染色的原理和臨床意義:在同一張涂片上進(jìn)行兩種酯酶染色的方法稱為酯酶雙染色。多數(shù)采用一種特異性酯酶加一種非特異性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色、α-丁酸萘酚酯酶與氯乙酸AS-D萘酚酯酶雙染色等。反應(yīng)的原理基本上同各自的染色原理,同一張涂片上的細(xì)胞要分別在兩種不同的基質(zhì)液中作用一定時(shí)間,較后復(fù)染、顯微鏡觀察。酯酶雙染色可同時(shí)觀察兩種不同的白血病細(xì)胞,因此在鑒別白血病類型方面明顯優(yōu)于單項(xiàng)染色。急性粒-單核細(xì)胞白血病該染色法在急性粒-單核細(xì)胞白血病的同一張涂片上可分別出現(xiàn)α-NBE染色和NAS-DCE染色陽性反應(yīng)的細(xì)胞,甚至少數(shù)病例在單個(gè)細(xì)胞內(nèi)同時(shí)出現(xiàn)以上兩種酯酶染色的雙重陽性反應(yīng),因此酯酶雙染色反應(yīng)在急性粒-單核細(xì)胞白血病的診斷上具有獨(dú)特價(jià)值。保存冰箱備用。溶液如顯淺紅色或草黃色,染色效果較差。北京如何使用糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
特殊染色化學(xué)試劑的選擇:化學(xué)試劑的選擇主要針對自配試劑而言,對于商品化試劑盒則在于染液質(zhì)量。1、一般要求選用很好品牌的化學(xué)試劑,特別是一些染色中關(guān)鍵的試劑。很好的化學(xué)試劑(如Sigma、國藥、阿拉丁、西隴等)是保證高質(zhì)量染液的前提和關(guān)鍵,特別對于染液中的關(guān)鍵試劑尤為重要。如堿性品紅在一些染色液(抗酸、無色品紅、醛品紅等)中均為主要試劑,其質(zhì)量決定了較終的染色效果。如配制無色品紅染液時(shí),所使用的偏重亞硫酸鈉試劑質(zhì)量不合格,則會導(dǎo)致染液配制失敗,無法染出合格的切片。2、純度一般以分析純?yōu)橹鳌?a href="http://xgr585.cn/zdcbsx/edzpou9xeg/16025759.html" target="_blank">江蘇哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒直銷價(jià)糖原染色試劑盒是什么?
PAS染色的臨床意義:1.紅細(xì)胞系統(tǒng):①紅血病或紅白血病時(shí)幼紅細(xì)胞可呈陽性反應(yīng),有時(shí)陽性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比增高,陽性反應(yīng)的程度也很強(qiáng)。有時(shí)紅細(xì)胞也呈陽性反應(yīng)。②缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血(又稱地中海貧血)以及骨髓增生異常綜合征時(shí)幼紅細(xì)胞可呈陽性反應(yīng),有時(shí)陽性反應(yīng)幼紅細(xì)胞的百分比也較高。有時(shí)紅細(xì)胞也可呈陽性反應(yīng)。③巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血和白血病等疾病時(shí),幼紅細(xì)胞為陰性反應(yīng),有時(shí)個(gè)別幼紅細(xì)胞呈陽性反應(yīng)
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑,它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎┎籗chiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關(guān)鍵的步驟。PAS技術(shù)是很少可檢測不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮,不主張應(yīng)用唾液??梢杂^察腎小球基底膜、結(jié)腸杯狀細(xì)胞中性黏液物質(zhì)、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色。
糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個(gè)方面:PAS染色時(shí)需于暗處加蓋反應(yīng),染色時(shí)間10~20min(染色時(shí)間長短取決于試劑的質(zhì)量和環(huán)境溫度,SO濃度高,染色時(shí)間適當(dāng)縮短;環(huán)境溫度高,染色時(shí)間也應(yīng)適當(dāng)縮短,反之則需適當(dāng)延長反應(yīng)時(shí)間)。染色過程中不能接觸伊紅,以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時(shí),較好作消化對照,即取兩張連續(xù)切片,其中一張脫蠟至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后與不經(jīng)消化處理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如經(jīng)消化處理的切片染色陰性,不經(jīng)消化處理的切片染色陽性,即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉(鉀)溶液配置后,不能保存,因此,必須現(xiàn)配現(xiàn)用,用過一次即應(yīng)廢棄。各種試劑必須是化學(xué)純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥。組織石蠟切片的染色檢測。湖南哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒報(bào)價(jià)
素染色液100mlHE染色屬于常規(guī)切片HE染色的明礬蘇木素的一種。北京如何使用糖原染色試劑盒量大從優(yōu)
特染的應(yīng)用價(jià)值:現(xiàn)代病理學(xué)中免疫組織化學(xué)技術(shù)、電子顯微鏡技術(shù)以及其它細(xì)胞及分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用日益普遍,但由于這些技術(shù)要求一定的實(shí)驗(yàn)條件以及所需的試劑價(jià)格較為昂貴,對于一部分病人以及某一些基層醫(yī)院是比較難以接受的。而組織化學(xué)技術(shù)則具有無需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)條件以及較為昂貴的試劑操作又比較簡單的優(yōu)勢,在臨床病理學(xué)診斷中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。比如,當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)色素,是黑色素還是含鐵血黃素以及當(dāng)組織中出現(xiàn)均一化學(xué)物質(zhì)是否為淀粉樣變性等,用組織化學(xué)技術(shù)區(qū)別起來很簡單,所以組織化學(xué)技術(shù),雖然已有幾十年到幾百年的歷史,仍是一個(gè)很有實(shí)用價(jià)值的技術(shù)北京如何使用糖原染色試劑盒量大從優(yōu)