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染色的原理和臨床意義：在同一張涂片上進(jìn)行兩種酯酶染色的方法稱為酯酶雙染色。多數(shù)采用一種特異性酯酶加一種非特異性酯酶染色，常用的有α-醋酸萘酚酯酶與氯乙酸AS－D萘酚酯酶雙染色、α-丁酸萘酚酯酶與氯乙酸AS－D萘酚酯酶雙染色等。反應(yīng)的原理基本上同各自的染色原理，同一張涂片上的細(xì)胞要分別在兩種不同的基質(zhì)液中作用一定時(shí)間，較后復(fù)染、顯微鏡觀察。酯酶雙染色可同時(shí)觀察兩種不同的白血病細(xì)胞，因此在鑒別白血病類型方面明顯優(yōu)于單項(xiàng)染色。急性粒－單核細(xì)胞白血病該染色法在急性粒－單核細(xì)胞白血病的同一張涂片上可分別出現(xiàn)α-NBE染色和NAS-DCE染色陽(yáng)性反應(yīng)的細(xì)胞，甚至少數(shù)病例在單個(gè)細(xì)胞內(nèi)同時(shí)出現(xiàn)以上兩種酯酶染色的雙重陽(yáng)性反應(yīng)，因此酯酶雙染色反應(yīng)在急性粒－單核細(xì)胞白血病的診斷上具有獨(dú)特價(jià)值。無(wú)水酒精滲透較慢，而且容易產(chǎn)生極化。浙江品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)

糖原染色：細(xì)胞內(nèi)含1，2-乙二醇基的多糖類經(jīng)過(guò)碘酸氧化后產(chǎn)生醛基，與特殊染液作用，使無(wú)色品紅變成紅色化合物，沉淀于胞質(zhì)之中。紅色的深淺與細(xì)胞中起反應(yīng)的1，2-乙二醇基的量呈正比。用于不典型巨核細(xì)胞與李—斯細(xì)胞的鑒別，前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽(yáng)性，后者為陰性或弱陽(yáng)性；用于高雪細(xì)胞和尼曼一匹克細(xì)胞的鑒別，前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽(yáng)性，而后者反應(yīng)為陰性或弱性。正常值正常情況下，紅細(xì)胞系統(tǒng)的原、幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞；粒細(xì)胞系統(tǒng)的原粒細(xì)胞、原單核細(xì)胞和大多數(shù)淋巴細(xì)胞為陰性反應(yīng)。自早幼粒階段以后的粒細(xì)胞和幼單核細(xì)胞可呈弱陽(yáng)性反應(yīng)。湖南正規(guī)糖原染色試劑盒進(jìn)貨價(jià)骨骼肌活檢臨床操作及染色質(zhì)量控制。

糖原染色在使用過(guò)程中需要注意以下幾個(gè)方面：PAS染色時(shí)需于暗處加蓋反應(yīng)，染色時(shí)間10～20min（染色時(shí)間長(zhǎng)短取決于試劑的質(zhì)量和環(huán)境溫度，SO濃度高，染色時(shí)間適當(dāng)縮短；環(huán)境溫度高，染色時(shí)間也應(yīng)適當(dāng)縮短，反之則需適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間）。染色過(guò)程中不能接觸伊紅，以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時(shí)，較好作消化對(duì)照，即取兩張連續(xù)切片，其中一張脫蠟至水后，用1％淀粉酶于37℃消化30min，水洗后與不經(jīng)消化處理的切片一起置0.5％高碘酸液氧化，如經(jīng)消化處理的切片染色陰性，不經(jīng)消化處理的切片染色陽(yáng)性，即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉（鉀）溶液配置后，不能保存，因此，必須現(xiàn)配現(xiàn)用，用過(guò)一次即應(yīng)廢棄。各種試劑必須是化學(xué)純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥。

糖原pas染色液配制及使用方法：1、常規(guī)固定，常采用10%的福爾馬林，常規(guī)脫水包埋。2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水；冰凍切片直接入蒸餾水。3、自來(lái)水沖洗2～3min，再用蒸餾水浸洗2次。4、入過(guò)碘酸溶液，室溫放置，一般不宜超過(guò)10min。5、自來(lái)水沖洗1次，再用蒸餾水浸洗2次。6、入SchiffReagent，置于室溫陰暗處浸染。7、自來(lái)水沖洗10min。8、入蘇木素染色液，染細(xì)胞核。9、酸性乙醇分化液分化。_x005f_x005f_x005f_x000c_10、自來(lái)水沖洗10～15min，更換蒸餾水清洗，使其返藍(lán)。11、逐級(jí)常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明，中性樹膠封固。應(yīng)該盡可能割取生活著的組織塊，并隨即投入固定液。

PAS技術(shù)是很少可檢測(cè)不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法，但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原)，需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來(lái)催化糖原的糖苷鍵水解，形成水溶性的雙糖-麥芽糖，在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段，但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮，不主張應(yīng)用唾液。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色，在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置。再糖原染色,可鑒別是糖原還是其他多糖類物質(zhì)。福建哪家提供糖原染色試劑盒進(jìn)貨價(jià)

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糖原及粘液染色法注意事項(xiàng)：1、糖原的固定要及時(shí)，而且標(biāo)本要新鮮。2、如用無(wú)水酒精作糖原的固定劑，有它的弊病，因無(wú)水酒精滲透較慢，而且容易產(chǎn)生極化，（極化是糖原顆粒趨向于細(xì)胞的一端）。故用Gendre氏固定液效果較佳，其配法如下：苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各種試劑必須化學(xué)純，亞硫酸鈉須有濃厚氣味，器皿必須潔凈而干燥，染色缸亦是。4、如果Schiff氏試劑，在經(jīng)過(guò)活性碳吸附漂白后不顯無(wú)色，首先應(yīng)考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃，使用時(shí)可考慮適當(dāng)?shù)脑黾佑昧?。其次考慮堿性品紅本身，常常雖屬同一生產(chǎn)廠家，但不同批號(hào)，其效果就可能不同，應(yīng)特別引起注意。浙江品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家供應(yīng)