細胞凍存概念:細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。細胞凍存和復蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質等的改變,進而促使細胞死亡。根據(jù)密度調整細胞凍存 液用量。珠海無血清細胞凍存液直銷廠家
細胞凍存液的配置成分及比例: 細胞凍存液是含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液。在凍存前比較好換一次培養(yǎng)液。 配置方法: 1、將DMSO和小牛血清加入培養(yǎng)液中,各自含量占總體積的10%; 2、然后用濾膜過濾配置好的細胞凍存液; 3、用**保存瓶分裝保存?zhèn)溆眉纯?15%(常見為10%)的DMSO或甘油,含10%-20%血清的凍存培養(yǎng)液。一般來講血清含量可以在10%-90%之間調整,凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質,如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細胞。有人親測10%血清凍存細胞,結果證明是可以的,但高血清比例的凍存液更有助于提高細胞活力,此外嬌貴的細胞可以適當提高凍存液中血清的比例以保證獲得更高的存活率及活力。合肥正規(guī)無血清細胞凍存液廠家直銷無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能:2-8℃即可穩(wěn)定保存,無需冷凍,即取即用。
細胞凍存秘籍:細胞復蘇細胞復蘇:如果細胞保存在液氮中而不是液氮之上時,應特別注意。如果在儲存期間凍存管發(fā)生泄漏,則會緩慢地充滿液氮;在解凍時,液氮轉換回氣相可能會導致。安全注意事項:將凍存管從液氮罐中取出并解凍時,請始終穿戴防護服,手套和面罩或護目鏡。A. 通過在37℃的水浴中輕輕晃動解凍細胞。為了減少污染的可能性,O形圈和蓋子應該保持在水面之上。解凍應該是快速的(大約2分鐘)。一旦內(nèi)容物解凍,將凍存管從水浴中取出,浸入或用70%乙醇噴灑。之后的操作都應該在嚴格的無菌條件下進行。B. 將內(nèi)容物轉移到25平方厘米的組織培養(yǎng)瓶或100mm組織培養(yǎng)皿中,并用完全培養(yǎng)基稀釋。對于大多數(shù)細胞系來說,沒有必要立即除去低溫保護劑。正常情況下,解凍后8-24小時更換培養(yǎng)基以除去保護劑。然而,對于對冷凍保護劑敏感的那些細胞系,可以離心細胞懸液以去除冷凍保護劑。然后將細胞放置在細胞培養(yǎng)箱,37℃培養(yǎng)。在細胞恢復期間,避免培養(yǎng)基過堿。
細胞凍存的基本原理:細胞代謝過程需要各種蛋白酶的參與,而這些蛋白酶在環(huán)境溫度低于-70℃時會集體不工作,低溫貯藏的目的是通過較低溫使細胞代謝活動近乎停止。細胞因此進入休眠狀態(tài),使細胞“不會老”,所以可以長期保存。因為凍融過程對所有細胞和組織都是有一定傷害的,因此,需要開發(fā)出有效的技術來防止細胞死亡和損傷。低溫保護劑可保護細胞不受細胞內(nèi)冰凍影響,目前多采用DMSO,甘油,乙二醇和丙二醇等滲透型低溫保護劑。它們的作用機制包括:自由進入細胞,取代水,使冰點下降,充當鹽的二次溶劑,提高細胞膜對水的通透性。無血清細胞凍存液使用方法:加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中。
無血清細胞凍存液是一種無血清細胞凍存液,通用于各種動物細胞株(tumour細胞和常規(guī)細胞),凍存細胞可在-80℃長期保存(>5年)。CELLSAVING配方成分明確,不含動物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細胞的安全。細胞凍存液操作簡便,無需程序降溫,可在-80度或液氮中長期保存。相比于傳統(tǒng)凍存液,埃澤思生物推出的此款凍存液可以明顯增加細胞活力,穩(wěn)定保持細胞特性,以及細胞多能性,并且可以穩(wěn)定保持細胞的正常核型和增殖能力。細胞凍存液已經(jīng)經(jīng)過動物直接注射實驗檢測,包括靜脈注射,皮下注射途徑,無明顯細胞毒性,動物安全性非常高。在細胞內(nèi)外進行雙重保護,較大提高了細胞復蘇存活率。寧波無血清細胞凍存液直銷價
無血清凍存液用途:無血清細胞凍存液用于醫(yī)院樣本庫細胞樣本保存。珠海無血清細胞凍存液直銷廠家
無血清細胞凍存液,含多種保護劑成分。一些保護劑,易于穿透細胞,避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細胞,同時另一些保護劑不能穿透細胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結合細胞外的水分子,降低細胞外溶液的電解質濃度,減少陽離子進入細胞的數(shù)量,為多種保護劑組合,在細胞內(nèi)外進行雙重保護,較大提高了細胞復蘇存活率。無血清細胞凍存液不含牛血清,無動物源組份。2-8℃即可穩(wěn)定保存,無需冷凍,即取即用。凍存細胞,無需程序降溫。凍存細胞復蘇率在90%以上。珠海無血清細胞凍存液直銷廠家