無機鹽淀粉瓊脂

來源: 發(fā)布時間:2023-05-16

要獲得微生物純培養(yǎng),必須避免雜菌污染,因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養(yǎng)基而言,更是要進行嚴格的滅菌。對培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌,一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2,121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中,長時間高溫會使某些不耐熱物質(zhì)遭到破壞,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖,因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2,112.6℃15-30分鐘進行滅菌,某些對糖類要求較高的培養(yǎng)基,可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合。致病菌常用的培養(yǎng)基包括營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊培養(yǎng)基。無機鹽淀粉瓊脂

培養(yǎng)基

還有一些鑒別性培養(yǎng)基,是利用細菌特有的各種酶系統(tǒng),能分解利用各種特定的糖、醇、氨基酸或其他基質(zhì)而產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、產(chǎn)堿或產(chǎn)生其他可見物質(zhì),依此進行細菌的鑒別,例如常用的生化培養(yǎng)基。用于細菌生化特性試驗的培養(yǎng)基特點是在無糖的基礎培養(yǎng)基中加人某種特定的基質(zhì),并加人指示劑,細菌在此類培養(yǎng)基中的一系列生化反應結(jié)果,均通過指示劑顯示出來。此類培養(yǎng)基為生化反應鑒別培養(yǎng)基。根據(jù)用量又可分為常量生化培養(yǎng)基和微量生化培養(yǎng)基。值得注意的是生化試驗培養(yǎng)基的某些成分受高溫、pH等諸多因素的影響,在配制和使用時,應根據(jù)實際情況嚴格掌握,防止有效成分被破壞,以保障其使用效果。布氏活菌苗瓊脂培養(yǎng)基需要控制pH值、溫度、氣氛等因素,以保證培養(yǎng)基的穩(wěn)定性。

無機鹽淀粉瓊脂,培養(yǎng)基

培養(yǎng)基按成分分類有哪些?上海瑞楚生物科技有限公司小編介紹,根據(jù)培養(yǎng)基的組成成分,可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基兩大類。天然培養(yǎng)基(native medium) 含有不完全明了化學成分的天然物質(zhì)。如蛋白胨、牛肉膏(粉)、肉浸液、玉米漿、血液、馬鈴薯等。用此類材料配成的培養(yǎng)基很難做到不同批號之間質(zhì)量的穩(wěn)定一致,因此在選用原料時務必注明其商品名稱、生產(chǎn)廠家及批號,對不同來源的原料應先做小樣試驗。此種培養(yǎng)基成本較低,細菌繁殖較好,一般細菌培養(yǎng)以選用天然培養(yǎng)基為主。

鑒別培養(yǎng)基(differential media) 在培養(yǎng)基中加入某一反應底物和指示劑,以區(qū)別某些微生物的特性從而鑒別之。又分一般鑒別培養(yǎng)基和選擇性鑒別培養(yǎng)基。只用于區(qū)別不同微生物種類的培養(yǎng)基稱為-般鑒別培養(yǎng)基,此類培養(yǎng)基中一般不加抑菌劑而只含指示劑,如克氏雙糖鐵培養(yǎng)基,含有葡萄糖及乳糖,以酚紅作為指示劑,觀察培養(yǎng)基底層與斜面的顏色變化判定細菌對葡萄糖和乳糖的發(fā)酵能力,加人檸檬酸鐵銨,培養(yǎng)后觀察是否產(chǎn)生黑色沉著以判定細菌是否分解蛋白胨中的含硫氨基酸而產(chǎn)生硫化氫;又如伊紅-美藍瓊脂,含有乳糖(反應底物)、伊紅-美藍(指示劑)用以鑒別大腸埃希菌、腸道病原菌和其他雜菌。一般鑒別培養(yǎng)基的特點是在配方中都含有指示劑,并可用于區(qū)別不同種類的微生物,有些鑒別培養(yǎng)基也可同時作為細菌的特殊需要用來分離培養(yǎng)某些細菌,如胰酪胨大豆瓊脂和巧克力色血瓊脂。LB培養(yǎng)基是普遍使用的通用培養(yǎng)基,適用于大多數(shù)腸道菌和非腸道菌的培養(yǎng)。

無機鹽淀粉瓊脂,培養(yǎng)基

以MS培養(yǎng)基母液為基礎,向潔凈鋁鍋中順序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,鐵鹽100×母液20mL,維生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培養(yǎng)基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL。然后加入實際配制培養(yǎng)基體積約2/3-3/4的蒸餾水,加入40g蔗糖后攪拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl調(diào)整pH值至5.8-6.0。加入14g瓊脂,將鋁鍋置于電爐上,攪拌加熱使瓊脂完全溶化,然后用蒸餾水定容至終體積2L,繼續(xù)加熱幾分鐘使之混合均勻后分裝于三角瓶中。在有些情況下,培養(yǎng)基還需要進行一些化學處理。0.1ml桿菌肽溶液(200U/ml)

培養(yǎng)基的配方也會受到環(huán)境、藥物和其他外部壓力的影響,因此,在實際應用中需要不斷進行調(diào)整和改進。無機鹽淀粉瓊脂

1951年厄爾開發(fā)了供動物細胞體外生長的人工合成培養(yǎng)基(MEM)。合成培養(yǎng)基的種類相當多。合成培養(yǎng)基成分已知,便于對實驗條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代,因此,細胞培養(yǎng)中使用的基礎合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。動物血清成分復雜,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清對細胞生長很有效,但后期對培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質(zhì)量的動物血清來源有限,成本高,限制了它的大量使用。無血清培養(yǎng)基不加動物血清,在基礎培養(yǎng)基中加入細胞生長有效因子等。無機鹽淀粉瓊脂

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