美國(guó)微滴式數(shù)字PCR市場(chǎng)前景

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-01-14

naica®六通道微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng),源于crystal微滴芯片數(shù)字PCR技術(shù),自動(dòng)化微滴生成和擴(kuò)增,每個(gè)樣本孔可實(shí)現(xiàn)6熒光通道的檢測(cè),智能化識(shí)別微滴并進(jìn)行質(zhì)控,3小時(shí)內(nèi)即可獲得至少6個(gè)靶標(biāo)基因的一定程度上拷貝數(shù)濃度,融合傳統(tǒng)微滴式和芯片式優(yōu)勢(shì),被稱(chēng)為下一代數(shù)字PCR技術(shù)。只需一步移液操作,將PCR反應(yīng)液加載于創(chuàng)新型微流控芯片,naica®六通道微滴芯片數(shù)字PCR系統(tǒng)即可自動(dòng)生成單層平鋪的2D微滴陣列,隨后對(duì)每個(gè)微滴進(jìn)行溫度均勻一致的PCR擴(kuò)增后,進(jìn)行六通道熒光信號(hào)采集,計(jì)數(shù)陰陽(yáng)性微滴,通過(guò)泊松分布計(jì)算獲得靶標(biāo)基因一定程度上拷貝數(shù)濃度。3D數(shù)字PCR是基于納米流體芯片進(jìn)行檢測(cè),通過(guò)一次檢測(cè),將樣品分到數(shù)千個(gè)單獨(dú)的PCR。美國(guó)微滴式數(shù)字PCR市場(chǎng)前景

對(duì)于檢測(cè)需要高靈敏度以及技術(shù)確認(rèn)的情況下,數(shù)字PCR技術(shù)也可以發(fā)揮重要作用。技術(shù)數(shù)據(jù)表明,數(shù)字PCR技術(shù)對(duì)的比較低檢測(cè)下限可到2copies/ml,比qPCR靈敏度提升了100倍。經(jīng)測(cè)試,數(shù)字PCR在檢測(cè)和診斷的某些方面優(yōu)于金標(biāo)準(zhǔn)qPCR,尤其是在低病毒載量樣本中,相比起qPCR,數(shù)字PCR特異性、靈敏度、重現(xiàn)性和檢測(cè)限受影響更小。因此,未來(lái)預(yù)計(jì)數(shù)字PCR技術(shù)也將在類(lèi)疾病中得到更加廣的應(yīng)用。數(shù)字PCR的應(yīng)用甚廣,除了可應(yīng)用于進(jìn)行突變的檢測(cè)以外,也可運(yùn)用于基因擴(kuò)增的檢測(cè)。通過(guò)數(shù)字PCR技術(shù)可建立多重?zé)晒怏w系,用于同時(shí)檢測(cè)比如非小細(xì)胞肺中常見(jiàn)的MET和HER2耐藥擴(kuò)增。有研究報(bào)道,使用數(shù)字PCR技術(shù)對(duì)436例非小細(xì)胞肺樣品進(jìn)行檢測(cè),并挑選樣本驗(yàn)證了數(shù)字PCR與RNA fish的檢測(cè)一致性。結(jié)果表明,該數(shù)字PCR技術(shù)在保證了基因擴(kuò)增檢測(cè)準(zhǔn)確性的同時(shí),還節(jié)約了檢測(cè)時(shí)間。美國(guó)微滴式數(shù)字PCR市場(chǎng)前景三重ddPCR檢測(cè)體系存在的問(wèn)題:不同位點(diǎn)檢測(cè)體系之間的cross-reactivity。

在精細(xì)診療領(lǐng)域,患者外周血中的循環(huán)DNA(ctDNA),在的早期篩查,圍術(shù)期監(jiān)測(cè),藥物療效評(píng)估,預(yù)后等方面具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。在肺液體活檢領(lǐng)域,EGFR突變由于其在東亞人群中的高突變率,實(shí)現(xiàn)精細(xì)檢測(cè)顯得尤為重要。研究表明,相較于熒光定量PCR,數(shù)字PCR對(duì)于血液ctDNA的檢測(cè)靈敏度更高(0.01%),EGFR突變的陽(yáng)性檢出率也更高。在患者術(shù)后復(fù)發(fā)檢測(cè)中,數(shù)字PCR評(píng)估出的ctDNA陽(yáng)性,可以早于影像學(xué)數(shù)月提前揭示出患者復(fù)發(fā)。因此,該項(xiàng)技術(shù)在肺精細(xì)診療中具有重要的作用。

