造模方法 頸部備皮常規(guī)消毒,取頸正中切口剪開皮膚,分離皮膚下軟組織并暴露頸動脈鞘; 游離出頸總動脈1.5cm,穿線備用; 向遠心端找到頸外側(cè)動脈,游離涌現(xiàn)結(jié)扎,提起頸總備用線,在近心端,遠心端用動脈夾夾住; 在近心端動脈夾處,用5mL注射器針頭刺破血管,稍微提起動脈夾,用鑷子夾住線栓,從小口插入動脈后,去掉遠心端動脈夾,然后用鑷子夾住線栓,線栓插入到頸內(nèi)距分叉處1.8-2.0cm; 用備用線將頸總和線栓一起結(jié)扎住,*好是結(jié)扎雙道,記錄線栓插入時間,在將動脈夾另一邊近心端頸總結(jié)扎住,去掉動脈夾; 注意縫合時不要將線栓帶出,*后根據(jù)評分來判斷成模性。 線栓法是國內(nèi)外*常用的制作腦局部缺血再灌注損傷的方法。Koizumi 于 1986 年首先報道了用線栓法制備大鼠腦缺血再灌注模型,此后 Longa等對該方法進行了改良。線栓法腦缺血模型的研究已經(jīng)取得很多突破和進展,但模型制備的穩(wěn)定性受很多因素的影響,如小鼠體質(zhì)量、線栓的選擇等。小鼠缺血再灌注損傷后腦梗死體積百分比的變化可以為研究治*腦卒中藥物時間窗提供基礎(chǔ)依據(jù),對進一步深入研究大鼠缺血再灌注損傷模型有重要的意義。艾菱菲生物提供定制化的模型,根據(jù)客戶的特定要求進行設(shè)計和構(gòu)建。北京動物實驗?zāi)X梗MCAO模型造模方法
SD大鼠MCAO模型作為世界上*通用的模型之一,在其制作時為了達成較高的成功率也需要不斷的探索和努力,我們再次總結(jié)了難點和問題點,希望這篇文章可以為大家制備模型提供參考。 (1)麻醉時間,麻醉程度適中,過淺影響操作,過深導(dǎo)致死亡。 (2)血管分離,在分離右側(cè)CCA、ECA、ICA時,要注意迷走神經(jīng)的保護, 減少對迷走神經(jīng)的損傷, 盡量避免對迷走神經(jīng)的直接牽拉。 (3)術(shù)中狀態(tài)監(jiān)護,例如發(fā)現(xiàn)呼吸異常,用鑷子將大鼠舌頭牽拉至嘴角一側(cè),防止舌頭根部堵塞呼吸道出現(xiàn)窒息情況。 (4)手術(shù)視野,可以制備金屬勾,用橡皮筋纏繞連結(jié)金屬鉤固定在固定板上,從而使手術(shù)切口左右上下拉開,擴大手術(shù)視野。上海本地腦梗MCAO模型注意縫合時不要將線栓帶出,*后根據(jù)評分來判斷成模性。
采用Longa等的5級4分法標準對模型動物進行評價,0分:無神經(jīng)功能缺損癥狀;1分:出現(xiàn)左側(cè) Honer征,輕度神經(jīng)功能缺損;2分:提尾對側(cè)前肢內(nèi)旋,肩內(nèi)收,中度神經(jīng)功能缺損;3分:向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈、向?qū)?cè)傾倒,重度神經(jīng)功能缺損;4分:不能自發(fā)行走,部分意識喪失。鼠側(cè)傾倒,評分為3分。 沿腦橋上界面切斷,去除嗅球,稱全腦重,立即放入-20℃冰箱, 20 min 后取出,由前向后做連續(xù)冠狀切片(切片厚度2 mm)。將腦切片置入0.1% TTC溶液中,后放入恒溫振蕩器中,37℃避光染色30 min,將腦切片取出后放入固定液中固定 24 h,取出腦片,相機拍照,用 Motic Images Plus 顯微圖像分析系統(tǒng)計算腦梗死面積和梗死體積。
在科研領(lǐng)域,實驗外包團隊通常承擔(dān)著以下幾種任務(wù): 1. 實驗設(shè)計和執(zhí)行:實驗外包團隊可以根據(jù)科研人員的需求,設(shè)計并執(zhí)行各種實驗。他們能夠根據(jù)實驗?zāi)康?、實驗條件和實驗要求,選擇合適的實驗方法和技術(shù),確保實驗結(jié)果的準確性和可靠性。 2. 數(shù)據(jù)分析和解釋:實驗外包團隊還負責(zé)實驗數(shù)據(jù)的分析和解釋。他們能夠利用專業(yè)的數(shù)據(jù)分析工具和方法,對實驗數(shù)據(jù)進行處理和分析,提取有用的信息,為科研人員提供有價值的見解和建議。 3. 實驗結(jié)果評估和報告:實驗外包團隊會對實驗結(jié)果進行評估和報告。他們會對實驗結(jié)果進行統(tǒng)計和分析,評估實驗的可靠性和有效性,并撰寫詳細的實驗報告。這些報告可以為科研人員提供有價值的參考和依據(jù)。動物疾病模型的標準化和規(guī)范化非常重要,因為這可以確保研究結(jié)果的可重復(fù)性和可比性.
TTC染色如何測定腦梗MCAO面積-TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是呼吸鏈中吡啶—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色,而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降,不能反應(yīng),故不會產(chǎn)生變化呈蒼白。將模型動物大鼠安樂死,解剖取材完整的腦組織,在-20℃速凍20min,便于切片。切片切成6片,每隔2mm切一片。將切片至于2%TTC磷酸緩沖液(PH 7.4)溶液中,用錫箔紙蓋住培養(yǎng)皿,放入37℃溫箱30min,15min后翻動腦切片,使其均勻接觸到染液。在實驗中,研究人員會觀察動物的行為表現(xiàn),例如運動協(xié)調(diào)能力、平衡能力等,以評估神經(jīng)功能缺損的程度。本地腦梗MCAO模型
腦卒中具有高發(fā)病率和高死亡率,嚴重危害人體健康,一直是人們關(guān)心的熱點疾病。北京動物實驗?zāi)X梗MCAO模型造模方法
缺血性腦梗死具有高發(fā)病率、高死亡率、高致殘率的特點。由于小鼠的腦血管解剖特點與人類較為相似,故小鼠廣泛應(yīng)用于缺血性腦梗死的研究當中。缺血性腦梗死除了會影響缺血的區(qū)域之外,還會影響相關(guān)的神經(jīng)甚至整個中*神經(jīng)系統(tǒng)。因此小鼠缺血性腦梗模型有助于研究神經(jīng)連接和大腦整體的改變。這有助于推動缺血性腦卒中等腦科學(xué)的進步。 進一步研究小鼠缺血性腦梗死模型,科學(xué)家們可以深入了解腦梗死的發(fā)病機制、病理生理過程以及神經(jīng)功能損害。通過不斷優(yōu)化實驗方法和技術(shù),研究人員可以更精確地模擬人類缺血性腦梗死的臨床表現(xiàn),為臨床治*提供有力的實驗依據(jù)。北京動物實驗?zāi)X梗MCAO模型造模方法