乳酸桿菌選擇性瓊脂(LBS瓊脂)

來源: 發(fā)布時間:2023-03-21

1951年厄爾開發(fā)了供動物細胞體外生長的人工合成培養(yǎng)基(MEM)。合成培養(yǎng)基的種類相當多。合成培養(yǎng)基成分已知,便于對實驗條件的控制。但與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代,因此,細胞培養(yǎng)中使用的基礎(chǔ)合成培養(yǎng)基還必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。動物血清成分復雜,各種生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清對細胞生長很有效,但后期對培養(yǎng)產(chǎn)物的分離、提純以及檢測造會成一定困難。另外高質(zhì)量的動物血清來源有限,成本高,限制了它的大量使用。無血清培養(yǎng)基不加動物血清,在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入細胞生長有效因子等。羧甲基纖維素鈉(CMC)培養(yǎng)基 改良斯蒂芬遜培養(yǎng)基 HP培養(yǎng)基基礎(chǔ) 9K培養(yǎng)基 BG11瓊脂培養(yǎng)基。乳酸桿菌選擇性瓊脂(LBS瓊脂)

乳酸桿菌選擇性瓊脂(LBS瓊脂),培養(yǎng)基

細菌培養(yǎng)基之牛肉膏瓊脂培養(yǎng)基:牛肉膏0.3g ,蛋白胨1.0g,氯化鈉0.5g,瓊脂1.5g,水100ml在燒杯內(nèi)加水100ml,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化鈉,用蠟筆在燒杯外作上記號后,放在火上加熱。待燒杯內(nèi)各組分溶解后,加入瓊脂,不斷攪拌以免粘底。等瓊脂完全溶解后補足失水,用10%鹽酸或10%的氫氧化鈉調(diào)整pH值到7.2-7.6,分裝在各個試管里,加棉花塞,用高壓蒸汽滅菌:1.05千克每平方厘米、121攝氏度維持15-30分鐘。牛心培養(yǎng)基:取新鮮牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀細細剁成肉末后,加入500毫升蒸餾水和5克蛋白胨。在燒杯上做好記號,煮沸,轉(zhuǎn)用文火燉2小時。過濾,濾出的肉末干燥處理,濾液pH值調(diào)到7.5左右。每支試管內(nèi)加入10毫升肉湯和少量碎末狀的干牛心,滅菌,備用。去氧膽酸鹽檸檬酸鹽瓊脂Hoyle培養(yǎng)基基礎(chǔ) VM培養(yǎng)基 羧甲基纖維素鈉(CMC)液體培養(yǎng)基 YSG液體培養(yǎng)基基礎(chǔ) 蔗糖硫胺培養(yǎng)基。

乳酸桿菌選擇性瓊脂(LBS瓊脂),培養(yǎng)基

培養(yǎng)基的分類有幾種呢?按照培養(yǎng)基用途區(qū)分:1.基礎(chǔ)培養(yǎng)基,一類含有一般微生物生長繁殖所需基本營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。2.加富培養(yǎng)基,一類在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入血、血清、動植物組織提取液制成的培養(yǎng)基。用于培養(yǎng)要求比較苛刻的某些微生物。3.選擇培養(yǎng)基,一類根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基,具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌的功能,普遍用于菌種篩選等領(lǐng)域。

HBS 和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在 Eagle′s(2.2g/L) 中比在 Hanks′(0.35g/L)中高。碳酸氫鈉需用高水平的 CO2 平衡,以維持溶液的 PH 值。Eagle′s 液在空氣水平的CO2中,溶液會變堿,Hanks′液在 CO2 培養(yǎng)箱中會變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織,需要用Eagle′s液,如果只是清洗將要在細胞培養(yǎng)基中儲存的組織,用Hanks′液就可以了。由于大多數(shù)細胞適宜pH為7.2-7.4,偏離此范圍可能對細胞生長將產(chǎn)生有害的影響。但各種細胞對pH的要求也不完全相同,原代培養(yǎng)細胞一般對pH變動耐受差,無限細胞系耐受力強。但總體來說,細胞耐酸性比耐堿性強一些。在配制培養(yǎng)用液時,需要注意一點:新配的培養(yǎng)基在經(jīng)過 0.10um 或 0.22um 濾膜過濾時,溶液的pH 還會向上浮動0.2左右。DTA培養(yǎng)基DTA瓊脂培養(yǎng)基 胰酪胨大豆羊血瓊脂(TSSB)基礎(chǔ) 含0.2%可溶性淀粉的BCP脫脂奶粉平板計數(shù)培養(yǎng)基。

乳酸桿菌選擇性瓊脂(LBS瓊脂),培養(yǎng)基

半固體培養(yǎng)基(half-solid medium) 在液體培養(yǎng)基中加人0.2%~0.5%的瓊脂粉,加熱溶解后冷卻即成,以倒置不流動的較軟狀態(tài)為宜,一般供細菌動力試驗、菌種傳代、保存和儲運標本之用。固體培養(yǎng)基(solid medium) 培養(yǎng)基中含有足量的凝固劑(瓊脂粉>0.5%),在常溫下能保持固體狀態(tài)。此類培養(yǎng)基大都用于微生物的分離、純化、藥敏試驗及菌苗制造。如營養(yǎng)瓊脂、營養(yǎng)斜面、SS瓊脂、TCBS瓊脂等。此外,還有一些特殊用途的培養(yǎng)基,如用血清或雞蛋做凝固劑配成的呂氏血清斜面培養(yǎng)基、雞蛋斜面培養(yǎng)基等。脫硫弧菌培養(yǎng)基基礎(chǔ) Waksman液體培養(yǎng)基 Starky液體培養(yǎng)基 Starky硫代硫酸鈉液體培養(yǎng)基。RV沙氏增菌肉湯

葡萄糖瓊脂 動力-吲哚-尿素(MIU)培養(yǎng)基基礎(chǔ) V-P半固體瓊脂(VP) 西蒙氏檸檬酸鹽瓊脂枸櫞酸鹽瓊脂。乳酸桿菌選擇性瓊脂(LBS瓊脂)

培養(yǎng)基分類有哪些?營養(yǎng)缺陷型:野生型菌株經(jīng)過人工誘變或者自然突變失去合成某種營養(yǎng)(氨基酸,維生素,核酸等)的能力,只有在基本培養(yǎng)基中補充所缺乏的營養(yǎng)因子才能生長,稱為營養(yǎng)缺陷型(auxotroph)。營養(yǎng)缺陷型是一種生化突變株,它的出現(xiàn)是由基因突變引起的。遺傳信息的載體是一系列為酶蛋白編碼的核酸系列,如果核酸系列中某堿基發(fā)生突變,由該基因所控制的酶合成受阻,該菌株也因此不能合成某種營養(yǎng)因子,使正常代謝失去平衡。乳酸桿菌選擇性瓊脂(LBS瓊脂)

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