目前dPCR主要有兩種形式,芯片式和液滴式,但基本原理都是將大量稀釋后的核酸溶液分散至芯片的微反應(yīng)器或微滴中,每個(gè)反應(yīng)器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個(gè)。這樣經(jīng)過(guò)PCR循環(huán)之后,有一個(gè)核酸分子模板的反應(yīng)器就會(huì)給出熒光信號(hào),沒(méi)有模板的反應(yīng)器就沒(méi)有熒光信號(hào)。根據(jù)相對(duì)比例和反應(yīng)器的體積,就可以推算出原始溶液的核酸濃度??梢允褂脦追N不同的方法來(lái)分配樣品,包括微孔板,毛細(xì)管,油乳劑和帶有核酸結(jié)合表面的小型化腔室陣列。樣品的分配使人們可以通過(guò)假設(shè)分子種群遵循泊松分布來(lái)估計(jì)不同分子的數(shù)量,根據(jù)泊松分布的原理,反應(yīng)體系中目標(biāo)分子的拷貝數(shù)可以通過(guò)公式A=-ln[(N-X)/N]*N計(jì)算,從而解決了多個(gè)目標(biāo)分子存在于單個(gè)液滴中的可能性。dPCR被稱(chēng)作第三代PCR技術(shù),但dPCR技術(shù)的廣泛應(yīng)用逐漸顯現(xiàn)出一些不足之處。

dPCR的測(cè)量結(jié)果通常表示為含量,即拷貝數(shù)值或轉(zhuǎn)基因質(zhì)量百分比,而QPCR結(jié)果通常表示為拷貝數(shù)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。目前市場(chǎng)上可購(gòu)買(mǎi)到大多數(shù)轉(zhuǎn)基因標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),以qPCR定值的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是以拷貝數(shù)(單倍體基因組當(dāng)量)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)來(lái)表示特性量;以dPCR定值的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)直接采用拷貝數(shù)比例來(lái)表示特性量。不同方法使用不同的表示方式,會(huì)造成測(cè)量結(jié)果不可比。因此質(zhì)量分?jǐn)?shù)、拷貝數(shù)和拷貝數(shù)比例之間的關(guān)系需要轉(zhuǎn)化,才能得到單位一致,數(shù)值可比的數(shù)據(jù)。EU聯(lián)合研究中心建議使用轉(zhuǎn)換因子從拷貝數(shù)換算到質(zhì)量分?jǐn)?shù)。楊雁峰博士堅(jiān)信數(shù)字PCR是可以應(yīng)用于無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查的理想技術(shù)之一,這也是他2016年創(chuàng)立塔歌生物的初衷。廣州賽默飛數(shù)字PCR儀器

模板 DNA 量越多,熒光達(dá)到域值的循環(huán)數(shù)越少,即 Ct 值越小。美國(guó)微滴式數(shù)字PCR市場(chǎng)前景

與基礎(chǔ)化工行業(yè)相比,精細(xì)化工行業(yè)主要生產(chǎn)精細(xì)化學(xué)品,是在基礎(chǔ)化學(xué)品的基礎(chǔ)上深加工的產(chǎn)物,行業(yè)內(nèi)產(chǎn)品覆蓋了社會(huì)生活的各個(gè)方面,從涂料、電子、油墨、醫(yī)藥、造紙、食品添加劑等,到航空航天、汽車(chē)、機(jī)械、建筑新材料、新能源技術(shù)等高新技術(shù)方面均得到非常普遍的應(yīng)用,在國(guó)民經(jīng)濟(jì)的發(fā)展中起到了不可替代的作用。由于精細(xì)化工產(chǎn)業(yè)在國(guó)民經(jīng)濟(jì)、地區(qū)產(chǎn)業(yè)中的重要作用,其發(fā)展程度也被視為地區(qū)戰(zhàn)略發(fā)展的重要部分。隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的進(jìn)一步發(fā)展,人們對(duì)數(shù)字PCR,純水機(jī),病理切片機(jī),倍性分析儀的需求將進(jìn)一步上升,電子與信息化學(xué)品、表面工程化學(xué)品、醫(yī)藥化學(xué)品等將得到進(jìn)一步的發(fā)展,全球范圍內(nèi)精細(xì)化學(xué)品市場(chǎng)規(guī)模將保持高于傳統(tǒng)化工行業(yè)的速度飛速增長(zhǎng)。精細(xì)化學(xué)品主要應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、建筑業(yè)、紡織業(yè)、醫(yī)藥業(yè)、電子設(shè)備等行業(yè)。隨著下游各行業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展,對(duì)精細(xì)化工材料的需求數(shù)量上升,性能要求進(jìn)一步提高,精細(xì)化工行業(yè)與下游的行業(yè)之間的關(guān)系變得更加緊密。新興的服務(wù)型市場(chǎng)對(duì)精細(xì)化工產(chǎn)品的需求為中國(guó)化工產(chǎn)品開(kāi)辟新的國(guó)際市場(chǎng),以異丙胺為例,作為中國(guó)大陸生產(chǎn)的低碳脂肪胺中進(jìn)出口貿(mào)易量較大的產(chǎn)品,主要的出口目的地是東南亞地區(qū)、南美和大洋洲,如東南亞地區(qū)的馬來(lái)西亞、印度、印度尼西亞、泰國(guó)等,南美的巴西和阿根廷等,大洋洲的澳大利亞、新西蘭,以及中國(guó)臺(tái)灣省,這些地區(qū)對(duì)其進(jìn)口均沒(méi)有限制。美國(guó)微滴式數(shù)字PCR市場(chǎng)前景

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