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糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來(lái)顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過(guò)碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎┎籗chiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過(guò)氧化,這是很關(guān)鍵的步驟。冷凍切片染色時(shí)間盡量要短。江蘇品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家直銷
糖原染色的原理與操作方法是什么:(1)原理:過(guò)碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無(wú)色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過(guò)碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。細(xì)胞的組織化學(xué)方法,是研究細(xì)胞成分常用的方法之一。它是利用化學(xué)試劑與細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),從而在細(xì)胞局部形成有色沉淀物,再通過(guò)顯微鏡對(duì)組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位、定量研究安徽口碑好的糖原染色試劑盒平均價(jià)格切出的石蠟切片要好,不能有皺褶或者刀痕,切片不能太厚。
糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過(guò)碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無(wú)色品紅結(jié)合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng)。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時(shí)過(guò)濾,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗處24h,無(wú)色即可放冰箱中保存,呈微紅色,則加活性炭1~2g,吸附過(guò)濾使成無(wú)色液體,放冰箱中保存。若溶液變紅,即不能再用。(2)10g/L過(guò)碘酸水溶液:過(guò)碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。
可以通過(guò)pas染色計(jì)算糖原含量嗎:PAS染色又稱過(guò)碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用來(lái)顯示糖元和其它多糖物質(zhì).具體現(xiàn)象例舉:陽(yáng)性反應(yīng),胞漿呈紅色,陰性反應(yīng),胞漿呈無(wú)色;在正常血片中RBC不染色;PLT染成深紅色;中性粒細(xì)胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細(xì)胞有陽(yáng)性顆粒;單核細(xì)胞的胞漿染成淡紅色,可含有細(xì)小或粗大陽(yáng)性顆粒;少數(shù)淋巴細(xì)胞的胞漿內(nèi)含有少許小的淡紅色或紅色顆粒;正常骨髓的幼稚細(xì)胞和有核RBC都不染色;巨核細(xì)胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.巨核細(xì)胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色.顏色深淺與濃度相關(guān)~糖類從組織化學(xué)技術(shù)角度來(lái)分,可分為多糖、中性粘液物質(zhì)。
可以通過(guò)pas染色計(jì)算糖原含量嗎:PAS染色又稱過(guò)碘酸雪夫染色,糖原染色.一般用來(lái)顯示糖元和其它多糖物質(zhì). 具體現(xiàn)象例舉:陽(yáng)性反應(yīng),胞漿呈紅色,陰性反應(yīng),胞漿呈無(wú)色;在正常血片中RBC不染色; PLT染成深紅色;中性粒細(xì)胞胞漿染成紅色或深紅色,有些細(xì)胞有陽(yáng)性顆粒;單核細(xì)胞的胞漿染成淡紅色,可含有細(xì)小或粗大陽(yáng)性顆粒;少數(shù)淋巴細(xì)胞的胞漿內(nèi)含有少許小的淡紅色或紅色顆粒;正常骨髓的幼稚細(xì)胞和有核RBC都不染色;巨核細(xì)胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色. 巨核細(xì)胞的胞漿內(nèi)呈彌散紅色或深紅色. 顏色深淺與濃度相關(guān)常需要分別選用相應(yīng)的顯示這些成分的染色方法進(jìn)行特殊染色。浙江提供糖原染色試劑盒推薦廠家
在滴加染液時(shí),務(wù)必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,避免浪費(fèi)試劑。江蘇品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家直銷
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1 實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例,均來(lái)自我室實(shí)驗(yàn)材料。1.2 主要試劑1.2.1 AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,其配方:無(wú)水乙醇80mL,冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL,冰醋酸100mL,95%酒精600mL。1.2.3 過(guò)碘酸溶液 0.5g過(guò)碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過(guò)碘酸0.8g,95%乙醇70mL,醋酸鈉0.27g,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4 無(wú)色品紅液(Schiff氏液) 在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,在保持微沸的情況下,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動(dòng)約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色)。冷卻到50℃時(shí),過(guò)濾,加入1N鹽酸50mL,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,塞住瓶口,搖動(dòng)容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),然后避光放置或冰箱內(nèi)24h江蘇品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家直銷