,數(shù)字PCR技術也可以發(fā)揮重要作用。技術數(shù)據(jù)表明,數(shù)字PCR技術對的比較低檢測下限可到2copies/ml,比qPCR靈敏度提升了100倍。經(jīng)測試,數(shù)字PCR在檢測和診斷的某些方面優(yōu)于金標準qPCR,尤其是在低病毒載量樣本中,相比起qPCR,數(shù)字PCR特異性、靈敏度、重現(xiàn)性和檢測限受影響更小。因此,未來預計數(shù)字PCR技術也將在類疾病中得到更加廣的應用。數(shù)字PCR的應用甚廣,除了可應用于進行突變的檢測以外,也可運用于基因擴增的檢測。通過數(shù)字PCR技術可建立多重熒光體系,用于同時檢測比如非小細胞肺中常見的MET和HER2耐藥擴增。有研究報道,使用數(shù)字PCR技術對436例非小細胞肺樣品進行檢測,并挑選樣本驗證了數(shù)字PCR與RNA fish的檢測一致性。結(jié)果表明,該數(shù)字PCR技術在保證了基因擴增檢測準確性的同時,還節(jié)約了檢測時間。美國微滴式數(shù)字PCR市場前景三重ddPCR檢測體系存在的問題:不同位點檢測體系之間的cross-reactivity。

在精細診療領域,患者外周血中的循環(huán)DNA(ctDNA),在的早期篩查,圍術期監(jiān)測,藥物療效評估,預后等方面具有重要的臨床應用價值。在肺液體活檢領域,EGFR突變由于其在東亞人群中的高突變率,實現(xiàn)精細檢測顯得尤為重要。研究表明,相較于熒光定量PCR,數(shù)字PCR對于血液ctDNA的檢測靈敏度更高(0.01%),EGFR突變的陽性檢出率也更高。在患者術后復發(fā)檢測中,數(shù)字PCR評估出的ctDNA陽性,可以早于影像學數(shù)月提前揭示出患者復發(fā)。因此,該項技術在肺精細診療中具有重要的作用。

目前dPCR主要有兩種形式,芯片式和液滴式,但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應器或微滴中,每個反應器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個。這樣經(jīng)過PCR循環(huán)之后,有一個核酸分子模板的反應器就會給出熒光信號,沒有模板的反應器就沒有熒光信號。根據(jù)相對比例和反應器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度??梢允褂脦追N不同的方法來分配樣品,包括微孔板,毛細管,油乳劑和帶有核酸結(jié)合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過假設分子種群遵循泊松分布來估計不同分子的數(shù)量,根據(jù)泊松分布的原理,反應體系中目標分子的拷貝數(shù)可以通過公式A=-ln[(N-X)/N]*N計算,從而解決了多個目標分子存在于單個液滴中的可能性。dPCR被稱作第三代PCR技術,但dPCR技術的廣泛應用逐漸顯現(xiàn)出一些不足之處。

dPCR的測量結(jié)果通常表示為含量,即拷貝數(shù)值或轉(zhuǎn)基因質(zhì)量百分比,而QPCR結(jié)果通常表示為拷貝數(shù)的質(zhì)量分數(shù)。目前市場上可購買到大多數(shù)轉(zhuǎn)基因標準物質(zhì),以qPCR定值的標準物質(zhì)是以拷貝數(shù)(單倍體基因組當量)的質(zhì)量分數(shù)來表示特性量;以dPCR定值的標準物質(zhì)直接采用拷貝數(shù)比例來表示特性量。不同方法使用不同的表示方式,會造成測量結(jié)果不可比。因此質(zhì)量分數(shù)、拷貝數(shù)和拷貝數(shù)比例之間的關系需要轉(zhuǎn)化,才能得到單位一致,數(shù)值可比的數(shù)據(jù)。EU聯(lián)合研究中心建議使用轉(zhuǎn)換因子從拷貝數(shù)換算到質(zhì)量分數(shù)。楊雁峰博士堅信數(shù)字PCR是可以應用于無創(chuàng)產(chǎn)前篩查的理想技術之一,這也是他2016年創(chuàng)立塔歌生物的初衷。廣州賽默飛數(shù)字PCR儀器

模板 DNA 量越多,熒光達到域值的循環(huán)數(shù)越少,即 Ct 值越小。美國微滴式數(shù)字PCR市場前景

與基礎化工行業(yè)相比,精細化工行業(yè)主要生產(chǎn)精細化學品,是在基礎化學品的基礎上深加工的產(chǎn)物,行業(yè)內(nèi)產(chǎn)品覆蓋了社會生活的各個方面,從涂料、電子、油墨、醫(yī)藥、造紙、食品添加劑等,到航空航天、汽車、機械、建筑新材料、新能源技術等高新技術方面均得到非常普遍的應用,在國民經(jīng)濟的發(fā)展中起到了不可替代的作用。由于精細化工產(chǎn)業(yè)在國民經(jīng)濟、地區(qū)產(chǎn)業(yè)中的重要作用,其發(fā)展程度也被視為地區(qū)戰(zhàn)略發(fā)展的重要部分。隨著社會經(jīng)濟的進一步發(fā)展,人們對數(shù)字PCR,純水機,病理切片機,倍性分析儀的需求將進一步上升,電子與信息化學品、表面工程化學品、醫(yī)藥化學品等將得到進一步的發(fā)展,全球范圍內(nèi)精細化學品市場規(guī)模將保持高于傳統(tǒng)化工行業(yè)的速度飛速增長。精細化學品主要應用于農(nóng)業(yè)、建筑業(yè)、紡織業(yè)、醫(yī)藥業(yè)、電子設備等行業(yè)。隨著下游各行業(yè)的進一步發(fā)展,對精細化工材料的需求數(shù)量上升,性能要求進一步提高,精細化工行業(yè)與下游的行業(yè)之間的關系變得更加緊密。新興的服務型市場對精細化工產(chǎn)品的需求為中國化工產(chǎn)品開辟新的國際市場,以異丙胺為例,作為中國大陸生產(chǎn)的低碳脂肪胺中進出口貿(mào)易量較大的產(chǎn)品,主要的出口目的地是東南亞地區(qū)、南美和大洋洲,如東南亞地區(qū)的馬來西亞、印度、印度尼西亞、泰國等,南美的巴西和阿根廷等,大洋洲的澳大利亞、新西蘭,以及中國臺灣省,這些地區(qū)對其進口均沒有限制。美國微滴式數(shù)字PCR市場前景

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