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細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的:細(xì)胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似,機(jī)體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成,但是其結(jié)構(gòu)微小復(fù)雜,內(nèi)部任何的物理損傷對于它都是致命的。水在低于零度的條件下會結(jié)冰。如果將細(xì)胞懸浮在純水中,隨著溫度的降低,細(xì)胞內(nèi)外的水份都會結(jié)冰,所形成的冰晶會造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡,這種因細(xì)胞內(nèi)部結(jié)冰而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為細(xì)胞內(nèi)冰晶的損傷。如果將細(xì)胞懸浮在溶液中,隨著溫度的降低,細(xì)胞外部的水分會首先結(jié)冰,從而使得未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高。如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時間過長,細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會受到損壞,細(xì)胞便發(fā)生滲漏,在復(fù)溫時,大量水分會因此進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),造成細(xì)胞死亡。這種因保存溶液中溶質(zhì)濃度升高而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為溶質(zhì)損傷或稱溶液損傷。無血清凍存液用途:科研高校,無血清細(xì)胞凍存液用于細(xì)胞株凍存。金華太原無血清細(xì)胞凍存液
細(xì)胞凍存液的配制可選用10%的DMSO加上90%的小牛血清,可以現(xiàn)用現(xiàn)配。除了這個方式,還可選擇20%的DMSO機(jī)上80%的小牛血清,配成兩倍的儲存液,在使用時細(xì)胞懸液和凍存液按照1:1的比例混勻使用,特別的方便。凍存液可直接置于-20攝氏度的環(huán)境中保存。使用細(xì)胞凍存液需要注意以下幾點:1、在使用凍存液前,需要確保細(xì)胞凍存液已經(jīng)完全融化,并要輕輕的混勻。對融化后的細(xì)胞凍存液要置于4℃的環(huán)境中保存。2、使用凍存液之前應(yīng)該確保凍存前的細(xì)胞生長情況比較良好,比如說細(xì)胞需要處于對數(shù)生長期,并且凍存的時候存活率大于90%。3、在使用細(xì)胞凍存液期間,為了保證可以發(fā)揮較佳的效果,建議將細(xì)胞凍存在液氮之中,這樣可以長時間的進(jìn)行保存。如果說將細(xì)胞置于-80℃的環(huán)境下保存,那么保存的時間大約為1年。4、細(xì)胞凍存液如果需要做標(biāo)記的話,要使用耐受有機(jī)溶劑的馬克筆進(jìn)行標(biāo)記,以防被酒精或異丙醇等擦掉,不能辨識。昆明無血清細(xì)胞凍存液進(jìn)貨價無血清凍存液特性:適合無血清培養(yǎng)細(xì)胞與含血清培養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞凍存,我們應(yīng)該注意哪些事項:1、凍存細(xì)胞是為了留種,所以要選擇高濃度的細(xì)胞量進(jìn)行凍存。正常情況下,當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到1*105/ml時即可凍存,具體是多少量主要根據(jù)個人觀察。2、二甲基亞砜(DMSO)因為穿透細(xì)胞的能力較強(qiáng),因此作為常用的凍存劑,也可以叫做細(xì)胞保護(hù)劑加入到細(xì)胞懸液中。網(wǎng)上有些分享說道,如果選用DMSO,整個細(xì)胞懸液的制作過程都要在4℃環(huán)境下進(jìn)行。本人采用過這種方法凍存過A549和某一原代細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)A549復(fù)蘇存活率和正常凍存的過程相比并沒有明顯區(qū)別,而原代細(xì)胞的接種率確實有所上升,可能是因為是A549細(xì)胞比較皮實,這種方法更適用于比較脆弱的細(xì)胞吧。
凍存細(xì)胞注意事項:冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點,并可減緩冷卻速度,較大降低冰晶形成的危險(冰晶可損傷細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。注:DMSO可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時,應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。建議可使用廠商生產(chǎn)的無血清細(xì)胞凍存液,使用方便,復(fù)蘇率高。注意冷凍保護(hù)劑DMSO的品質(zhì):DMSO應(yīng)為試劑級等級,無菌且無色,以5-10ml小體積分裝,4℃避光保存,勿作多次解凍。無血清凍存液使用方法:將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。
細(xì)胞凍存概念:細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品特色:可直接存放于-80℃冰箱凍存,無需經(jīng)過費時的程序降溫過程(省時、省錢)。長沙無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家
無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:特別配方(主要成分為DMSO和氨基酸)有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力。金華太原無血清細(xì)胞凍存液
無血清快速細(xì)胞凍存液,通用于各種動物細(xì)胞株。特別配方具有有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力。不含動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細(xì)胞的凍存,也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞的凍存。產(chǎn)品特色:1.高安全性,完全使用醫(yī)藥品等級原料進(jìn)行生產(chǎn),不含動物成分,病毒、霉菌和支原體等污染可能性低,各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。2.細(xì)胞存活率高,無批次差異。3.完全凍存液配方,可直接使用,方便簡捷,可直接存放于-80℃冰箱凍存,無需經(jīng)過費時的程序降溫過程(省時、省力、省錢)。金華太原無血清細(xì)胞凍存液